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公开(公告)号：CN111763256A
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN202010781397.8
申请日：2020-08-06
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了鸡CR2基因的克隆、蛋白的表达和纯化及其多克隆抗体的制备。提供了ChCR2蛋白的氨基酸序列和基因序列，构建了含有不同标签的ChCR2原核表达载体，利用大肠杆菌原核表达系统表达ChCR2蛋白，并对蛋白进行纯化。纯化后的蛋白能够制备效价较高的多克隆抗体。ChCR2基因，在鸡免疫系统中的作用十分重大。CR2能将先天性补体介导的免疫应答与病原体和外来抗原联系起来，通过与共价附着于靶标的C3d结合而产生的适应性免疫应答，其导致的细胞信号传导现象，能极大程度降低B细胞活化的阈值。B细胞在免疫系统中的位置举足轻重，所以本发明发现的ChCR2无论是从基础研究还是临床运用上的意义都是十分重大的。
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公开(公告)号：CN109666656A
公开(公告)日：2019-04-23
申请号：CN201910062666.2
申请日：2019-01-23
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了一种纯化重组鸡传染性法氏囊病毒VP2基因的马立克氏病病毒CVI988株(CVI-VP2)的方法，该方法将感染重组病毒CVI-VP2种子毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)在96孔细胞板上进行有限稀释，一分为二进行6孔板和96孔细胞板培养后，采用固定液将6孔板中的VP2蛋白固定，以抗IBDV VP2单克隆抗体为一抗，辣根过氧化物酶HRP标记的羊抗鼠IgG进行结合反应，再进行AEC原位染色；进一步选取上述试验的6孔板90％以上空斑为IBDV VP2表达阳性孔(空斑被染成深褐色)对应的96孔板进行下一轮的纯化，直至筛选出高效表达IBDV VP2蛋白的细胞克隆。该方法操作简便、重复性好、肉眼或光镜下即可以读取实验结果。
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公开(公告)号：CN118047865A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202410444125.7
申请日：2024-04-15
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C07K16/18 , C12N5/20 , G01N33/68 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及牛早幼粒细胞白血病蛋白及牛早幼粒细胞白血病蛋白核体的检测，具体涉及一种牛早幼粒细胞白血病蛋白单克隆抗体及其应用。本发明提供一种抗牛PML单克隆抗体，其由保藏编号为CGMCC No.45711的杂交瘤细胞所分泌。该单克隆抗体对牛PML蛋白的亲和力较高且特异性强，可用于检测细胞中的牛PML及PML NBs，为揭示牛PML及PML NBs的生物学功能奠定了基础。
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公开(公告)号：CN117487009A
公开(公告)日：2024-02-02
申请号：CN202410003927.4
申请日：2024-01-03
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C07K16/18 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/68
Abstract: 本发明涉及鸡PML的检测，具体涉及一种抗鸡PML单克隆抗体及其应用。提供抗鸡PML单克隆抗体，其由保藏编号为CGMCC No.45710的杂交瘤细胞所分泌。还提供所述抗鸡PML单克隆抗体在检测鸡PML或鸡PML核体中的应用。本发明为研究鸡PML核体的生物学功能，尤其是抗MDV作用机制，提供了全新的技术支持，也为研究新型MDV防控技术提供新的方向。
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公开(公告)号：CN114966020B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210817798.3
申请日：2022-07-13
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及牛传染性鼻气管炎病毒的检测，具体涉及一种检测牛传染性鼻气管炎病毒的胶体金试纸条及其制备方法。提供的检测牛传染性鼻气管炎病毒的胶体金试纸条，包括底板以及依次搭接粘贴在底板上的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其特征在于，所述金标垫上包被有胶体金标记的抗牛传染性鼻气管炎病毒的单克隆抗体，所述单克隆抗体由保藏编号为CGMCC No. 23006的杂交瘤细胞分泌；所述硝酸纤维素膜上设有检测线，所述检测线上包被有抗牛传染性鼻气管炎病毒的多克隆抗体。所述试纸条针对IBRV病毒的检测具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、准确性高的优点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113461808A
公开(公告)日：2021-10-01
申请号：CN202111020419.X
申请日：2021-09-01
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C07K16/08 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及牛传染性鼻气管炎病毒的抗体检测，具体涉及一种牛传染性鼻气管炎病毒的竞争ELISA抗体检测试剂盒及其应用。本发明提供一种抗牛传染性鼻气管炎病毒的单克隆抗体，由保藏号为CGMCC No.23005的杂交瘤细胞所分泌。还提供一种牛传染性鼻气管炎病毒的抗体检测试剂盒，其包含所述单克隆抗体。本发明基于所述单克隆抗体以及本发明设计和表达的截短的牛传染性鼻气管炎病毒gB蛋白，建立了一种牛传染性鼻气管炎病毒的抗体检测方法。该方法具有特异性强、敏感性好、操作简便、快速的优点。
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公开(公告)号：CN110423271A
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201910723900.1
申请日：2019-08-07
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明提供了鸡CR2基因的克隆、蛋白的表达和纯化及其多克隆抗体的制备。提供了ChCR2蛋白的氨基酸序列和基因序列，构建了含有不同标签的ChCR2原核表达载体，利用大肠杆菌原核表达系统表达ChCR2蛋白，并对蛋白进行纯化。纯化后的蛋白能够制备效价较高的多克隆抗体。ChCR2基因，在鸡免疫系统中的作用十分重大。CR2能将先天性补体介导的免疫应答与病原体和外来抗原联系起来，通过与共价附着于靶标的C3d结合而产生的适应性免疫应答，其导致的细胞信号传导现象，能极大程度降低B细胞活化的阈值。B细胞在免疫系统中的位置举足轻重，所以本发明发现的ChCR2无论是从基础研究还是临床运用上的意义都是十分重大的。
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公开(公告)号：CN109402274A
公开(公告)日：2019-03-01
申请号：CN201811332791.2
申请日：2018-11-09
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q1/6809 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明通过RNA-seq技术获得A型和B型牛源多杀性巴氏杆菌菌株的差异表达基因的方法，以及通过多杀性巴氏杆菌的差异表达基因或其产物检测A型多杀性巴氏杆菌或者鉴别A型和B型牛源多杀性巴氏杆菌的应用。本发明还建立了基于差异表达基因鉴别A型和B型多杀性巴氏杆菌的荧光定量RT-PCR方法。所述RT-PCR方法包括对多杀性巴氏杆菌TadD基因进行扩增的步骤。本发明的方法可以高灵敏度、高特异性地检测A型菌株，灵敏度为10fg cDNA/μL，是常规PCR的1000倍，且不与其他种属的细菌反应，具有良好的特异性。本发明的方法通过特异性检测A型牛源多杀性巴氏杆菌和鉴别A型与B型多杀性巴氏杆菌，不仅可以对相关疫病进行鉴别诊断，也可为今后A型疫苗的免疫效力提供有效监测，具有重大的实用价值和应用前景。
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公开(公告)号：CN112979789B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202110403118.9
申请日：2021-04-14
Applicant: 北京市农林科学院
IPC: C07K16/08 , C12N5/20 , G01N33/543 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的检测，具体涉及一种用于检测牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的阻断ELISA试剂盒及其应用。本发明提供一种抗牛传染性鼻气管炎病毒的具有中和活性的单克隆抗体，由保藏号为CGMCC No.21015的杂交瘤细胞所分泌。还提供一种用于检测牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的试剂盒，其包含所述单克隆抗体。本发明基于所述单克隆抗体以及本发明设计的截短的gD蛋白，建立了一种可检测牛传染性鼻气管炎病毒的中和抗体的阻断ELISA方法，具有特异性强、灵敏度高、重复性好的优点。
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公开(公告)号：CN111848779A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010781505.1
申请日：2020-08-06
Applicant: 北京市农林科学院
Abstract: 本发明涉及一种抗鸡补体受体2(ChCR2)单克隆抗体及其应用，本发明以纯化后的ChCR2蛋白片段作为免疫原，免疫小鼠后提取免疫合格的的小鼠脾脏B淋巴细胞，通过细胞融合技术将淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，经过筛选和亚克隆技术，获得抗ChCR2单克隆抗体，本发明的抗ChCR2单克隆抗体可以用于检测ChCR2蛋白抗原的生物学检测试剂，并应用在研究鸡B细胞功能的相关检测产品中。
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