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公开(公告)号：CN105861336A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610486284.9
申请日：2016-06-28
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及一株具有杀线虫活性的草酸青霉菌NBC012、其制备方法及应用。本发明从挪威东福尔郡小麦孢囊线虫群体上分离筛选出一株活性较高的真菌菌株P.oxalicum NBC012，保藏编号CGMCC No.12474。通过液体发酵培养制备，其发酵液对植物寄生线虫有明显的毒杀作用。室内测定本菌株发酵液对大豆孢囊线虫2龄幼虫和卵孵化的影响。不同稀释浓度发酵液对2龄幼虫均具有毒杀作用，对卵孵化具有显著抑制作用。发酵原液能使大豆孢囊数量下降57.45％，具有良好的开发应用前景。
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公开(公告)号：CN116803257A
公开(公告)日：2023-09-26
申请号：CN202310998375.0
申请日：2023-08-09
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: A01K67/033 , A61K49/00
Abstract: 本发明公开了一种植物组织内植物寄生线虫的快速富集分离方法，属于生物技术领域，该方法用纤维素酶和果胶酶裂解植物组织，裂解后的植物组织研磨，并进行梯度冲洗过滤，获得不同龄期的植物寄生线虫。本发明经反复筛选和实验验证发现，采用特定的纤维素酶和果胶酶能够高效、充分裂解植物的细胞壁，利用橡皮塞轻轻磨破植物组织，从而使得寄生在植物根系内的线虫释放出来；将裂解的植物组织通过不同孔径大小的筛网，获得不同龄期的植物线虫，再通过蔗糖溶液离心，即可分离富集出不同龄期植物线虫；本发明操作简单，安全且成本低，可以迅速地从植物组织内获得大量的植物线虫，为获取不同龄期植物线虫及其研究提供了一种有效方法。
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公开(公告)号：CN113862156B
公开(公告)日：2023-05-23
申请号：CN202111139748.6
申请日：2021-09-27
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及生物防治领域，具体涉及一株尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)K2018‑1418及其应用。本发明提供的尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)，其保藏号为CGMCC No.22445。该菌株对南方根结线虫有明显的抑制作用，同时能够抑制致病性尖孢镰刀菌，且不影响寄主黄瓜的正常生长，具有良好的生防效果。
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公开(公告)号：CN114507743B
公开(公告)日：2022-11-25
申请号：CN202210106161.3
申请日：2022-01-28
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速检测菲利普孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用，属于植物寄生线虫的检测领域。所述RPA引物如SEQIDNO:1‑2所示和探针如SEQID NO:3所示。本发明利用RPA引物和探针建立了RPA检测菲利普孢囊线虫的方法，该方法灵敏度高，特异性非常强，检测阈值为10‑3个二龄幼虫DNA，10‑4个单孢囊DNA和0.01ng基因组DNA，灵敏度是普通PCR检测的100倍；与常见的密切相关的植物寄生线虫之间没有交叉反应。RPA整个检测过程可以在1小时内完成。该检测方法特异性强、灵敏度高、结果可视化、快速、准确，在菲利普孢囊线虫病的早期诊断和田间检测预警等方面具有很高的应用价值。
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公开(公告)号：CN114507743A
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN202210106161.3
申请日：2022-01-28
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速检测菲利普孢囊线虫的RPA引物和探针、试剂盒及应用，属于植物寄生线虫的检测领域。所述RPA引物如SEQIDNO:1‑2所示和探针如SEQID NO:3所示。本发明利用RPA引物和探针建立了RPA检测菲利普孢囊线虫的方法，该方法灵敏度高，特异性非常强，检测阈值为10‑3个二龄幼虫DNA，10‑4个单孢囊DNA和0.01ng基因组DNA，灵敏度是普通PCR检测的100倍；与常见的密切相关的植物寄生线虫之间没有交叉反应。RPA整个检测过程可以在1小时内完成。该检测方法特异性强、灵敏度高、结果可视化、快速、准确，在菲利普孢囊线虫病的早期诊断和田间检测预警等方面具有很高的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107287316A
公开(公告)日：2017-10-24
申请号：CN201710554037.2
申请日：2017-07-09
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
CPC classification number: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12Q2600/156 , C12Q2531/113 , C12Q2565/125
Abstract: 本发明为“甜菜孢囊线虫的特异性SCAR标记以及快速SCAR-PCR分子检测方法”，属植物线虫分子检测技术领域。甜菜孢囊线虫的特异性SCAR标记，具有如SEQ NO1所示的核苷酸序列。甜菜孢囊线虫快速SCAR-PCR分子检测方法是基于甜菜孢囊线虫RAPD特异性区设计的一组甜菜孢囊线虫特异性引物HsSF和HsSR，能够特异性的从甜菜孢囊线虫中PCR扩增出长度为922bp的片段，该特异性引物和检测方法的检测阈值为1/256头二龄幼虫和10-3白孢囊，由此本发明的引物HsSF和HsSR及其检测方法特异性强、灵敏度高、快速、准确。在甜菜孢囊线虫病的早期诊断和田间检测预警等方面具有很高的应用价值。
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公开(公告)号：CN107254414A
公开(公告)日：2017-10-17
申请号：CN201710570962.4
申请日：2017-07-13
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
Abstract: 本发明涉及一种防治水稻根结线虫的生防菌株AW2017及其应用。生防菌株AW2017为百岁兰曲霉(Aspergillus welwitschiae)，菌种保藏号为CGMCC No.14132。用所述的AW2017制备的生防菌剂，克服了化学药剂易污染环境、成本高、对人畜有毒等缺点，对水稻根结线虫防治效果较好，能促进水稻增产，具有良好的开发应用前景。
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公开(公告)号：CN103387977A
公开(公告)日：2013-11-13
申请号：CN201310345091.8
申请日：2013-08-09
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及一种快速高效的植物寄生线虫总RNA提取方法及其应用。植物线虫组织破碎方法，采用如下步骤：（1）制备玻璃粉末：将普通玻璃破碎后收集过60目筛子的粉末，用浓盐酸洗后再用去离子水洗至pH7.0，再高温去除RNA酶；（2）搅拌破碎：于无RNA酶离心管中加入玻璃粉末和TRIzol试剂以及线虫体，用微量电动组织匀浆器搅拌玻璃粉末，直至线虫组织破碎。本发明以自制的玻璃粉末结合TRIzol试剂实现对线虫的快速充分研磨，具有操作简便、无需特殊仪器设备和可靠性高等优点，应用该方法能够提取高质量的总RNA。该方法可在不同实验条件的实验室进行推广应用，在植物线虫分子生物学研究中具有极高的应用价值。
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公开(公告)号：CN114891083B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202210448128.9
申请日：2022-04-26
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/113 , A01N63/60 , A01P5/00
Abstract: 本发明公开了甜菜孢囊线虫Hs8H07蛋白、编码基因及其应用，涉及生物技术领域。所述蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明还提供一种编码该蛋白的基因。本发明提供的编码该蛋白的基因Hs8H07，在甜菜孢囊线虫食道腺表达；亚细胞定位实验结果表明Hs8H07蛋白定位于烟草叶片细胞的细胞核和细胞膜上。利用寄主介导的RNAi沉默处理沉默Hs8H07基因后，甜菜孢囊线虫的白雌虫量与对照野生型植株相比，显著降低。而在拟南芥中过表达Hs8H07基因，甜菜孢囊线虫的白雌虫量与对照野生型植株相比，显著增加。表明该基因在甜菜孢囊线虫寄生致病过程中具有重要作用，可作为植物抗线虫工程的靶标基因。
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公开(公告)号：CN114805526A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210469675.5
申请日：2022-04-28
Applicant: 中国农业科学院植物保护研究所
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N15/82 , C12N15/84 , A01H5/00 , A01H6/02
Abstract: 本发明公开了甜菜孢囊线虫的Hs24B03蛋白、编码基因及其应用。甜菜孢囊线虫的Hs24B03蛋白，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。编码基因的核苷酸序列如SEQIDNO：2所示。本发明利用寄主介导的RNAi沉默Hs24B03基因后，白雌虫的数量与对照野生型植株相比显著减少，而在拟南芥中过表达Hs24B03基因，甜菜孢囊线虫的白雌虫量与对照野生型植株相比，显著增加。本发明研究表明Hs24B03基因在甜菜孢囊线虫寄生致病过程中具有重要作用，可作为植物抗线虫工程的靶标基因。本发明对于孢囊线虫致病机理研究以及抗线虫植物制备具有重大价值。
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