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公开(公告)号:CN106350571B
公开(公告)日:2019-09-24
申请号:CN201610765198.1
申请日:2016-08-30
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种快速筛选治疗奶牛乳房炎的敏感性抗生素的方法,该方法包括采集奶样、增菌培养、药敏试验。本发明自行配制了两种奶牛乳房炎主要致病菌生长的培养基,通过细菌生长曲线试验证明,与奶牛乳房炎相关的10种主要致病菌在这两种培养基的生长速度无明显差异,然后在上述培养基上建立了快速筛选治疗奶牛乳房炎的敏感性抗生素的方法。该方法与常规方法相比,不仅时间上缩短至2‑3天,而且减少了细菌分离并逐个菌进行药敏试验的工作量和试验材料。更重要的是,该方法能够让所有致病菌同时在一起生长,即所筛选到的敏感抗生素能够对所有引起奶牛乳房炎的细菌起到抑制作用,为临床上提供更好的治疗效果。
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公开(公告)号:CN106350571A
公开(公告)日:2017-01-25
申请号:CN201610765198.1
申请日:2016-08-30
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C12Q1/04
Abstract: 本发明公开了一种快速筛选治疗奶牛乳房炎的敏感性抗生素的方法,该方法包括采集奶样、增菌培养、药敏试验。本发明自行配制了两种奶牛乳房炎主要致病菌生长的培养基,通过细菌生长曲线试验证明,与奶牛乳房炎相关的10种主要致病菌在这两种培养基的生长速度无明显差异,然后在上述培养基上建立了快速筛选治疗奶牛乳房炎的敏感性抗生素的方法。该方法与常规方法相比,不仅时间上缩短至2-3天,而且减少了细菌分离并逐个菌进行药敏试验的工作量和试验材料。更重要的是,该方法能够让所有致病菌同时在一起生长,即所筛选到的敏感抗生素能够对所有引起奶牛乳房炎的细菌起到抑制作用,为临床上提供更好的治疗效果。
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公开(公告)号:CN112979789B
公开(公告)日:2021-07-27
申请号:CN202110403118.9
申请日:2021-04-14
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C07K16/08 , C12N5/20 , G01N33/543 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的检测,具体涉及一种用于检测牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的阻断ELISA试剂盒及其应用。本发明提供一种抗牛传染性鼻气管炎病毒的具有中和活性的单克隆抗体,由保藏号为CGMCC No.21015的杂交瘤细胞所分泌。还提供一种用于检测牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的试剂盒,其包含所述单克隆抗体。本发明基于所述单克隆抗体以及本发明设计的截短的gD蛋白,建立了一种可检测牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的阻断ELISA方法,具有特异性强、灵敏度高、重复性好的优点。
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公开(公告)号:CN111848779A
公开(公告)日:2020-10-30
申请号:CN202010781505.1
申请日:2020-08-06
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明涉及一种抗鸡补体受体2(ChCR2)单克隆抗体及其应用,本发明以纯化后的ChCR2蛋白片段作为免疫原,免疫小鼠后提取免疫合格的的小鼠脾脏B淋巴细胞,通过细胞融合技术将淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,经过筛选和亚克隆技术,获得抗ChCR2单克隆抗体,本发明的抗ChCR2单克隆抗体可以用于检测ChCR2蛋白抗原的生物学检测试剂,并应用在研究鸡B细胞功能的相关检测产品中。
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公开(公告)号:CN109929014B
公开(公告)日:2021-06-11
申请号:CN201910119158.3
申请日:2019-02-18
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C07K14/03 , C12N15/38 , C12N7/01 , C12N15/869 , A61K39/255 , A61P31/22
Abstract: 本发明提供了一种抑制鸡先天性免疫反应鸡马立克氏病病毒蛋白及其应用,该蛋白表达升高可增强鸡马立克氏病病毒(尤其是疫苗株)在鸡胚成纤维细胞上的复制,从而提高疫苗的免疫效力,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白;或在SEQ ID NO.1中所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸且具有同等活性由a)衍生的蛋白。本发明还构建该蛋白基因缺失的重组马立克氏病病毒研究结果发现,缺失了该蛋白的MDV病毒增强了MDV诱导IFN‑I的产生,从而为设计抗马立克氏病病毒强毒感染的药物提供物质基础。该蛋白过表达ICP0蛋白的鸡胚成纤维细胞能够增强MDV的复制。
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公开(公告)号:CN108753999B
公开(公告)日:2021-06-11
申请号:CN201810576348.3
申请日:2018-06-06
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一种用于鸽副伤寒沙门氏菌检测的核酸、试剂盒及检测方法。本发明提供了检测鸽副伤寒沙门氏菌的引物对和用于检测沙门氏菌属的内参引物对,扩增片段大小分别为鸽副伤寒沙门氏菌为613bp和沙门氏菌属为463bp。本发明建立了一种快速准确的检测出鸽副伤寒沙门氏菌的PCR检测方法,该方法能够准确检测临床可疑菌株样品,区分其他常见致病性沙门氏菌血清型,且非沙门氏菌致病菌的扩增结果为阴性。本发明的检测方法特异性好、灵敏度高、检测时间短、操作简单和结果易于判定,对设备的要求低,仅需半天即可完成检测,对于疫情的诊断和控制具有十分重要的作用,从而最大程度地避免了经济损失及对公共健康造成的危害。
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公开(公告)号:CN111763256A
公开(公告)日:2020-10-13
申请号:CN202010781397.8
申请日:2020-08-06
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了鸡CR2基因的克隆、蛋白的表达和纯化及其多克隆抗体的制备。提供了ChCR2蛋白的氨基酸序列和基因序列,构建了含有不同标签的ChCR2原核表达载体,利用大肠杆菌原核表达系统表达ChCR2蛋白,并对蛋白进行纯化。纯化后的蛋白能够制备效价较高的多克隆抗体。ChCR2基因,在鸡免疫系统中的作用十分重大。CR2能将先天性补体介导的免疫应答与病原体和外来抗原联系起来,通过与共价附着于靶标的C3d结合而产生的适应性免疫应答,其导致的细胞信号传导现象,能极大程度降低B细胞活化的阈值。B细胞在免疫系统中的位置举足轻重,所以本发明发现的ChCR2无论是从基础研究还是临床运用上的意义都是十分重大的。
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公开(公告)号:CN109666656A
公开(公告)日:2019-04-23
申请号:CN201910062666.2
申请日:2019-01-23
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一种纯化重组鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的马立克氏病病毒CVI988株(CVI-VP2)的方法,该方法将感染重组病毒CVI-VP2种子毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)在96孔细胞板上进行有限稀释,一分为二进行6孔板和96孔细胞板培养后,采用固定液将6孔板中的VP2蛋白固定,以抗IBDV VP2单克隆抗体为一抗,辣根过氧化物酶HRP标记的羊抗鼠IgG进行结合反应,再进行AEC原位染色;进一步选取上述试验的6孔板90%以上空斑为IBDV VP2表达阳性孔(空斑被染成深褐色)对应的96孔板进行下一轮的纯化,直至筛选出高效表达IBDV VP2蛋白的细胞克隆。该方法操作简便、重复性好、肉眼或光镜下即可以读取实验结果。
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公开(公告)号:CN108753999A
公开(公告)日:2018-11-06
申请号:CN201810576348.3
申请日:2018-06-06
Applicant: 北京市农林科学院
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2600/166 , C12Q2537/143
Abstract: 本发明提供了一种用于鸽副伤寒沙门氏菌检测的核酸、试剂盒及检测方法。本发明提供了检测鸽副伤寒沙门氏菌的引物对和用于检测沙门氏菌属的内参引物对,扩增片段大小分别为鸽副伤寒沙门氏菌为613bp和沙门氏菌属为463bp。本发明建立了一种快速准确的检测出鸽副伤寒沙门氏菌的PCR检测方法,该方法能够准确检测临床可疑菌株样品,区分其他常见致病性沙门氏菌血清型,且非沙门氏菌致病菌的扩增结果为阴性。本发明的检测方法特异性好、灵敏度高、检测时间短、操作简单和结果易于判定,对设备的要求低,仅需半天即可完成检测,对于疫情的诊断和控制具有十分重要的作用,从而最大程度地避免了经济损失及对公共健康造成的危害。
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公开(公告)号:CN107312087B
公开(公告)日:2020-09-25
申请号:CN201710388492.X
申请日:2017-05-27
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/22
Abstract: 本发明提供了一种抗IBRV的单链抗体,由SEQ ID NO.1所示重链可变区、SEQ ID NO.2所示轻链可变区及连接二者的连接肽组成的蛋白质,其具有抗牛传染性鼻气管炎病毒囊膜gD蛋白抗体的特性。本发明还提供了所述单链抗体的制备方法。本发明的单链抗体能特异性地结合IBRV,也能在Western‑blot中特异性结合大肠杆菌表达产物中的IBRV gD蛋白;间接免疫荧光试验显示该单链抗体能够识别感染在牛肾细胞MDBK中的IBRV,将其应用在牛传染性鼻气管炎的检测与治疗制剂的研制中具有良好的应用价值。
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