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公开(公告)号：CN106282178B
公开(公告)日：2019-06-04
申请号：CN201610802394.1
申请日：2016-09-05
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种引物对。本发明公开一种嗜酸乳杆菌ATCC 4356 S层蛋白基因。本发明还公开一种重组菌株。本发明还公开一种重组蛋白。本发明还公开重组质粒pGEXS的构建方法。本发明还公开上述重组蛋白的提取纯化方法。本发明还公开重组质粒pGEXS、重组菌株，重组蛋白在拮抗H9N2禽流感病毒侵袭树突状细胞中的应用。本发明还公开一种试剂盒。本发明构建的表达嗜酸乳杆菌ATCC 4356 S层蛋白的载体pGEXS中含有GST标签，从大肠杆菌中提取的S层蛋白与GST标签相连，可通过GST的柱子得到高度纯化的S层蛋白；与嗜酸乳杆菌ATCC 4356相比，重组大肠杆菌的S层蛋白表达产量更高，纯度达到95%。
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公开(公告)号：CN103127501A
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201310100878.8
申请日：2013-03-27
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K39/39 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明涉及一种用于禽流感灭活病毒的人工合成鼻腔免疫佐剂，属于生物技术领域，专用于禽流感灭活病毒鼻腔免疫的应用。CpG-ODN的功能与其序列和结构特点有密切关系，本发明根据此关系设计出几条CpG-ODN序列，通过体内体外试验筛选出免疫佐剂效果最佳的一条CpG-ODN序列。其使用配方为：每只鸡10～100μg的CpG-ODN F3。CpG-ODN F3的序列为5’-TCGTCGTTGTCGTTTTGTCGTTGGGGGG-3’。本发明配合禽流感灭活病毒通过鼻腔免疫能够有效提高局部黏膜免疫和全身体液免疫水平，避免肌肉注射免疫程序，减少鸡群应激反应，为提高鸡肉品质提供了保证。同时本发明降低了CpG-ODN的成本，增加了其在禽类疫苗中广泛应用的可行性。
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公开(公告)号：CN101985635A
公开(公告)日：2011-03-16
申请号：CN201010544629.4
申请日：2010-11-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了高效表达山羊生长激素GH的乳腺特异性表达载体，属于生物工程技术领域。GH的cDNA序列见SEQ ID NO.1。生长激素既可以促进乳腺导管形成，也可以促进山羊的乳腺上皮细胞的增殖，从而增加产奶量。将本发明构建的乳腺特异性表达载体pcGH采用脂质体法，导入体外培养的人乳腺癌细胞Bcap-37中，在转染后收集细胞培养上清；采用ELISA的方法检测细胞培养上清中的GH含量。结果显示与未转染pcGH的空白组细胞相比，转染pcGH组细胞GH表达量显著提高。表明pcGH载体可已在乳腺细胞上成功表达GH，为下一步生产转gh基因奶山羊奠定坚实的基础。
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公开(公告)号：CN1793336A
公开(公告)日：2006-06-28
申请号：CN200510126291.X
申请日：2005-12-02
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及表达绿色荧光蛋白(green fluorescentprotein，GFP)的乳酸杆菌基因工程体，包括将gfp基因插入质粒pLEM415，构建成gfp表达质粒，电转化从鸡小肠分离到的乳酸杆菌，即成本发明的基因工程体－lactobacillus－pLEM415－gfp。在转化子中有绿色荧光蛋白的表达，且在30℃下荧光强度最大。本发明所提供的基因工程体可用于大量扩增培养，用于研究乳酸杆菌在体内的运动情况及与肠道的相互作用机理，提取该乳酸杆菌的质粒后，可插入各种抗原、活性肽和药物等，广泛的用于科研，生产等各种领域。乳酸杆菌很有望成为口服基因工程苗的表达载体。
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公开(公告)号：CN112795508A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110021092.1
申请日：2021-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种屎肠球菌YQH2，本发明还公开了一种益生菌制剂，所述益生菌制剂包括所述的屎肠球菌YQH2。本发明还公开了所述的屎肠球菌YQH2或所述的益生菌制剂在禽类动物养殖中的应用。本发明还公开了所述的屎肠球菌YQH2或所述的益生菌制剂在制备修复肠道损伤或增强肠道免疫中的应用。本发明内容还公开了所述的屎肠球菌YQH2或所述的益生菌制剂在制备抑制鼠伤寒沙门氏菌感染药物中的应用。本发明的屎肠球菌YQH2能够抑制病原菌生长。屎肠球菌YQH2可改善沙门氏菌感染变浅的隐窝深度和炎症因子水平的增加，刺激肠黏膜上皮细胞的增殖，具有维护肠黏膜屏障的潜能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101985630B
公开(公告)日：2013-05-01
申请号：CN201010544665.0
申请日：2010-11-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及表达高致病性禽流感病毒H5亚型血凝素蛋白的重组嗜酸乳杆菌，属于生物技术基因工程领域。本发明成功构建了高致病性禽流感病毒H5亚型血凝素重组乳酸杆菌表达质粒pLEM415-PHA1，并成功电击转化入嗜酸乳杆菌4356。高致病性禽流感病毒H5亚型血凝素蛋白在重组嗜酸乳杆菌4356内可以被成功表达，经Western-blot验证具有良好的抗原性。重组嗜酸乳杆菌4356有望开发成预防高致病性禽流感的基因工程口服疫苗。
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公开(公告)号：CN102000332B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010544683.9
申请日：2010-11-16
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K39/39 , A61K39/145 , A61P31/16
Abstract: 本发明涉及口服灭活疫苗的一种黏膜免疫的复合佐剂，属于生物技术领域，专用于口服灭活疫苗的应用。其配方为：20～50μg CpG DNA、2～5mg黄芪多糖和70～100mg葡萄糖。本发明(复合黏膜免疫佐剂)能够有效提高黏膜局部免疫和全身体液免疫力。同时复合佐剂与禽流感灭活抗原配合，通过饮水免疫就可以激发动物机体产生有效的全身免疫应答水平，避免肌肉注射引起的鸭群应激反应，也为提高鸭肉品质提供了保证。
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公开(公告)号：CN101985635B
公开(公告)日：2012-06-13
申请号：CN201010544629.4
申请日：2010-11-16
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了高效表达山羊生长激素GH的乳腺特异性表达载体，属于生物工程技术领域。GH的cDNA序列见SEQ ID NO.1。生长激素既可以促进乳腺导管形成，也可以促进山羊的乳腺上皮细胞的增殖，从而增加产奶量。将本发明构建的乳腺特异性表达载体pcGH采用脂质体法，导入体外培养的人乳腺癌细胞Bcap-37中，在转染后收集细胞培养上清；采用ELISA的方法检测细胞培养上清中的GH含量。结果显示与未转染pcGH的空白组细胞相比，转染pcGH组细胞GH表达量显著提高。表明pcGH载体可已在乳腺细胞上成功表达GH，为下一步生产转gh基因奶山羊奠定坚实的基础。
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公开(公告)号：CN110540950B
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN201910799294.1
申请日：2019-08-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一株罗伊氏乳杆菌22及其应用。本发明的罗伊氏乳杆菌22，是从健康鸡群中分离得到，分类命名为罗伊氏乳杆菌（Lactobacillus reuteri），其保藏编号为CGMCC No.17932。通过检测益生菌性能，我们发现罗伊氏乳杆菌22具有良好的耐酸耐胆盐性能和粘附性能，并且能够抑制病原菌生长。通过动物试验，我们发现在健康生理状态下，罗伊氏乳杆菌22不影响炎症因子的水平，但可以增加杯状细胞的数目以及促进紧密蛋白、防御素和溶菌酶等相关基因表达水平的增加，并且可增加肠绒毛的长度和隐窝的深度，具有维护肠黏膜屏障的潜能。因此，该菌株有望开发为维护鸡肠黏膜屏障和保障鸡绿色健康养殖的益生菌。
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公开(公告)号：CN112795508B
公开(公告)日：2022-03-29
申请号：CN202110021092.1
申请日：2021-01-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种屎肠球菌YQH2，本发明还公开了一种益生菌制剂，所述益生菌制剂包括所述的屎肠球菌YQH2。本发明还公开了所述的屎肠球菌YQH2或所述的益生菌制剂在禽类动物养殖中的应用。本发明还公开了所述的屎肠球菌YQH2或所述的益生菌制剂在制备修复肠道损伤或增强肠道免疫中的应用。本发明内容还公开了所述的屎肠球菌YQH2或所述的益生菌制剂在制备抑制鼠伤寒沙门氏菌感染药物中的应用。本发明的屎肠球菌YQH2能够抑制病原菌生长。屎肠球菌YQH2可改善沙门氏菌感染变浅的隐窝深度和炎症因子水平的增加，刺激肠黏膜上皮细胞的增殖，具有维护肠黏膜屏障的潜能。
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