一种卵母细胞中蛋白的检测方法

    公开(公告)号:CN107422128B

    公开(公告)日:2020-06-09

    申请号:CN201710229608.5

    申请日:2017-04-10

    IPC分类号: G01N33/68 G01N33/561

    摘要: 本发明属于蛋白检测领域,具体涉及一种卵母细胞中蛋白的检测方法,包括如下步骤:S1,蛋白样的提取;S2,SDS‑PAGE凝胶电泳流程;S3,转膜;S4,封闭;S5,孵育一抗;S6,孵育二抗;S7,显影。所述蛋白样的提取过程中添加玻璃珠用于充分提取蛋白的方法以及显影过程中自封袋的巧妙运用。相比以往的技术方法,本方法在卵母细胞样的处理方式和显影环节的优化方面实施了创造性的发明和改进,因此显著提高了蛋白检测的效率。本方法通过少量试验材料就能检测低丰度蛋白的方案,检测内参蛋白只需要1个卵母细胞就能测出条带,对于表达丰度较低的蛋白质需要40个左右就能出较清晰的条带,相比现有技术需要不低于200个卵母细胞,效率显著提高。

    一种基于麦管冷冻Tip载体的猪囊胚的冻存和解冻方法

    公开(公告)号:CN110214776A

    公开(公告)日:2019-09-10

    申请号:CN201910585668.X

    申请日:2019-07-01

    IPC分类号: A01N1/02 C12N5/073

    摘要: 本发明公开了一种基于麦管冷冻Tip载体的猪囊胚的冻存和解冻方法,通过S1基于麦管制作的胚胎玻璃化冷冻Tip载体的制备、S2冷冻Tip载体的猪囊胚的冻存、S3冷冻Tip载体的猪囊胚的解冻等步骤,从而实现猪囊胚的高效冻存和解冻。本发明一种基于麦管冷冻Tip载体的猪囊胚的冻存和解冻方法,技术简单,操作便捷,不需要操作人员多大的熟练度,成本低、效率高,显著降低胚胎玻璃化冷冻与解冻过程中的胚胎损伤和丢失的发生率,可以很好地应用于人类生殖医学和畜牧业的推广发展。

    一种具有高效供水功能的简易羊舍

    公开(公告)号:CN110100748A

    公开(公告)日:2019-08-09

    申请号:CN201910508081.9

    申请日:2019-06-12

    IPC分类号: A01K1/03 A01K1/035 B01D29/03

    摘要: 本发明公开了一种具有高效供水功能的简易羊舍,所述简易羊舍的四面均由栅栏围成并且其中简易羊舍的一面栅栏由上层栅栏和下层栅栏组成,所述下层栅栏的一侧设有羊舍门,所述下层栅栏的上部一侧设置有饮水槽,所述饮水槽的上方设置有出水龙头,所述饮水槽的下方设置有电控传送带装置,所述出水龙头连接进水管,所述饮水槽的底部连接出水管,所述电控传送带装置包括传送带,所述传送带上放置有饲料盛放器,传送带的一侧设置有防尘板,所述防尘板设置于下层栅栏的下方。本发明便于向饲养于羊舍中羊进行供水,保证羊的正常生长。

    一种快速检测猪胚胎全基因组转录活性的方法

    公开(公告)号:CN109554484A

    公开(公告)日:2019-04-02

    申请号:CN201811552309.6

    申请日:2018-12-19

    IPC分类号: C12Q1/6888

    摘要: 本发明公开了一种快速检测猪胚胎全基因组转录活性的方法。包括如下步骤:将卵母细胞或各期胚胎放入有含有2mM EU的预热的完全培养基中孵育;卵母细胞或各期胚胎样品收集。将与EU共孵育过后的卵母细胞或各期胚胎进行固定、通透;“click”反应标记荧光染料。将与EU共孵育、固定、通透后的卵母细胞或各期胚胎放入Click-iT reaction cocktail中孵育30min,使其标记上荧光染料。将带有荧光染料卵母细胞或各期胚胎进行压片、封片。EU染色可以大大缩短的检测时间且操作简单、方便、快捷,是一种理想的快速检测猪胚胎全基因组转录活性的方法。

    一种收集囊胚腔液体的方法

    公开(公告)号:CN109402220A

    公开(公告)日:2019-03-01

    申请号:CN201811470251.0

    申请日:2018-11-28

    IPC分类号: C12Q1/24

    摘要: 本发明公开了一种收集囊胚腔液体的方法,包括如下步骤:显微操作针的准备,用拉针仪,断针仪和磨针仪制作内径为10μm的注射针以及针口为40μm的固定针,注射针要将针尖拔尖;囊胚腔液体的收集,在显微操作仪下,用固定针固定住内细胞团一侧,用注射针刺入囊胚腔中吸取囊胚腔中的液体至于1μLDPBS液滴中,收集完成后用较细的口吸针将囊胚腔中的液体转移到进口200μL的离心管中;囊胚腔液体中DNA含量的检测。这种收集方法采用自制的较细的注射针易刺破囊胚腔,对囊胚后续发育所产生的影响较小,且较为精准,可以收集单个囊胚腔中的液体,为胚胎植入前遗传学筛查提供新的方法。

    一种用于治疗猪链球菌病的中药微粉剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN103830366B

    公开(公告)日:2015-07-08

    申请号:CN201410079156.3

    申请日:2014-03-05

    摘要: 本发明公开了一种用于治疗猪链球菌病的中药微粉剂及其制备方法,该中药微粉剂药材配方的组分包括:柴胡4~7份、紫草5~10份、穿心莲4~8份、金银花3~6份、黄连3~7份、石榴皮4~7份以及甘草3~6份,该中药微粉剂通过超微粉碎技术制成超微散剂,使得药材所含成分容易被吸收,能有效抗菌、抗炎,解热镇痛,还能激发机体免疫力,迅速恢复机体功能,对猪链球菌病治愈率达90%以上,解决了肉制品中药物残留及病原菌耐药性问题;该中药微粉剂为口服制剂,可直接以拌料喂养方式给药,使用方便,另外,该中药微粉剂的制备方法简单,成本低廉,适于工业化批量生产。

    一种用于治疗猪链球菌病的中药微粉剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN103830366A

    公开(公告)日:2014-06-04

    申请号:CN201410079156.3

    申请日:2014-03-05

    摘要: 本发明公开了一种用于治疗猪链球菌病的中药微粉剂及其制备方法,该中药微粉剂药材配方的组分包括:柴胡4~7份、紫草5~10份、穿心莲4~8份、金银花3~6份、黄连3~7份、石榴皮4~7份以及甘草3~6份,该中药微粉剂通过超微粉碎技术制成超微散剂,使得药材所含成分容易被吸收,能有效抗菌、抗炎,解热镇痛,还能激发机体免疫力,迅速恢复机体功能,对猪链球菌病治愈率达90%以上,解决了肉制品中药物残留及病原菌耐药性问题;该中药微粉剂为口服制剂,可直接以拌料喂养方式给药,使用方便,另外,该中药微粉剂的制备方法简单,成本低廉,适于工业化批量生产。

    牛iPS细胞诱导分化形成卵母细胞的方法

    公开(公告)号:CN102660500A

    公开(公告)日:2012-09-12

    申请号:CN201210167044.4

    申请日:2012-05-28

    IPC分类号: C12N5/075 C12N5/071

    摘要: 本发明公开了一种牛iPS细胞诱导分化形成卵母细胞的方法。该方法包括猪卵泡液制作、牛iPS细胞培养、牛iPS细胞的卵母细胞定向分化三个步骤。本发明将牛iPS细胞在限定的诱导条件下分化成卵母细胞。由于牛iPS细胞的诱导仅需要种用牛少量的皮肤细胞,牛iPS细胞的应用能够有效避免分离牛ES细胞需要破坏大量优质胚胎的弊端。因此,该方法在牛的抗病育种、乳腺生物反应器生产、优秀遗传资源的保护和开发等方面都具有着广阔的应用前景和发展潜力。