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公开(公告)号：CN110261599A
公开(公告)日：2019-09-20
申请号：CN201910406683.3
申请日：2019-05-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/537
Abstract: 本发明公开了一种检测A、B亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV-A gp85蛋白以及截短表达的ALV-B gp85蛋白的酶标板，其中，所述的截短表达的ALV-A gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述的截短表达的ALV-B gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明利用截短表达的A、B亚群禽白血病病毒的gp85蛋白建立了A、B亚群禽白血病病毒的抗体间接ELISA检测方法，试验表明，该试剂盒用于检测A、B亚群禽白血病病毒抗体时，其敏感性与同类进口试剂盒相当，但特异性优于同类进口试剂盒，与J亚群禽白血病病毒抗体无交叉反应。本发明的提出为A、B亚群禽白血病病毒的检测和流行病学调查以及早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号：CN110244039A
公开(公告)日：2019-09-17
申请号：CN201910367890.2
申请日：2019-05-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/536
Abstract: 本发明公开了一种检测J亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV-J gp85蛋白的酶标板，其中，所述的截短表达的ALV-J gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用截短表达的J亚群禽白血病病毒(ALV-J)gp85蛋白建立了ALV-J抗体间接ELISA检测方法，试验表明，该方法特异性好，与AB亚群ALV抗体无交叉，且其敏感性和特异性优于同类进口试剂盒，本发明的提出为ALV-J的检测和流行病学调查以及ALV-J的早期诊断提供了有效技术手段。
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公开(公告)号：CN113151193B
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202110308742.0
申请日：2021-03-23
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , C12N15/63 , C12N15/66 , A61K39/235 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一株血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rR188I及其构建方法和应用。本发明的疫苗株rR188I是在我国FAdV‑4新近分离株HLJFAd15基因组全长的感染性克隆粘粒Fos‑rFAdV4基础上将Hexon基因的第563位碱基由G突变为A，即编码的第188位氨基酸由R突变为I，获得感染性克隆粘粒Fos‑rR188I，然后利用Fos‑rR188I成功拯救出疫苗株rR188I。致病性实验显示rR188I对SPF鸡无致病性(突变之前具有100％的死亡率)。免疫保护实验证明，接种rR188I的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株的攻毒感染，证明rR188I具有非常好的免疫原性，可以作为疫苗候选毒株，同时致弱毒株大大降低了强毒株生物安全的隐患。
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公开(公告)号：CN115595327A
公开(公告)日：2023-01-13
申请号：CN202110721143.1
申请日：2021-06-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)(CN)
Abstract: 本发明公开了一种抗ALV‑J的鸡chNHE1基因编辑细胞系及其构建方法。本发明利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选，将ALV‑J细胞受体chNHE1基因的关键氨基酸位点V33进行突变以及W38进行缺失，同时为了便于后期基因编辑结果的鉴定，对其编码的第34‑37位氨基酸密码子进行同义替换。结果表明，含有W38位点缺失及V33位点突变的替换序列可高效定点替换chNHE1基因的相应序列，chNHE1基因编辑细胞系可在不影响细胞增殖水平的条件下抵抗ALV‑J的感染。本发明通过对chNHE1作为ALV‑J受体的关键氨基酸位点的突变，建立了高效的鸡chNHE1基因编辑细胞系的构建方法，为进一步研究chNHE1基因的功能奠定了基础。
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公开(公告)号：CN110244039B
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN201910367890.2
申请日：2019-05-05
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/535 , G01N33/569 , G01N33/536
Abstract: 本发明公开了一种检测J亚群禽白血病病毒抗体的ELISA试剂盒及其应用。包括包被截短表达的ALV‑J gp85蛋白的酶标板，其中，所述的截短表达的ALV‑J gp85蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明利用截短表达的J亚群禽白血病病毒(ALV‑J)gp85蛋白建立了ALV‑J抗体间接ELISA检测方法，试验表明，该方法特异性好，与AB亚群ALV抗体无交叉，且其敏感性和特异性优于同类进口试剂盒，本发明的提出为ALV‑J的检测和流行病学调查以及ALV‑J的早期诊断提供了有效技术手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112501129A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011466765.6
申请日：2020-12-14
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了抗IBDV VP2蛋白的单克隆抗体组合及其在鉴别检测IBDV中的用途。所述的单克隆抗体组合由抗IBDV VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株7D以及25C所分泌的单克隆抗体组成，其中杂交瘤细胞株7D以及25C的菌种保藏编号分别为CGMCC NO.21009以及CGMCC NO.21008。实验证明，7D对IBDV经典毒、超强毒和变异株均能识别，而25C只能识别IBDV经典毒和超强毒，不能识别IBDV变异株。此外，本发明还利用该两株单克隆抗体建立了间接免疫荧光技术，可鉴别检测IBDV变异株和非变异株(经典毒和超强毒)，因此，本发明的提出为IBDV的鉴别提供了新的技术手段，对于IBD的综合防控具有重要意义。
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公开(公告)号：CN115595327B
公开(公告)日：2025-04-15
申请号：CN202110721143.1
申请日：2021-06-28
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种抗ALV‑J的鸡chNHE1基因编辑细胞系及其构建方法。本发明利用CRISPR/Cas9方法和流式细胞术筛选，将ALV‑J细胞受体chNHE1基因的关键氨基酸位点V33进行突变以及W38进行缺失，同时为了便于后期基因编辑结果的鉴定，对其编码的第34‑37位氨基酸密码子进行同义替换。结果表明，含有W38位点缺失及V33位点突变的替换序列可高效定点替换chNHE1基因的相应序列，chNHE1基因编辑细胞系可在不影响细胞增殖水平的条件下抵抗ALV‑J的感染。本发明通过对chNHE1作为ALV‑J受体的关键氨基酸位点的突变，建立了高效的鸡chNHE1基因编辑细胞系的构建方法，为进一步研究chNHE1基因的功能奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112500458B
公开(公告)日：2022-12-16
申请号：CN202011473614.3
申请日：2020-12-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株亚单位疫苗、其制备方法及应用。针对IBDV新型变异株的流行，本发明对IBDV新型变异株代表毒株SHG19主要保护性蛋白VP2的基因表达盒进行了设计，引入了利于其正确构象形成的元件，构建了重组原核表达质粒，制备了重组大肠杆菌基因工程菌，经过表达条件和纯化条件的摸索，高效制备了IBDV新型变异株病毒样颗粒，将该病毒样颗粒与佐剂乳化制备成疫苗，试验结果显示，该疫苗不仅对同源的新型变异株产生了100％的免疫保护，而且对异源的vvIBDV的致死性攻击也产生了良好的免疫保护。本发明的提出为IBDV新型变异株以及超强毒株的防治提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN114231503A
公开(公告)日：2022-03-25
申请号：CN202111349642.9
申请日：2021-11-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , C12N15/40 , A61K39/12 , A61K39/235 , A61P31/14 , A61P31/20 , A61P9/00 , A61P7/10 , A61P1/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性法氏囊病病毒、血清4型禽腺病毒二联灭活疫苗及其制备方法和应用。本发明在血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rHN20的基础上，在FAdV‑4基因组开放阅读框42和43之间的长度为1966‑bp天然核苷酸缺失位点插入传染性法氏囊病病毒超强毒的VP2基因，获得了一种表达鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)VP2蛋白的重组血清4型禽腺病毒(FAdV‑4)疫苗株，命名为rHN20‑vvIBDV‑VP2。将该疫苗株制备成二联灭活疫苗，免疫保护实验证明，接种rHN20‑vvIBDV‑VP2二联灭活疫苗的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株以及IBDV超强毒的攻毒感染，证明rHN20‑vvIBDV‑VP2二联灭活疫苗具有非常好的免疫原性。本发明的提出为防治鸡心包积液‑肝炎综合征以及鸡传染性法氏囊病提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN114107226A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111249164.4
申请日：2021-10-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/40 , C12N15/861 , C12N15/66 , A61K39/295 , A61K39/235 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P31/20 , A61P9/00 , A61P1/16 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种表达vvIBDV‑VP2蛋白的重组4型禽腺病毒活载体疫苗株及其构建方法和应用。本发明在血清4型禽腺病毒反向遗传疫苗株rHN20的基础上，在FAdV‑4基因组开放阅读框42和43之间的长度为1966‑bp天然核苷酸缺失位点插入传染性法氏囊病病毒超强毒的VP2基因，获得了一种表达鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vvIBDV)VP2蛋白的重组血清4型禽腺病毒(FAdV‑4)活载体疫苗株，命名为rHN20‑vvIBDV‑VP2。免疫保护实验证明，免疫rHN20‑vvIBDV‑VP2的SPF鸡可以完全抵抗FAdV‑4强毒株以及IBDV超强毒株的攻毒感染，说明rHN20‑vvIBDV‑VP2具有非常好的免疫原性，可以作为防治鸡心包积液‑肝炎综合征以及鸡传染性法氏囊病的活载体疫苗毒株。
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