公开(公告)号：CN103160515A

公开(公告)日：2013-06-19

申请号：CN201110420334.0

申请日：2011-12-15

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 孙远明 ,  董洁娴 ,  王弘 ,  雷红涛 ,  李振峰 ,  徐振林 ,  杨金易 ,  沈玉栋

IPC: C12N15/13 ,  C12N15/63 ,  C12N5/20 ,  C07K16/00 ,  C07K16/44

Abstract: 本发明公开了一种基于杂交瘤细胞的单链抗体的制备方法。本发明的制备方法，步骤为：以杂交瘤细胞总mRNA为模板反转录得cDNA，选用简并性低的通用引物扩增全套抗体重链可变区和轻链可变区基因；将扩增出的重、轻链可变区基因序列输入IMGT数据库进行分析，排除来源瘤细胞的抗体基因和无义基因，得到候选重链和轻链可变区基因；将该基因翻译成氨基酸序列后进行三维结构同源模建，获得单链抗体的三维模拟结构，与相应抗原靶标分子进行分子对接分析；分析结果正确的候选重链和轻链通过重叠延伸PCR法拼接成单链抗体基因，进行表达及抗体活性鉴定。本发明的制备方法适合所有源于单克隆杂交瘤细胞的单链抗体制备，过程简易、快速，产品质量高。

公开(公告)号：CN103091494A

公开(公告)日：2013-05-08

申请号：CN201310013604.5

申请日：2013-01-14

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 杨金易 ,  孙远明 ,  王弘 ,  雷红涛 ,  沈玉栋 ,  徐振林 ,  李萍

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/543 ,  G01N21/76

Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉毒素M1的化学发光酶联免疫检测试剂盒及使用方法，属于化学发光酶联免疫检测技术领域。该检测试剂盒包括包被有黄曲霉毒素M1抗原的化学发光酶标板，黄曲霉毒素M1标准品，黄曲霉毒素M1抗体，酶标抗抗体，化学发光液A液和B液。该试剂盒的使用方法包括如下步骤：（1）待测样品的前处理；（2）依次加入黄曲霉毒素M1标准品溶液或样品、黄曲霉毒素M1抗体，竞争反应后加入酶标抗抗体，最后加入化学发光液通过化学发光免疫分析仪进行黄曲霉毒素M1的定量检测；（3）结果处理与分析。本发明提供的检测试剂盒灵敏度高、稳定性好，适合大量样品的筛查，具有重要的实际应用推广意义。

公开(公告)号：CN102516148A

公开(公告)日：2012-06-27

申请号：CN201110375159.8

申请日：2011-11-23

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 王弘 ,  刘细霞 ,  杨星星 ,  沈玉栋 ,  徐振林 ,  孙远明 ,  杨金易

IPC: C07D207/38 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/14 ,  G01N33/53

Abstract: 本发明公开了细交链孢菌酮酸的半抗原和抗原及其制备方法与应用。可作为细交链孢菌酮酸半抗原的化合物，具有如式I所示的结构。细交链孢菌酮酸的抗原是将TeAH和载体蛋白混合后溶解于PBS溶液中，滴入戊二醛溶液，搅拌反应，然后用生理盐水透析得到；或者是将TeAHGA溶于N，N-二甲基甲酰胺中，加入二环已基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，搅拌过夜；离心，取上清液为A液；取载体蛋白溶解于PBS中，搅拌溶解为B液；将A液滴入B液中反应，然后用生理盐水透析得到。用本发明的抗原免疫动物得到的抗血清的效价可达1：3.2×104，对TeAH的线性范围为0.130ng/mL～8.789ng/mL(IC20-IC80)，半抑制浓度为1.095ng/mL，产生的抗体特异性高、灵敏度高、准确度高。式I。

公开(公告)号：CN102206485A

公开(公告)日：2011-10-05

申请号：CN201110090857.3

申请日：2011-04-12

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 孙远明 ,  徐振林 ,  雷红涛 ,  王强 ,  沈玉栋 ,  杨金易 ,  王弘

IPC: C09K11/06 ,  C07F9/18 ,  C07F9/17 ,  G01N33/577 ,  G01N21/21

Abstract: 本发明公开了一种荧光素标记物及基于荧光偏振的有机磷农药均相多残留免疫检测方法。本发明通过将待测样品、荧光示踪物和有机磷农药多特异性抗体混合，荧光示踪物和有机磷农药多特异性抗体结合后产生可检测的荧光偏振值，测量混合物的荧光偏振值，通过一系列已知浓度的有机磷农药标准物建立的标准曲线，利用标准曲线计算待测样品中有机磷农药的浓度。本发明方法样品前处理简单，反应过程中无需洗涤分离，检测时间低于3～5min，操作方便；可以同时测定20种有机磷农药，灵敏度在0.003～1.0mg/kg之间；采用96微孔板可以同时测定42个样品（每个样品2次平行），是一种快速、简便、高灵敏度的有机磷农药高通量检测方法。

公开(公告)号：CN101463086A

公开(公告)日：2009-06-24

申请号：CN200910036527.9

申请日：2009-01-09

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈玉栋 ,  孙远明 ,  雷红涛 ,  谢桂勉 ,  王弘 ,  徐振林 ,  杨金易

IPC: C07K16/44 ,  C07K16/06 ,  C07K14/765 ,  C07F9/18 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药抗体及其制备方法和应用。本发明所述抗体是通过在二乙氧基硫代磷酸酯结构上引入合适的活性手臂，制备免疫半抗原，半抗原偶联牛血清蛋白制备免疫抗原，免疫原免疫新西兰大白兔制备得到，并与包被原建立二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药多残留ELISA检测方法。基于本发明所述抗体建立的检测方法可以同时检测二乙氧基硫代磷酸酯类有机磷农药12种以上，检测限为0.0002～3.938μg/ml，适合农残的现场监控和高通量快速筛选。

公开(公告)号：CN114675028B

公开(公告)日：2025-03-14

申请号：CN202210357015.8

申请日：2022-04-06

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  王弘 ,  郭铭威 ,  张译丰 ,  孙远明

IPC: G01N33/58 ,  G01N33/558 ,  G01N33/543 ,  G01N33/532 ,  G01N33/53 ,  G01N33/52

Abstract: 本发明公开了一种杀螟硫磷纳米抗体‑胶体金标记物的制备方法和应用。本发明提供了杀螟硫磷纳米抗体‑胶体金标记物的制备方法，制备得到的杀螟硫磷纳米抗体‑胶体金标记物的灵敏度高、稳定性强。本发明提供的检测杀螟硫磷农药的纳米抗体‑胶体金试纸条，具有灵敏度高、特异性强、成本低、操作简单、检测时间短、适用于市场的快速检测、易于储存、保质期长的优点。采用本发制备得到的纳米抗体‑胶体金试纸条在对杀螟硫磷农药的残留检测中，灵敏度达到0.013～0.309mg/kg，反应时间为5～8min，检测杀螟硫磷农药残留的方法简便、快速、直观、准确、适用范围广、成本低、易推广使用，适合市场上大量样本的筛查和现场监控。

公开(公告)号：CN119086763A

公开(公告)日：2024-12-06

申请号：CN202411282275.9

申请日：2024-09-13

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 曾羲 ,  徐振林 ,  王宇 ,  毛新武 ,  杨金易 ,  沈玉栋 ,  雷红涛 ,  雷敏

IPC: G01N30/02 ,  G01N30/06 ,  G01N30/74 ,  G01N30/86

Abstract: 本发明公开了一种基于MALDI‑TOF MS同时快速测定钩吻生物碱的方法，本发明结合了仪器条件的优化和方法验证，实现了对血清和尿液中八种钩吻生物碱的定量检测，这扩展了MALDI‑TOF MS在低分子质量范围(

公开(公告)号：CN115819331B

公开(公告)日：2024-10-15

申请号：CN202211507852.0

申请日：2022-11-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 杨金易 ,  陈丽丹 ,  沈玉栋 ,  张咏仪 ,  王弘 ,  徐振林 ,  雷红涛 ,  孙远明

IPC: C07D213/643 ,  C07K14/77 ,  C07K14/795 ,  C07K16/44 ,  G01N33/53 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种啶氧菌酯半抗原、人工抗原、单克隆抗体及其应用。本发明所述啶氧菌酯半抗原与啶氧菌酯的骨架结构重叠度高，用其制备的人工抗原可以将啶氧菌酯的特征结构暴露出来，使免疫所得的啶氧菌酯人工抗体具有良好的特异性和灵敏度。基于本发明制备所得啶氧菌酯人工抗原和单克隆抗体，本发明还构建了一种啶氧菌酯的间接ELISA检测方法，所述方法的操作简单，检测特异性好，与啶氧菌酯的类似物均无交叉反应，可高特异性识别啶氧菌酯；检测灵敏度高，对啶氧菌酯的最低检测限为0.0263ng/mL；IC50为0.942ng/mL，线性范围为0.098～9.014ng/mL，线性范围广。

公开(公告)号：CN117510640B

公开(公告)日：2024-08-23

申请号：CN202311379984.4

申请日：2023-10-23

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 徐振林 ,  张咏仪 ,  沈玉栋 ,  冯漪琪 ,  杨金易 ,  王弘 ,  孙远明

IPC: C07K16/44 ,  C07K14/42 ,  C12N15/13 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58 ,  G01N33/53 ,  B01L3/00

Abstract: 本发明公开了一种抗玉米赤霉烯酮纳米抗体及其在磁珠微流控免疫检测中的应用，所述纳米抗体的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。所述纳米抗体能够识别玉米赤霉烯酮，且具有优异的有机溶剂耐受性和酸碱耐受性，可用于玉米赤霉烯酮的检测或用于制备相应的检测产品。进一步地，本发明基于所述纳米抗体还提供一种检测玉米赤霉烯酮的NHS磁珠‑微流控免疫检测方法，该方法对玉米赤霉烯酮的检测限为0.03ng/mL，线性范围为0.064～1000ng/mL，灵敏度高，操作简便，可实现国家标准中最大残留限量浓度范围的广泛检测，检测结果准确可靠。

公开(公告)号：CN116462729B

公开(公告)日：2024-07-09

申请号：CN202310343536.2

申请日：2023-03-31

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  关明通 ,  关甜 ,  陈佳虹 ,  刘志威 ,  徐振林

IPC: C07J5/00 ,  C07K14/765 ,  C07K14/77 ,  C07K16/44 ,  G01N33/74 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了醋酸泼尼松半抗原、人工抗原及其应用。本发明提供了全新的醋酸泼尼松半抗原，用此半抗原制备得到醋酸泼尼松的人工抗原，以该人工抗原免疫动物所得的抗体效价高，对醋酸泼尼松的LOD为0.078ng/mL，IC50为4.449ng/mL，定量检测范围为0.347ng/mL～56.94ng/mL。本发明提供的醋酸泼尼松抗体及检测方法具有简便快速、特异性强、线性范围广和灵敏度高的特点，在醋酸泼尼松的快速有效检测中具有良好的应用前景和广阔的发展空间。