一种从复杂样本中快速检测腐烂茎线虫的LAMP引物组和方法

    公开(公告)号:CN107988383B

    公开(公告)日:2020-12-11

    申请号:CN201711216972.4

    申请日:2017-11-28

    Abstract: 本发明公开了一种从复杂样本中快速检测腐烂茎线虫的LAMP引物组和方法。所述LAMP引物组包括一对外引物F3/B3、一对内引物FIP/BIP和一条环引物LF;序列依次如SEQ ID NO.1~5所示。本发明的LAMP引物组及其检测方法检测腐烂茎线虫的特异性、灵敏性非常好,不仅可以检测鉴定腐烂茎线虫不同虫态(卵、幼虫、雌虫和雄虫)的个体,还可以从多种线虫混合的样品、植物组织样品和土壤样品中直接检测出腐烂茎线虫,检测灵敏度可达到1/1000单条虫DNA。本发明为腐烂茎线虫的快速检测鉴定和早期诊断提供了一个新的检测方法,其具有准确、灵敏、稳定和结果判定直观的优点,该发明操作简便、实用性强,对于口岸和调运检疫以及产地监测工作具有重要的意义和应用价值。

    尖狭下盾螨在防治植物病原线虫中的应用

    公开(公告)号:CN111194654A

    公开(公告)日:2020-05-26

    申请号:CN202010042381.5

    申请日:2020-01-15

    Abstract: 本发明公开了尖狭下盾螨在防治植物病原线虫中的应用。本发明创造性的探索研究发现尖狭下盾螨对植物病原线虫具有捕食性,通过捕食植物病原线虫能够正常发育、繁殖、完成生活史,并且具有较强的增殖能力和较快的繁殖速率,是植物病原线虫的天敌捕食螨,可以作为植物病原线虫的生防天敌资源,在防治植物病原线虫中具有广泛的应用前景。

    一种从复杂样本中快速检测腐烂茎线虫的LAMP引物组和方法

    公开(公告)号:CN107988383A

    公开(公告)日:2018-05-04

    申请号:CN201711216972.4

    申请日:2017-11-28

    Abstract: 本发明公开了一种从复杂样本中快速检测腐烂茎线虫的LAMP引物组和方法。所述LAMP引物组包括一对外引物F3/B3、一对内引物FIP/BIP和一条环引物LF;序列依次如SEQ ID NO.1~5所示。本发明的LAMP引物组及其检测方法检测腐烂茎线虫的特异性、灵敏性非常好,不仅可以检测鉴定腐烂茎线虫不同虫态(卵、幼虫、雌虫和雄虫)的个体,还可以从多种线虫混合的样品、植物组织样品和土壤样品中直接检测出腐烂茎线虫,检测灵敏度可达到1/1000单条虫DNA。本发明为腐烂茎线虫的快速检测鉴定和早期诊断提供了一个新的检测方法,其具有准确、灵敏、稳定和结果判定直观的优点,该发明操作简便、实用性强,对于口岸和调运检疫以及产地监测工作具有重要的意义和应用价值。

    一种快速检测鉴定菊花叶枯线虫的LAMP引物组及其检测方法

    公开(公告)号:CN106520995A

    公开(公告)日:2017-03-22

    申请号:CN201611145505.2

    申请日:2016-12-13

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测鉴定菊花叶枯线虫的LAMP引物组及其检测方法。所述引物组包括一对外引物F3/B3,一对内引物FIP/BIP和一条环引物LF;其序列分别依次如SEQ ID NO.1~5所示。利用该LAMP引物组构建了菊花叶枯线虫的LAMP检测方法,扩增产物可以通过电泳法或荧光染料法进行检测,电泳检测出现阶梯状条带或加入荧光染料能观察到绿色荧光,则证明待检样品中含有菊花叶枯线虫。该检测方法可以检测鉴定菊花叶枯线虫不同虫态(雌虫、雄虫、幼虫或卵)的个体,可以从多种线虫混合的样品和植物组织样品中直接检测出菊花叶枯线虫,检测灵敏度达到1/100单条虫DNA,尤其适用于口岸和调运检疫以及产地监测。

    一种利用胡萝卜愈伤组织繁殖和培养保存针线虫的方法

    公开(公告)号:CN103004592A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201210531519.3

    申请日:2012-12-10

    Abstract: 本发明公开了一种利用胡萝卜愈伤组织繁殖和培养保存针线虫的方法,属于植物寄生线虫培养领域。该方法包括如下步骤:(1)无菌条件下将胡萝卜用酒精浸泡后灼烧,去表皮后切成薄片放入灭菌培养皿中,封口,放入培养箱培养至胡萝卜片长出愈伤组织;(2)将针线虫用硫酸链霉素溶液消毒后,离心收集,用无菌水洗涤,再离心收集,最后用无菌水制备针线虫悬浮液,将悬浮液滴在胡萝卜愈伤组织上;(3)将接种了针线虫的胡萝卜愈伤组织放入培养箱培养。本发明的方法不需要使用培养基培养,操作简便,使用硫酸链霉素溶液消毒不影响针线虫的活性,实现了简单、高效、大量繁殖针线虫的目的,同时还能长期保存针线虫并保持针线虫对植物的寄生性和致病性。

    一种利用胡萝卜愈伤组织培养水稻干尖线虫的方法

    公开(公告)号:CN102696554A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210147702.3

    申请日:2012-05-14

    Abstract: 本发明公开了一种利用胡萝卜愈伤组织培养水稻干尖线虫的方法,属于植物线虫培养保存技术领域。该方法的具体步骤为:新鲜胡萝卜洗净,用酒精浸泡后灼烧,至胡萝卜表皮变成暗红色,削去表皮,切成片放入装有水琼脂培养基的灭菌培养皿中,封口,放入培养箱中培养至长出胡萝卜愈伤组织;水稻干尖线虫用硫酸链霉素溶液消毒,然后离心,沉淀用无菌水混匀继续离心,最后沉淀用无菌水稀释分散滴在胡萝卜愈伤组织上;将接种了水稻干尖线虫的胡萝卜愈伤组织放入黑暗培养箱内,在25℃~30℃培养或20℃~25℃保存。本发明的培养方法即可实现简单、大量培养繁殖水稻干尖线虫的目的,又能保持水稻干尖线虫对植物的寄生和致病力。

    运用实时荧光PCR技术鉴定剪股颖粒线虫的方法

    公开(公告)号:CN101419169B

    公开(公告)日:2010-11-10

    申请号:CN200810025752.8

    申请日:2008-01-11

    Abstract: 本发明公开了一种运用实时荧光PCR技术鉴定剪股颖粒线虫(Anguina agrostis)的方法,利用剪股颖粒线虫特异性DNA序列,用生物信息学方法设计特异性引物和特异性探针,探针的5'端标记报告荧光基团,3'端标记淬灭荧光基团,应用荧光PCR法扩增剪股颖粒线虫靶基因,通过探针在反应过程中荧光信号的变化鉴定样品中是否含有剪股颖粒线虫。本发明不受虫龄和虫体数量的影响,较形态学和形态测量学鉴定方法更为快速、准确;操作简单,可标准化,解决了快速鉴定剪股颖粒线虫的标准方法的问题,大大节约了检测时间,加快了口岸草种的验放速度,促进了进出口贸易,节约了货物因长期在货场存放而产生的费用。

    一种香蕉穿孔线虫分支酸变位酶及其应用

    公开(公告)号:CN116286908A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310333064.2

    申请日:2023-03-31

    Abstract: 本发明公开了一种香蕉穿孔线虫分支酸变位酶及其应用。本发明提供了香蕉穿孔线虫分支酸变位酶基因RsCM在防治香蕉穿孔线虫中的应用,所述的香蕉穿孔线虫分支酸变位酶基因RsCM,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示。通过烟草瞬时表达表明,RsCM能显著抑制flg22诱导的防卫基因表达和胼胝质沉积,能显著抑制BAX诱导的细胞坏死,说明RsCM能抑制植物的防卫反应;通过in planta RNAi技术构建转基因番茄,接种线虫后发现香蕉穿孔线虫致病力下降。本发明为农业生产中的线虫防治提供一条新的策略,为抗线虫品种植物的培育提供了新靶标,为香蕉穿孔线虫的防治提供了新途径。

    一种模拟相似穿孔线虫与烟草互作模式的方法

    公开(公告)号:CN111670716B

    公开(公告)日:2022-04-19

    申请号:CN202010735913.3

    申请日:2020-07-28

    Abstract: 本发明提供了一种模拟相似穿孔线虫与烟草互作模式的方法,涉及生物学技术领域;通过在光照培养箱内,对沙培的本氏烟草(Nicotiana benthamiana)进行相似穿孔线虫的接种,利用染色观察法观察相似穿孔线虫在根系内侵染的位置,通过侵染根系产生的症状计算严重度,然后统计总线虫数与初始接种量的差异计算繁殖倍率和完成生活史情况。本发明选用本氏烟草作为寄主研究相似穿孔线虫对其的寄生性和致病性,并探究最优的线虫致病条件,为利用本氏烟草研究相似穿孔线虫与寄主互作机制提供研究基础。

    一种利用胡萝卜纯愈伤组织培养繁殖无菌香蕉穿孔线虫的方法

    公开(公告)号:CN106135143B

    公开(公告)日:2020-02-04

    申请号:CN201610684090.X

    申请日:2016-08-18

    Abstract: 本发明公开了一种利用胡萝卜纯愈伤组织培养繁殖无菌香蕉穿孔线虫的方法。该方法是在无菌条件下,将香蕉穿孔线虫依次用过氧化氢溶液消毒和氧氟沙星溶液浸泡处理后,接种于无菌胡萝卜纯愈伤组织上,封口黑暗培养;所述无菌胡萝卜纯愈伤组织是在无菌条件下,将培育的胡萝卜纯愈伤组织切成小颗粒块,浸泡于含有氯霉素和万古霉素的溶液中消毒,再点种于植物组织培养基上,黑暗培养所得。本方法可稳定、高效、快速地培养繁殖大量无菌香蕉穿孔线虫,能够提供符合要求的充足无菌虫源,而且处理条件温和可控,对线虫生物活性和繁殖力影响小,使用操作更加安全,该方法具有很好的推广应用前景。

Patent Agency Ranking