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公开(公告)号：CN102517294B
公开(公告)日：2013-08-07
申请号：CN201110402670.2
申请日：2011-12-07
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/12 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/877
Abstract: 本发明公开了一种基于Ipr1基因构建的巨噬细胞异性打靶载体和重组细胞，通过在Ipr1基因5′端连接MSR1启动子使Ipr1基因在牛的巨噬细胞中特异的高效表达；并进一步构建重组基因LA-MSR1-Ipr1-SA，使目的基因定点整合在牛28号染色体SP-A与MAT1A基因之间。构建了Ipr1巨噬细胞特异性打靶载体pLMIS，将其转染到新生牛耳成纤维细胞，通过G418和GCV正负筛选，构建转基因的新生牛耳成纤维细胞系，作为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚；胚胎移植后，生产出定点插入Ipr1基因的转基因牛5头，其中4头存活，转基因牛对M.bovis有抗性。
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公开(公告)号：CN103215295A
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201310126017.7
申请日：2013-04-11
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/63 , C12N5/10 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种β-酪蛋白位点定点整合Lys基因的打靶载体及其构建的细胞，包括目的基因Lys，在的基因Lys的上游和下游分别设有5’同源臂和3’同源臂，以牛β-酪蛋白位点第二内含子锌指核酸酶识别位点的上下游各延伸700～850bp的同源序列作为5’同源臂和3’同源臂。本发明使用电穿孔的方法将打靶载体pCSN2-Lys-Neo-EGFP和锌指核酸酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞，经过G418药物筛选和PCR分析后获得了打靶的阳性克隆细胞，以打靶的阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚胎，为研制抗乳房炎的转基因奶牛提供坚实的基础。
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公开(公告)号：CN102533857A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201210039495.X
申请日：2012-02-21
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/873
Abstract: 本发明公开了一种包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞，构建了一种包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体Muc1-loxp-EGFP-HBD3，以及基于该载体的包含HBD3气管上皮细胞异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞系，利用该细胞系作为核供体细胞，为解决奶牛结核病的转基因奶牛提供坚实的基础。本发明通过电转染法将外源性表达载体Muc1-loxp-EGFP-HBD3导入牛胎儿成纤维细胞，荧光显微镜观察标记基因EGFP的表达情况，并经G418筛选获得阳性细胞，经PCR鉴定，证实目的基因HBD3整合到牛胎儿成纤维细胞的基因组；最后，将转染HBD3基因的牛胎儿成纤维细胞作为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102533821A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201110413178.5
申请日：2011-12-12
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/57 , C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/873 , A01K67/027
Abstract: 本发明公开了一种重组溶葡萄球菌素基因及其构建的表达载体和重组细胞。重组溶葡萄球菌素基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示，构建含有重组溶葡萄球菌素基因和绿色荧光蛋白基因的乳腺特异性表达载体pBELS，其次用Fugen HD将乳腺特异表达载体pBELS转染高产奶牛耳成纤维细胞，荧光显微镜观察标记基因EGFP的表达情况，并经G418筛选获得转基因阳性细胞，进行PCR和Southern bloting鉴定，证实重组溶葡萄球菌素基因整合到牛耳成纤维细胞的基因组中。用生长状态良好的阳性转基因细胞作为核供体，构建转基因胚胎进行胚胎移植到同步化的受体牛子宫中，获得了转溶葡萄球菌素基因的奶牛。
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公开(公告)号：CN101892263A
公开(公告)日：2010-11-24
申请号：CN201010143538.X
申请日：2010-04-09
Applicant: 西北农林科技大学 , 杨凌科元克隆股份有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N5/10 , C12N15/877 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种包含HLZ乳腺特异性表达载体的牛胎儿成纤维细胞，通过构建HLZ乳腺特异性表达载体，在HLZ基因的5′端插入如CSN5序列，3′端插入所示的CSN3序列作为调控元件，CSN5序列和CSN3序列对其下游的目的基因具有调控作用，使其在牛乳腺组织中实现特异的高效表达。本发明使用电穿孔的方法将表达载体pCSN2-HLZ-Neo-TK转染到牛胎儿成纤维细胞，再经G418，GVC双药物筛选后获得阳性细胞，以阳性细胞为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚，并进行PCR鉴定其基因整合的正确性，再将转基因克隆胚移入受体牛子宫中，期望获得乳腺组织分泌溶菌酶的转基因奶牛。
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公开(公告)号：CN214694116U
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN202120699642.0
申请日：2021-04-07
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及牛囊胚切割技术领域，具体公开了一种牛囊胚切割辅助装置，包括：培养皿固定台、用于固定培养皿以及连接、固定切割承载架、切割承载架、用于安装具体实现切割功能的各个部件，滑动刀架是主要的功能部件，依靠其上安装的刀具横向固定装置与刀具高度调整装置，实现对切割刀片位置的精细化定位与对囊胚的切割。本发明设计的牛囊胚切割辅助装置，能够让操作人员，简便迅速地切割放置在显微镜操作台上培养皿中的指定去透明带牛囊胚。
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公开(公告)号：CN218943599U
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202222831637.8
申请日：2022-10-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61D19/02
Abstract: 本实用新型公开了一种具有精液量显示的取精器，包括调节操作机构、采精收集机构和贴面定型机构，所述调节操作机构的一端连接有采精收集机构，且调节操作机构的内部设置有贴面定型机构。该具有精液量显示的取精器，可通过假阴管与此螺纹槽实现对漏斗的连接，且漏斗同样依靠螺纹接管与采精管实现连接过程，当被采精的牛处于射精状态下，可通过漏斗将精液完全传递至连接的采精管内，切由于采精管、漏斗均采用透明塑料材质制作形成透明壁，可方便使用者随时对射精状态观察，且采精管内的储精量也可以根据一侧贴合的测量刻度，方便使用者对过程进行掌握，优化操作过程，让取精作业更加便捷稳定化。
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