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公开(公告)号：CN117802275A
公开(公告)日：2024-04-02
申请号：CN202410231350.2
申请日：2024-03-01
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种犊牛腹泻主要病原三重荧光定量PCR检测方法及其应用，属于分子生物学检测技术领域。本发明解决了常规PCR在灵敏度、效率和病原含量测定等方面存在不足的问题。所述检测方法以待检测样品的RNA或DNA为模板，选择BCoV的N基因、BRV的NSP5基因、大肠杆菌K99基因为检测靶基因，然后比对靶基因序列，确定拟扩增的基因序列候选区域，然后根据确定的基因序列设计定量PCR扩增引物，并于所设计的扩增引物中间设计探针，进行荧光定量PCR检测，最后对荧光定量PCR扩增曲线及Ct值进行分析，获得检测结果。所述检测方法及引物、探针可应用于所述三种病毒或细菌相关检测试剂盒中，适用于牛轮状病毒、牛冠状病毒和大肠杆菌K99的检测领域。
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公开(公告)号：CN117646032A
公开(公告)日：2024-03-05
申请号：CN202410114328.X
申请日：2024-01-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: BHV‑1的反向遗传操作系统及其在病毒拯救中的应用，属于病毒遗传操作技术领域。为解决现有BHV‑1的基因编辑方法存在效率低、耗时长、重组病毒纯化困难等问题，本发明通过将BHV‑1基因组剪切后分段克隆入Fosmid粘粒载体pCC1Fos，构建了BHV‑1基因组Fosmid文库；在对该文库进行基因组测序的基础上，从中挑选出5个克隆有BHV‑1基因组片段，且相互含有重叠区域，并可以拼接覆盖BHV‑1全基因组的重组粘粒；用这5个粘粒共转染人胚胎肾细胞，成功拯救BHV‑1，获得了BHV‑1的反向遗传操作系统。
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公开(公告)号：CN116785420A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202311047976.X
申请日：2023-08-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 北京荷牧生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开一种牛病毒性腹泻病毒的mRNA疫苗及其应用，属于核酸疫苗技术领域。为了提高牛病毒性腹泻病毒mRNA疫苗的免疫保护作用。本发明提供一种牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea Virus）的mRNA疫苗，所述mRNA疫苗编码牛病毒性腹泻病毒的E2蛋白或牛病毒性腹泻病毒截短E2蛋白。实现了对牛病毒性腹泻病毒的免疫效果的提升。
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公开(公告)号：CN119639966A
公开(公告)日：2025-03-18
申请号：CN202510076577.9
申请日：2025-01-17
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 一种用于检测反刍动物虫媒病毒的四重荧光定量RT‑PCR检测试剂盒及使用方法和应用，属于分子生物学技术领域。本发明为解决现有技术中缺少快速、灵敏、特异且能同时检测BTV、EHDV、AKAV、CHUV病毒的检测方法，提供了一种用于检测反刍动物虫媒病毒的四重荧光定量RT‑PCR检测试剂盒，所述试剂盒包括引物对和探针组合，以及四重荧光定量RT‑PCR检测方法，所述检测方法具有良好的反应特异性、灵敏性和重复性，所述四重荧光定量RT‑PCR检测方法对于AKAV、BTV、EHDV和CHUV的检测结果的阳性率准确度较高，可应用于临床样品和实验室样品的常规检测和反刍动物群体的日常监测。
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公开(公告)号：CN119592524A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411759847.8
申请日：2024-12-03
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/40 , G01N33/569 , A61K39/175 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种携带施马伦贝格病毒基因的重组水泡性口炎病毒及其制备与应用，属重组病毒技术领域。本发明的目的是为了提供一种携带施马伦贝格病毒基因的重组水泡性口炎病毒。本发明提供一种携带施马伦贝格病毒基因的重组水泡性口炎病毒，以水疱性口炎病毒为出发病毒，利用氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的蛋白替换氨基酸如SEQ ID NO.4所示的蛋白获得携带施马伦贝格病毒基因的重组水泡性口炎病毒。重组病毒可以代替施马伦贝格病毒建立病毒中和试验，用于施马伦贝格病毒中和抗体的检测，从而为牛羊的血清学检测以及施马伦贝格病毒候选疫苗的效力评价提供可靠工具。
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公开(公告)号：CN119464232A
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202510065202.2
申请日：2025-01-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , A61K39/275 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开一种毒力致弱的牛结节性皮肤病病毒LSDV‑75及其应用，属于减毒毒株技术领域。本发明的目的是为了提供一株减毒充分且免疫效果好的牛结节性皮肤病病毒疫苗株。本发明提供一种毒力致弱的牛结节性皮肤病病毒株，命名为羊痘病毒LSDV‑75，保藏号为CCTCC NO：V2024114，保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2024年12月2日。本发明提供的疫苗株可作为安全和有效的防控牛结节性皮肤病的疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN119061204A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411463148.9
申请日：2024-10-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 一种可视化检测流行性出血病病毒的试剂盒及其使用方法和应用，属于生物学检测技术领域。本发明为解决现有技术中缺少高效、高灵敏度、高特异性的现地快速检测EHDV的方法，提供了一种可视化检测流行性出血病病毒的试剂盒，所述试剂盒包括RT‑EAR引物和crRNA，以及RT‑ERA扩增体系和CRISPR‑Cas12a检测体系；所述RT‑ERA引物可特异性扩增靶标序列，所述CRISPR‑Cas12a检测体系具有良好的灵敏度和高特异性。本发明提供的可视化检测流行性出血病病毒的试剂盒为EHDV核酸检测提供了新的检测方法，所述试剂盒可用于EHDV的实验室检测和养殖场的临床样本分析、现场检测、日常监测等工作。
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公开(公告)号：CN118308312A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410732718.3
申请日：2024-06-07
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 一种表达报告基因的重组阿卡斑病毒及构建方法和应用，属于重组病毒技术领域。本发明为了解决现有技术中报告基因的插入会导致弱病毒的复制，以及报告基因丢失的技术问题，提供一种表达报告基因的重组阿卡斑病毒，所述重组阿卡斑病毒由下述组分组成：携带分子标签的AKAV‑S基因节段、AKAV‑M基因节段、AKAV‑L基因节段和报告基因，所述报告基因为mWasabi或Nluc报告基因中的任意一种。本发明所提供的表达报告基因的重组阿卡斑病毒，具有较好的遗传稳定性，能够稳定传代；通过引入mWasabi或Nluc报告基因，实现了评价病毒复制水平的指标和相对变化，以及可视化的目的，可应用于对阿卡斑病毒感染进行实时动态示踪，将成为阿卡斑病毒致病机理研究的重要手段。
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公开(公告)号：CN118308291A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410741854.9
申请日：2024-06-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了牛病毒性腹泻病毒易感单克隆细胞株及制备方法与应用，属于生物医学技术领域。本发明通过筛选获得一种牛病毒性腹泻病毒易感单克隆细胞株，解决了目前MDBK‑野生型细胞株培养的BVDV病毒的复制滴度有限，生产效率低，成本较高的问题。所述牛病毒性腹泻病毒易感单克隆细胞株命名为牛源肾脏传代细胞系MDBK‑C14，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.45823，保藏时间为2024年3月4日。本发明所述的牛病毒性腹泻病毒易感单克隆细胞株能够大幅度提高牛病毒性腹泻病毒的复制滴度，可应用于牛病毒性腹泻病毒疫苗种毒生产，从而降低成本。
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