靶向GPMVNP、M基因shRNA的重组慢病毒的制备

    公开(公告)号:CN102618581A

    公开(公告)日:2012-08-01

    申请号:CN201210069488.4

    申请日:2012-03-16

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 本发明是一种利用慢病毒载体介导RNAi的方法,具体是:先对鹅源副粘病毒NA-1株NP、M基因的核酸序列进行同源性分析,找出保守区域,设计出针对保守区的siRNA;将siRNA克隆到慢病毒表达质粒pLKD-EGFP后,再与pCMV-dR8.2和pCMV-VSV-G共同转染293T细胞中,收集转染后细胞上清,经超速离心、纯化、浓缩后形成了表达siRNA的高滴度的慢病毒载体,然后将其转导入靶细胞,使其在细胞内稳定表达,发挥抗病毒效应。本发明因其高效的转导率及严格的控制体系可以真实的评价siRNA在体内的抗病毒作用,可为禽类动物分子抗病育种奠定分子生物学基础;同时为新城疫等动物源性病毒病的防治提供新的途径。

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