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公开(公告)号:CN112980841B
公开(公告)日:2022-12-02
申请号:CN202110132872.3
申请日:2021-01-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/877 , C12N15/89
Abstract: 本发明公开了猪RLIM基因的表达抑制剂在制备具有提高猪克隆重构胚胎发育性能作用的产品中的应用,及在制备具有提高猪克隆效率的产品中的应用。猪RLIM基因的表达抑制剂可以有效提高猪克隆重构胚胎的囊胚率和囊胚时期的胚胎质量,即可以有效提高猪克隆重构胚胎的发育性能,从而可以提高猪体细胞克隆的克隆效率。本发明所述的猪RLIM基因的表达抑制剂可以选自能抑制猪RLIM基因表达的siRNA,本发明还提供了3种能抑制猪RLIM基因表达的siRNA。
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公开(公告)号:CN111549070B
公开(公告)日:2022-05-13
申请号:CN202010338934.1
申请日:2020-04-26
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/85 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开一种对X染色体多拷贝基因进行基因编辑实现动物性别控制的方法,通过筛选并选择哺乳动物X染色体上的一个或多个多拷贝基因作为靶位点并设计合成对应的sgRNA,然后通过构建靶向X染色体多拷贝基因的CRISPR/Cas9表达系统对哺乳动物精子或受精卵中的X染色体进行切割,可以使整条X染色体失活,并可致死X精子,提高雄性哺乳动物的出生率,或致死XY型胚胎,提高雌性哺乳动物的出生率。本发明提供的方法,X染色体的切割效率高,脱靶率低,具有很好的性别控制效果。
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公开(公告)号:CN114085914A
公开(公告)日:2022-02-25
申请号:CN202111258130.1
申请日:2021-10-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种位于猪9号染色体上与健仔数和健仔率相关的SNP分子标记,所述SNP分子标记的位点对应于国际猪基因组11.1版本参考序列9号染色体上第33597148位C>T突变。本发明通过优选该SNP的优势等位基因,能够逐代增加优势等位基因频率,提高核心群母猪的健仔数和健仔率,加快母猪相关繁殖性状的改良进展从而有效提高种猪育种的经济效益。
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公开(公告)号:CN110564774B
公开(公告)日:2021-10-15
申请号:CN201910782035.8
申请日:2019-08-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用修饰的ssODN提高细胞基因组定点修饰效率的方法。该方法通过CRISPR/Cas9系统与经修饰后的ssODN共同作用于细胞来实现。具体地为,CRISPR/Cas9系统包含目的基因gRNA片段,可以定点识别目的基因,并使目的基因发生双链断裂,而在断裂处ssODN与目的基因碱基互补配对,高效的完成基因组定点修饰,而经修饰后的ssODN可以显著提高定点修饰的效率。
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公开(公告)号:CN111500641A
公开(公告)日:2020-08-07
申请号:CN202010402846.3
申请日:2020-05-13
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/90 , C12N15/877 , C12N15/85 , A01K67/027 , C07K14/48
Abstract: 本发明公开了一种转人神经生长因子基因猪的制备方法。该方法包括如下步骤:a、构建靶向pNGF基因外显子的CRISPR/Cas9系统表达载体;b、构建提供hNGF基因的同源重组载体;c、将CRISPR/Cas9系统表达载体与hNGF基因的同源重组载体共转染猪耳成纤维细胞;d、转染后的猪耳成纤维细胞经筛选后,获得阳性细胞系,并通过体细胞克隆获得转人神经生长因子的转基因猪。本发明通过定点基因重组的方式,将hNGF基因插入猪pNGF基因位点,从而获得的转人神经生长因子基因猪,可以表达人神经生长因子而不表达猪神经生长因子,避免了在猪唾液中收集人源NGF时,其中还混有猪源NGF的现状,也避免其在用作药物治疗时的免疫原性问题,更加安全和有效。
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公开(公告)号:CN111394393A
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN202010116317.7
申请日:2020-02-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了通过筛选出可以提高基因组定点整合效率的抑制剂,包括组蛋白去乙酰化酶抑制剂或JAK抑制剂中的至少一种。组蛋白去乙酰化酶抑制剂可以在基因组定点整合时,抑制组蛋白的去乙酰化,而促进组蛋白的乙酰化,进而有利于DNA与组蛋白八聚体的解离,核小体结构松弛,从而使各种转录因子和协同转录因子能与DNA结合位点特异性结合,激活基因的转录及定点整合效率。JAK抑制剂通过抑制细胞JAK自发性磷酸化,影响其与STAT蛋白结合,使STAT转录因子磷酸化不能有效转移至细胞核内,影响非DNA连接因子的结合,有利于NHEJ/HDR因子的结合,进而有效增加基因整合至基因组的概率,提高基因组定点整合效率。
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公开(公告)号:CN110846337A
公开(公告)日:2020-02-28
申请号:CN201911170226.5
申请日:2019-11-26
Applicant: 温氏食品集团股份有限公司 , 华南农业大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/873 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种多功能融合酶XABT基因及构建方法和应用,该多功能融合酶XABT基因,可以同时表达表达木聚糖酶、植酸酶、葡聚糖酶和纤维素酶,并具有高效的酶活,该多功能融合酶强化了葡聚糖酶活性,对含葡聚糖较高的大麦、燕麦、黑麦、小麦及其麸皮类日粮具有更强的消化能力。亦可以用于制备节粮环保转基因经济动物,消除饲料中主要抗营养因子,达到提高饲料消化率,减少污染排放的目的。
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公开(公告)号:CN110846272A
公开(公告)日:2020-02-28
申请号:CN201911231323.0
申请日:2019-12-05
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N5/075
Abstract: 本发明提供了一种卵母细胞培养液,该培养液中含有成熟的卵泡液。成熟的卵泡液相对于未成熟的卵泡液,成熟的卵泡液对卵母细胞体外成熟有积极作用的物质丰度更高,离成熟期越近的卵泡,它的卵泡液越能促进卵母细胞IVM,并改善其质量。使用体内成熟卵泡液作为卵母细胞体外成熟培养液的组分能有效提高卵母细胞的质量,并且能降低卵母细胞中的ROS含量。由此。不仅可以用来改善各种物种(如:牛、羊等)的卵母细胞体外成熟,提高制备优质的体外受精胚胎及克隆胚胎的生产率,还可供人类辅助生殖中卵母细胞体外培养成熟的运用提供参考,以改进现有的卵母细胞体外成熟的培养体系,从而促进生物医学的发展。
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公开(公告)号:CN110564774A
公开(公告)日:2019-12-13
申请号:CN201910782035.8
申请日:2019-08-23
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用修饰的ssODN提高细胞基因组定点修饰效率的方法。该方法通过CRISPR/Cas9系统与经修饰后的ssODN共同作用于细胞来实现。具体地为,CRISPR/Cas9系统包含目的基因gRNA片段,可以定点识别目的基因,并使目的基因发生双链断裂,而在断裂处ssODN与目的基因碱基互补配对,高效的完成基因组定点修饰,而经修饰后的ssODN可以显著提高定点修饰的效率。
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公开(公告)号:CN109628494A
公开(公告)日:2019-04-16
申请号:CN201910062079.3
申请日:2019-01-23
Applicant: 华南农业大学 , 温氏食品集团股份有限公司
IPC: C12N15/90 , C12N9/22 , A01K67/027
CPC classification number: C12N15/907 , A01K67/0276 , A01K2207/15 , A01K2217/07 , A01K2227/108 , A01K2267/02 , C12N9/22
Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR/Cas9基因编辑技术的冠状病毒抗性克隆猪及其制备方法,该克隆猪的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)获取特异性靶向pAPN基因第2外显子和第3外显子的gRNA序列,其核苷酸序列依次如SEQ ID No.1‑2所示;制备获得对应gRNA序列的CRISPR‑Cas9打靶载体PX330‑pAPN2和PX330‑pAPN3;(2)将获得的打靶载体PX330‑pAPN2或打靶载体PX330‑pAPN3转入猪胎儿成纤维细胞中,获得pAPN基因编辑细胞系;(3)对pAPN基因编辑细胞系进行体细胞核移植操作,并将重构胚胎移植入代孕受体,通过自然妊娠出生所述克隆猪。本发明可获得猪冠状病毒受体pAPN完全缺失表达的克隆猪,具有抵抗猪冠状病毒感染的能力。
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