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公开(公告)号:CN108310374A
公开(公告)日:2018-07-24
申请号:CN201711486711.4
申请日:2017-12-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61K39/39 , A61P31/16 , C12N7/00 , C07K14/11
Abstract: 本发明公开了一种禽流感病毒灭活疫苗的制备方法,包括如下步骤:禽流感病毒细胞置于30-40摄氏度的密封容器内,并向其中通入60-80%含量的氧气,观察新生细胞的病变程度,提取新生细胞的病变样本,将储存的新生细胞再次置于密封的容器内,并向其中置于反应酶,形成禽流感病毒蛋白,再次向其中添加复合佐剂,采集样本,将检测无菌样本进行超声破碎,再次离心后,收集上清液,即得到禽流感病毒灭活疫苗本发明能够对病毒储放的温度实时监控,并严格控制其的存放温度,自动化控制程度高,能够增加疫苗的形成速率,该疫苗能够有效预防禽流感,适合大范围推广。
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公开(公告)号:CN107663523A
公开(公告)日:2018-02-06
申请号:CN201710940335.5
申请日:2017-09-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种优化的鸡α干扰素基因真核表达重组质粒及其制备方法与应用。具体是将优化的鸡α干扰素基因与真核表达载体连接构建得到所述重组质粒;所述优化的鸡α干扰素基因序列(序列如SEQ ID NO.4所示)。本发明构建得到的优化的鸡α干扰素基因真核表达重组质粒可以在细胞内成功表达鸡α干扰素蛋白,可以增强禽类体内细胞和体液免疫反应;作为免疫增强剂使用,安全性和稳定性更高,且运输方便、使用简便、成本低,毒副反应更低,具有很好的推广应用前景。
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公开(公告)号:CN106939042A
公开(公告)日:2017-07-11
申请号:CN201710045372.X
申请日:2017-01-19
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明提供一种猪α干扰素及其应用,依据大肠杆菌原核表达系统密码子的偏嗜性,选择高表达密码子设计合成一种猪α干扰素,其氨基酸序列序列如SEQ ID NO.1所示,编码其的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明制备猪α干扰素的方法简单,成本低,易于工业化生产,猪α干扰素表达量高,包涵体处理过程中变性彻底,复性蛋白得率高,本发明制得的猪α干扰素效价高,能够抑制100TCID50的水泡性口炎病毒,比活性高达108,具有较好的生物学活性功能,可用于制备预防和治疗猪的病毒感染类疾病和增强免疫功能的药物,具备广阔的市场应用前景。
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公开(公告)号:CN106399322A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610743783.1
申请日:2016-08-27
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种鸡β干扰素优化基因及重组鸡β干扰素的生产工艺,包括以下步骤:S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对NCBI中已发表的鸡β干扰素基因进行密码子优化,人工合成优化后鸡β干扰素基因;S2、设计引物:根据密码子优化后的干扰素基因,设计1对引物;S3、重组表达质粒的构建;S4、重组表达质粒的转化和鉴定;S5、重组表达质粒在大肠杆菌中的诱导表达;S6、表达产物的提取与蛋白复性纯化:S61、包涵体的提取与处理;S62、包涵体变性;S63、变性液复性;S64、镍柱亲和纯化。本发明通过原核表达的方式表达并纯化出了重组鸡β干扰素蛋白,并通过细胞病变抑制法测出了该干扰素的具有抑制水泡口炎病毒繁殖的活性,活性单位达到2.73×106UI/mg。
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公开(公告)号:CN106939042B
公开(公告)日:2020-12-15
申请号:CN201710045372.X
申请日:2017-01-19
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明提供一种猪α干扰素及其应用,依据大肠杆菌原核表达系统密码子的偏嗜性,选择高表达密码子设计合成一种猪α干扰素,其氨基酸序列序列如SEQ ID NO.1所示,编码其的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明制备猪α干扰素的方法简单,成本低,易于工业化生产,猪α干扰素表达量高,包涵体处理过程中变性彻底,复性蛋白得率高,本发明制得的猪α干扰素效价高,能够抑制100TCID50的水泡性口炎病毒,比活性高达108,具有较好的生物学活性功能,可用于制备预防和治疗猪的病毒感染类疾病和增强免疫功能的药物,具备广阔的市场应用前景。
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公开(公告)号:CN106399321A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610743781.2
申请日:2016-08-27
Applicant: 华南农业大学 , 北京利昂盛生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种制备融合表达重组鸡α干扰素的生产工艺,其包括以下步骤:S1、根据大肠杆菌密码子的偏好性对Genebank中发表的鸡α干扰素基因序列进行密码子优化,人工合成该鸡α干扰素基因;S2、根据密码子优化后的鸡α干扰素基因,设计三条特异性的引物;S3、构建含ProS2促溶标签的重组鸡α干扰素质粒;S4、重组表达质粒的转化和鉴定;S5、重组鸡α干扰素的诱导表达;S6、表达产物的提取与蛋白复性纯化:S61、包涵体的提取与处理;S62、包涵体变性;S63、变性液复性;S64、镍柱亲和纯化。本发明通过细胞病变抑制法测出了该干扰素具有抑制水泡口炎病毒繁殖的活性,活性单位达到7.32×107UI/mg。
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公开(公告)号:CN101838708B
公开(公告)日:2012-07-18
申请号:CN201010140176.9
申请日:2010-03-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种检测犬流感的方法,采用PCR检测方法,其PCR反应体系中包含以下物质:序列分别为SEQ ID NO:1、SEQID NO:2的引物、dNTPs、Ex Taq、10×Ex Taq buffer、cDNA模板。在PCR反应结束后,通过电泳及紫外分析,检测有无目的条带,从而判断犬只是否患病。本发明所提供的检测方法敏感性高、特异性强、操作简便、快速,并且对起始材料质量要求低,便于临床上的应用。
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公开(公告)号:CN113308477A
公开(公告)日:2021-08-27
申请号:CN202110379859.8
申请日:2021-04-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种优化的鸭IL‑2基因真核表达重组质粒及其制备方法。本发明首先根据鸭密码子偏嗜性将鸭IL‑2基因进行优化,所得优化的鸭IL‑2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示,再将优化的鸭IL‑2基因连接到真核表达载体pCAGGK,得到了鸭IL‑2基因真核表达重组质粒。本发明获得的真核表达重组质粒在细胞内能成功表达鸭IL‑2蛋白,真核表达重组质粒可作为免疫增强剂和免疫佐剂使用,增强鸭类体内细胞和体液免疫反应,具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN106520779A
公开(公告)日:2017-03-22
申请号:CN201610984478.1
申请日:2016-11-09
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C07K14/55 , C12N15/85 , C12N2800/106 , C12N2800/22
Abstract: 本发明提供了一种通过密码子优化鸡IL-2基因提高鸡的IL-2蛋白表达效率的方法,将鸡的IL-2基因根据鸡的密码子的偏嗜性进行优化,得到的优化后的基因optiCKIL-2;将优化基因optiCKIL-2连接至真核表达载体pCAGGS构建重组质粒pCAGGoptiCKIL-2。所述通过密码子优化鸡IL-2基因提高鸡的IL-2蛋白表达效率的方法,根据鸡的密码子偏嗜性进行优化后,提高鸡IL-2的蛋白表达效率,为鸡IL-2构建DNA疫苗或作为佐剂奠定基础。
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公开(公告)号:CN106039303A
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201610457461.0
申请日:2016-06-20
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61P31/16
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/53 , C12N2760/16134
Abstract: 本发明涉及DNA疫苗技术领域,具体地,涉及一种H5亚型禽流感DNA疫苗及其制备方法,所述H5亚型禽流感DNA疫苗由H5亚型禽流感病毒HA基因和真核表达载体组成。所述的H5亚型禽流感DNA疫苗能够预防H5亚型禽流感,减少感染,对养殖业与人类健康具有十分重要的意义。
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