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公开(公告)号：CN102382903A
公开(公告)日：2012-03-21
申请号：CN201110319087.5
申请日：2011-10-20
申请人： 中华人民共和国北仑出入境检验检疫局 , 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明公开了啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT-PCR检测试剂及检测方法，包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针，扩增目标片段长度为61bp，引物HLV-F序列：CGTGGAACGGCTCCTTCTT；引物HLV-R序列：AGAGTTGTATCCACCGGGTAGTTT；探针HLV-P序列：CACCAGCCGGAGTT，该探针的5'含有FAM报告荧光染料，扩增目标片段的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示；检测方法包括总RNA的提取和实时荧光PCR反应，该RT-PCR反应是引物扩增与探针检测同时进行，整个检测过程完全闭管，不需PCR后处理，消除了PCR产物的污染，减少了检测步骤，节省了时间，并且对啤酒花潜隐类病毒特异和敏感；因此本发明提供一种操作灵敏、快速、准确的检测啤酒花潜隐类病毒的检测试剂及方法。
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公开(公告)号：CN101591716A
公开(公告)日：2009-12-02
申请号：CN200910099586.0
申请日：2009-06-12
申请人： 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明公开了香蕉苞片花叶病毒实时荧光RT－PCR检测试剂及制备方法和应用，系选择香蕉苞片花叶病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列，经过精心设计并合成，包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针，扩增目标核苷酸序列的片段长度为74bp，引物序列为BBrMV TF：5′－caaaaactacgaacagggctagaga－3′，BBrMVTR：5′－ccgagtgtttgatccacgaa－3′，探针序列为5′－FAM－cacacacgcagatgaaagctgcagc－Eclipse－3′；本发明克服了常规RT－PCR费时、易污染以及扩增后需电泳检测等缺点，可对样品中的BBrMV进行快速准确的定性检测，具有简单、易操作、结果直观、敏感性高、重复性好等优点。
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公开(公告)号：CN102382890B
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201110356095.7
申请日：2011-11-11
申请人： 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明公开了油棕猝倒病菌荧光定量PCR检测试剂及检测试剂盒和应用，检测试剂含有序列如SEQIDNO：1和SEQIDNO：2所示的一对特异性引物和序列如SEQIDNO：3所示一条特异性荧光探针，扩增目标片段长度为94bp，扩增目标片段的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示；检测试剂盒由CTAB提取液、含引物和探针的PCR缓冲液、TaqDNA聚合酶、阳性对照液、阴性对照液和定量标准液等组份，检测方法包括总RNA的提取和荧光PCR反应，该油棕猝倒病菌荧光定量PCR检测试剂检测时，克服了常规PCR费时、易污染以及扩增后需电泳检测等缺点，可对样品中的油棕猝倒病菌进行快速准确的定性与定量检测，具有简单、易操作、结果直观、敏感性高、重复性好等优点。
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公开(公告)号：CN103088160A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310011970.7
申请日：2013-01-14
申请人： 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明公开了草莓潜隐环斑病毒的RT-LAMP检测方法，通过样品RNA提取，RT-LAMP扩增，就可以得到检测结果，整个检测反应不超过2.5h，又由于LAMP呈瀑布式扩增，因此其扩增效率非常高，灵敏度是RT-PCR检测的100倍，且无需复杂的检测仪器和检测过程，操作简单，可现场实时检测，因此本发明是一种检测速度快、操作简单、检测结果判断容易和灵敏度高的草莓潜隐环斑病毒的RT-LAMP检测方法。
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公开(公告)号：CN102230022B
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201110148678.0
申请日：2011-06-03
申请人： 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明公开了南芥菜花叶病毒RT-LAMP检测试剂及制备方法和应用，系选择南芥菜花叶病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列，经过精心设计并合成，包含三对特异性引物，目标片段长度为226bp，引物序列为：Ccccgttccattcactaacaactcttttattggtggtatggtcaaggg、Actggaatcaactgtttaaataccccgtttttagggggagcgaatttcaat，Taatacactcttgagttactatctagg、Taagcgcagtggagttcgat，Tgccataagtgcaagggct、Tgttacatcgaggaggatgg；本发明克服了常规RT-PCR费时、设备昂贵以及扩增后需电泳检测等缺点，可对样品中的ArMV进行快速准确的定性检测，具有成本低廉、简单易操作、结果直观、敏感性高和重复性好等优点。
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公开(公告)号：CN102230021B
公开(公告)日：2013-04-03
申请号：CN201110148284.5
申请日：2011-06-03
申请人： 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明公开了烟草环斑病毒RT-LAMP检测试剂及制备方法和应用，系选择烟草环斑病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列，经过精心设计并合成，包含三对特异性引物，目标片段长度为217bp，引物序列为：Acatggggcccgtcattgattttttccacaaatcaagtaacgatggc、Gagttaaataatccaactatgacgtggcttttcattgatagatattatgaggcgaaaga，Ccagcccacgttgtacttt、Ttgatgggtcaacttccat，Ggcagtgtattgttaccatgc、Attcaattgggtgatactttcgc；本发明克服了常规RT-PCR费时、设备昂贵以及扩增后需电泳检测等缺点，可对样品中的TRSV进行快速准确的定性检测，具有成本低廉、简单易操作、结果直观、敏感性高和重复性好等优点。
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公开(公告)号：CN101591716B
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN200910099586.0
申请日：2009-06-12
申请人： 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明公开了香蕉苞片花叶病毒实时荧光RT-PCR检测试剂及制备方法和应用，系选择香蕉苞片花叶病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列，经过精心设计并合成，包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针，扩增目标核苷酸序列的片段长度为74bp，引物序列为BBrMV TF：5′-caaaaactacgaacagggctagaga-3′，BBrMVTR：5′-ccgagtgtttgatccacgaa-3′，探针序列为5′-FAM-cacacacgcagatgaaagctgcagc-Eclipse-3′；本发明克服了常规RT-PCR费时、易污染以及扩增后需电泳检测等缺点，可对样品中的BBrMV进行快速准确的定性检测，具有简单、易操作、结果直观、敏感性高、重复性好等优点。
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公开(公告)号：CN101429563B
公开(公告)日：2011-05-11
申请号：CN200810122323.2
申请日：2008-11-10
申请人： 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明公开了花生矮化病毒荧光定量RT-PCR检测试剂及制备方法和应用，系选择花生矮化病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列，经过精心设计并合成，包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针，扩增目标片段长度为76bp，引物和探针序列为：引物：PSV TF：5′-cagatgccatccctcga-3′，PSV TR：5′-ccaacgaagtgtacgtgtacc-3′，探针：5′-FAM-catccaacctttgtttctag-MGB-3′；本发明克服了常规RT-PCR费时、易污染以及扩增后需电泳检测等缺点，可对样品中的PSV进行快速准确的定性与定量检测，具有简单、易操作、结果直观、敏感性高、重复性好等优点。
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公开(公告)号：CN101429563A
公开(公告)日：2009-05-13
申请号：CN200810122323.2
申请日：2008-11-10
申请人： 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明公开了花生矮化病毒荧光定量RT－PCR检测试剂及制备方法和应用，系选择花生矮化病毒特异且各株系之间比较保守的CP编码基因片段为靶目标序列，经过精心设计并合成，包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针，扩增目标片段长度为76bp，引物和探针序列为：引物：PSV TF：5′－cagatgccatccctcga－3′，PSV TR：5′－ccaacgaagtgtacgtgtacc－3′，探针：5′－FAM－catccaacctttgtttctag－MGB－3′；本发明克服了常规RT－PCR费时、易污染以及扩增后需电泳检测等缺点，可对样品中的PSV进行快速准确的定性与定量检测，具有简单、易操作、结果直观、敏感性高、重复性好等优点。
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公开(公告)号：CN102382903B
公开(公告)日：2013-08-28
申请号：CN201110319087.5
申请日：2011-10-20
申请人： 中华人民共和国北仑出入境检验检疫局 , 宁波检验检疫科学技术研究院
摘要： 本发明公开了啤酒花潜隐类病毒的实时荧光RT-PCR检测试剂及检测方法，包含一对特异性引物和一条特异性荧光探针，扩增目标片段长度为61bp，引物HLV-F序列：CGTGGAACGGCTCCTTCTT；引物HLV-R序列：AGAGTTGTATCCACCGGGTAGTTT；探针HLV-P序列：CACCAGCCGGAGTT，该探针的5'含有FAM报告荧光染料，扩增目标片段的核苷酸序列如SEQIDNO：4所示；检测方法包括总RNA的提取和实时荧光PCR反应，该RT-PCR反应是引物扩增与探针检测同时进行，整个检测过程完全闭管，不需PCR后处理，消除了PCR产物的污染，减少了检测步骤，节省了时间，并且对啤酒花潜隐类病毒特异和敏感；因此本发明一种提供操作灵敏、快速、准确的检测啤酒花潜隐类病毒的检测试剂及方法。
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