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公开(公告)号：CN104450696B
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201410721269.9
申请日：2015-01-05
Abstract: 本发明的目的是提供一种双重组位点的双向启动植物表达载体系统，由一个双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL和两个分别带有特异重组位点的克隆载体p‑FRT、p‑loxp组成。本发明所提供的双重组位点双向表达植物表达载体pRGFL是经改造的含有特定DNA分子的植物表达载体，本发明所提供的两个分别带有特异重组位点的克隆载体是在出发载体的多克隆位点分别插入特定DNA分子的重组载体。本发明的克隆载体p‑FRT、克隆载体p‑loxp经过XcmI酶或EcorV酶消化后形成带有T末端或平末端的载体，可以直接与目的基因的PCR产物连接达到克隆的目的。克隆载体p‑FRT、克隆载体p‑loxp上的目的基因在对应的重组酶的介导下，可以分别通过特异位点重组将双重组位点双向表达植物表达载体上的荧光蛋白报告基因替换，达到将目的基因转移至植物表达载体的目的，过程中只需要重组酶介导，不需其它操作，简便易行。
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公开(公告)号：CN104498540A
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201410721268.4
申请日：2014-12-03
CPC classification number: C12P7/24 , C12N9/0008 , C12N9/93 , C12Y102/01044 , C12Y602/01012
Abstract: 本发明公开了一种重组菌株及其全细胞催化生产4-羟基肉桂醛的方法，其特征是利用重组菌株全细胞作为生物催化剂催化4-羟基肉桂酸制备4-羟基肉桂醛，包括以下步骤：（1）构建重组菌株E.coli M15/pQE31-4CL1-CCR；（2）制备重组菌株全细胞；（3）利用上述重组菌株全细胞催化生产4-羟基肉桂醛，得到的产品经高效液相色谱串联质谱法检测。本发明首次提出了用生物转化的方法合成4-羟基肉桂醛的途径，具有反应条件温和，酶活性高，节约成本，操作简便等优点，提供了一种新的合成4-羟基肉桂醛的方法，同时也为植物次生代谢产物的生产提供了一种新思路。
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公开(公告)号：CN101444187B
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN200810239943.4
申请日：2008-12-15
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种美国红枫的繁殖方法。该方法，包括下述步骤：1)将美国红枫当年生的带节茎段或茎尖接种于启动培养基上进行启动培养，得到生出腋芽或顶芽；2)将步骤1)得到的腋芽或顶芽置于增殖培养基上进行增殖培养得到不定芽；3)将步骤2)得到的不定芽置于生根培养基上进行生根诱导培养，得到美国红枫幼苗。本发明的方法其他无性繁殖方法相比，具有所需试验材料较易获得、环境条件可控误差小、生长快、周期短、另外离体组织培养还可以连续运转、周年试验生产等优点，更主要的是组织培养材料来源单一，无性系遗传特性一致，保证了美国红枫固有的优良特性。
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公开(公告)号：CN101531687B
公开(公告)日：2011-07-20
申请号：CN200910082656.1
申请日：2009-04-23
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种多羟基化合物的衍生化试剂。该试剂，由DMSO、1-甲基咪唑和乙酸酐组成。本发明的试剂可以在维持单糖天然构象的基础上对其进行乙酰化衍生反应，衍生化反应后可以得到单一的衍生化产物，更能够准确进行定性定量分析各种多羟基化合物，避免了多种衍生化产物对分析的干扰。
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公开(公告)号：CN1733924B
公开(公告)日：2010-05-05
申请号：CN200410070592.0
申请日：2004-08-10
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种调控植物木质素含量的方法。本发明所提供的调控植物木质素含量的方法，调控植物木质素含量的一种方法，是将含有毛白杨4-香豆酸辅酶A连接酶1启动子-4-香豆酸辅酶A连接酶1融合基因的表达载体转化植物，得到木质素含量升高的植物。本发明通过在植物细胞中引入毛白杨4CL1启动子-4CL1融合基因来生产木质素含量升高的转基因植物，特别是转基因树木，为培育木质素含量升高的植物以及改良树木材性提供了一条重要的途径。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100562578C
公开(公告)日：2009-11-25
申请号：CN200410070603.5
申请日：2004-07-22
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种调控植物木质素含量的方法。本发明所提供的调控植物木质素含量的方法，是将含有4CL1基因的表达载体转化植物，得到木质素含量升高的植物；将含有反义4CL1基因的表达载体转化植物，得到木质素含量降低的植物。本发明通过在植物细胞中用载体引入4CL1基因或反义4CL1基因，来生产木质素含量升高或降低的转基因植物特别是转基因树木，为培育木质素含量降低或升高的植物以及改良树木材性提供了一条重要的途径。
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公开(公告)号：CN101544976A
公开(公告)日：2009-09-30
申请号：CN200910083479.9
申请日：2009-05-06
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体。双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体是在出发载体的多克隆位点插入如下DNA分子的重组表达载体：自5’末端依次含有EcoRI酶识别序列、NoS终止子、SacI酶识别序列、kpnI酶识别序列、红色荧光蛋白基因、SmalI酶识别序列、BamHI酶识别序列、XbalI酶识别序列、双向启动子、XholI酶识别序列、SpeI酶识别序列、绿色荧光蛋白、HindIII酶识别序列、HpaI酶识别序列、SalI酶识别序列、NoS终止子和Clal酶识别序列；所述双向启动子的核苷酸序列为序列表中序列1自5’末端第5917－6834位。本发明的双向启动子双可视荧光蛋白报告基因植物表达载体具备通过直接酶切连接简单操作就可以用于融合功能基因的目的。
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公开(公告)号：CN101444187A
公开(公告)日：2009-06-03
申请号：CN200810239943.4
申请日：2008-12-15
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种美国红枫的繁殖方法。该方法包括下述步骤：1)将美国红枫当年生的带节茎段或茎尖接种于启动培养基上进行启动培养，得到生出腋芽或顶芽；2)将步骤1)得到的腋芽或顶芽置于增殖培养基上进行增殖培养得到不定芽；3)将步骤2)得到的不定芽置于生根培养基上进行生根诱导培养，得到美国红枫幼苗。本发明的方法其他无性繁殖方法相比，具有所需试验材料较易获得、环境条件可控误差小、生长快、周期短、另外离体组织培养还可以连续运转、周年试验生产等优点，更主要的是组织培养材料来源单一，无性系遗传特性一致，保证了美国红枫固有的优良特性。
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公开(公告)号：CN109115903A
公开(公告)日：2019-01-01
申请号：CN201810817102.0
申请日：2018-07-24
Applicant: 北京林业大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明提供一种使用毛细管电泳-质谱联用检测独脚金内酯类似物的方法，所述方法为将独脚金内酯类似物溶液在毛细管电泳-质谱联用仪中上样检测，其特征为：(1)采用5-15kV的电压在毛细管电泳-质谱联用仪中电泳，选用75μm内径的色谱柱，采用乙酸铵溶液作为缓冲液，添加乙酸铵的50％甲醇作为鞘流液；(2)使用Chemstation对色谱图进行分析，得到色谱峰；(3)使用Data Analysis对质谱图进行分析，得到质谱图，通过该图分析子离子信息。所述方法可以高效的检测独脚金内酯类似物，且色谱峰型良好，出峰速度快，所述方法具有样品用量小、操作便捷、检测时间短、价格低廉、样品无需衍生化等优点。
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公开(公告)号：CN108802160A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810694533.2
申请日：2018-06-29
Applicant: 北京林业大学
IPC: G01N27/447 , G01N27/62
Abstract: 本发明提供了一种使用毛细管电泳‑质谱联用(CE‑MS)法检测落叶松中二氢槲皮素的方法。所述方法包括步骤为：(1)制备纯品二氢槲皮素的标准溶液，在毛细管电泳仪中进样，在质谱仪中分析，获得质谱图；(2)绘制标准曲线和计算最低检测限；(3)采用步骤(1)的方法获得样品的质谱图，计算样品加样回收率；(4)根据样品色谱峰与特征子离子信息，对落叶松中二氢槲皮素进行鉴定；(5)根据标准曲线对落叶松中二氢槲皮素进行定量分析。本发明具有操作简单、节约时间、检测高效、重复性好等特点，所需样品用量少，检测结果准确可靠，是一种对落叶松中二氢槲皮素进行定性、定量分析的优良方法。
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