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公开(公告)号：CN111876439A
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN202010428784.3
申请日：2020-05-20
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导真空侵染木豆的高效遗传转化方法，属于分子生物学与植物转基因工程技术领域。本发明的实验步骤主要分为四个部分：外植体筛选；农杆菌侵染液制备；木豆全株真空渗透，转基因鉴定。本发明不仅可以获得由茎部诱导出的稳定转基因根系，且木豆的叶片部分经过瞬时转染可用于基因表达的快速鉴定。本发明首次发现木本植物幼苗可通过农杆菌真空渗透在茎部出转基因根。该方法不仅可以直接运用于木豆的遗传转化，同时为木本植物的遗传转化体系提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN111869556A
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN202010438892.9
申请日：2020-05-22
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种促进木豆种子快速萌发长成幼苗的培养方法，包括以下步骤1)选种并消毒；2)浸种：将消毒后的种子置于干净的盆中，加水没过种子并置于恒温培养箱中；3)种子萌发：取干净的盆底部覆盖一层纱布，将浸种后的木豆置于纱布上均匀铺盖一层，加水并保持湿润，置于恒温培养箱中；4)1～2d后，将萌发长出1～2cm的种子从培养箱取出；5)灭菌：准备好洗净并烘干的石英砂和1/5霍格兰营养液，分别灭菌后冷却备用；6)沙培：将木豆种子播种于石英砂中，喷施营养液使盆内石英砂湿润，置于温室中培养。本发明可以促进木豆种子的快速萌发，尽量早筛除长势不好的木豆，能更快的获得木豆幼苗，适合于农业生产和生命科学的研究。
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公开(公告)号：CN110015959A
公开(公告)日：2019-07-16
申请号：CN201910231500.9
申请日：2019-03-26
IPC: C07C69/732 , C07C67/48 , C07C67/58 , C07C67/56 , C07C67/52
Abstract: 本发明涉及天然产物的分离纯化领域，提供了一种从桑叶中高效分离纯化咖啡酰基奎宁酸异构体的方法。本发明将桑叶进行超声强化提取后，采用独创性的pH诱导液液萃取技术、大孔吸附树脂富集技术以及高速逆流色谱快速分离技术进行分离纯化，得到纯度达93％以上的三种咖啡酰基奎宁酸异构体。本发明通过pH诱导液液萃取使咖啡酰基奎宁酸快速进入有机相，减少萃取次数，从而节约时间，减少化学试剂的消耗，降低工业成本；并且本发明首次实现了使用高速逆流色谱快速分离技术从桑叶中分离咖啡酰基奎宁酸异构体，该方法步骤简单、溶剂消耗少、分离周期短、产物纯度高、收率高，适用于产业化生产和应用。
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公开(公告)号：CN109765321A
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201910231409.7
申请日：2019-03-26
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明属于化学分析及检测技术领域，尤其涉及一种测定银杏叶中活性成分含量的方法。本发明运用超高效液相色谱-串联四级杆质谱联用仪，采用电喷雾阴离子串联质谱多反应检测(MRM)模式，快速在线优化包括碎裂电压以及碰撞能在内的质谱参数，使之形成高强度的靶向离子对，通过此系列特征性的靶向离子对，从而达到对银杏叶药材中的银杏内酯、黄酮醇苷及双黄酮3类活性成分的快速定性和定量分析；本发明的检测方法操作简单，具有高灵敏度和精密度、重现性好、稳定性高、回收率好，可实现同时测定银杏叶中所含的银杏内酯、黄酮醇苷及双黄酮3类活性成分，弥补现有药材质量控制技术不够完善和科学的不足，能准确、全面地控制银杏叶药材的质量。
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公开(公告)号：CN113234754B
公开(公告)日：2023-03-07
申请号：CN202110452535.2
申请日：2021-04-26
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供了一种以金花葵种胚为外植体的高效遗传转化方法，涉及植物基因工程技术领域，本发明所述的方法首先构建带有目的基因的GV3101农杆菌，通过与金花葵种胚共培养进行转化，将转化完成的种胚进行脱菌处理后进行愈伤组织诱导、分化培养以及生根培养，最终高效获取含有目的基因的金花葵转基因幼苗。本发明侧重于构建金花葵稳定的遗传转化体系，效率高，时间短，操作技术简单，且转基因种子的获取为深入研究金花葵体内相关分子机制提供了重要的转基因素材。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114504607A
公开(公告)日：2022-05-17
申请号：CN202210192596.4
申请日：2022-03-01
Applicant: 北京林业大学
IPC: A61K36/48 , A61K9/19 , A61K47/40 , A61K8/9789 , A61K8/73 , A61K8/49 , A61K8/02 , A23L33/105 , A23L3/3562 , A23P10/30 , A61Q19/00
Abstract: 本发明提供了一种木豆叶多酚的提取方法和木豆叶多酚纳米颗粒及其应用，涉及植物提取技术领域。本发明以2‑羟丙基‑β‑环糊精水溶液来提取木豆叶多酚，绿色环保，能耗和成本低，且对木豆叶多酚的提取率高，提取效果与70％乙醇提取效果相当；此外，本发明提供的提取方法操作简单。本发明还提供了所述提取方法得到的木豆叶多酚纳米颗粒，所述木豆叶多酚纳米颗粒包括2‑羟丙基‑β‑环糊精和包埋在所述2‑羟丙基‑β‑环糊精内的木豆叶多酚；所述木豆叶多酚纳米颗粒具有很好的水溶性、抗氧化活性、抗菌活性和抗肿瘤细胞增殖活性，能够广泛应用在药物制剂、食品添加剂和化妆品添加剂中，具有很好的经济价值。
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公开(公告)号：CN111876439B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202010428784.3
申请日：2020-05-20
Applicant: 北京林业大学
IPC: C12N15/82
Abstract: 本发明涉及一种农杆菌介导真空侵染木豆的高效遗传转化方法，属于分子生物学与植物转基因工程技术领域。本发明的实验步骤主要分为四个部分：外植体筛选；农杆菌侵染液制备；木豆全株真空渗透，转基因鉴定。本发明不仅可以获得由茎部诱导出的稳定转基因根系，且木豆的叶片部分经过瞬时转染可用于基因表达的快速鉴定。本发明首次发现木本植物幼苗可通过农杆菌真空渗透在茎部出转基因根。该方法不仅可以直接运用于木豆的遗传转化，同时为木本植物的遗传转化体系提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN109765321B
公开(公告)日：2022-01-07
申请号：CN201910231409.7
申请日：2019-03-26
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明属于化学分析及检测技术领域，尤其涉及一种测定银杏叶中活性成分含量的方法。本发明运用超高效液相色谱‑串联四级杆质谱联用仪，采用电喷雾阴离子串联质谱多反应检测(MRM)模式，快速在线优化包括碎裂电压以及碰撞能在内的质谱参数，使之形成高强度的靶向离子对，通过此系列特征性的靶向离子对，从而达到对银杏叶药材中的银杏内酯、黄酮醇苷及双黄酮3类活性成分的快速定性和定量分析；本发明的检测方法操作简单，具有高灵敏度和精密度、重现性好、稳定性高、回收率好，可实现同时测定银杏叶中所含的银杏内酯、黄酮醇苷及双黄酮3类活性成分，弥补现有药材质量控制技术不够完善和科学的不足，能准确、全面地控制银杏叶药材的质量。
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公开(公告)号：CN112481258B
公开(公告)日：2021-08-24
申请号：CN202011457226.6
申请日：2020-12-10
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供了一种对外界环境中可利用磷酸盐浓度变化发生感应的分子元件及其突变分子元件和应用，属于分子生物学技术领域。一种对外界环境中可利用磷酸盐浓度变化发生感应的分子元件的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。所述分子元件在有机膦降解或构建有机膦降解的转基因微生物中的应用。本发明还提供了一种对外界环境中可利用磷酸盐浓度变化发生感应的突变分子元件，在所述分子元件的基础上将Pho box3结构域突变为TGCCGGCC，该突变分子元件在蓝细菌中表现出比野生型分子元件灵敏度更高的磷酸盐检测能力，与荧光报告基因相连导入微生物中，可用于环境中可利用磷浓度的精细检测。
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公开(公告)号：CN113122569A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202110454403.3
申请日：2021-04-26
Applicant: 北京林业大学
Abstract: 本发明提供了一种杜仲转基因植株再生体系的构建方法，属于植物转基因技术领域。本发明提供的杜仲转基因植株再生体系的构建方法，包括如下步骤：将含目标基因重组载体的发根农杆菌悬浮液注射到杜仲幼苗的茎部，待杜仲幼苗茎部伤口处的愈伤组织分化为再生毛状根，以再生毛状根为外植体消毒，组织培养，直至获得完整的杜仲转基因幼苗。本发明利用分子调控机制建立的杜仲Hariy root转基因植株再生体系，可将杜仲快速高效的培养成为转基因植株，实现了杜仲的高效转化，快速再生。而且本发明构建方法简单，解决了木本植物转基因困难，操作繁琐，转化率低的问题，培育出的组培苗苗龄相同，性状优良，生长状态保持一致且良好，分化率和生根率均较高。
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