一种地衣芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的补料方法

    公开(公告)号:CN105936899B

    公开(公告)日:2019-05-17

    申请号:CN201610284478.0

    申请日:2016-05-03

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: C12N9/24 C12R1/10

    摘要: 一种地衣芽孢杆菌产β‑甘露聚糖酶的补料方法,其包括如下步骤:以发酵产酶培养基为基础,37℃摇瓶培养;其中,发酵产酶培养基中包含氮源和碳源,所述氮源为NH4NO3、氨水、NH4Cl、(NH4)2SO4、酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、麸皮、尿素、豆粕或其组合,优选地,氮源为两种以上的组合;所述碳源为魔芋粉、葡萄糖、面粉或其组合,优选地,碳源为两种以上的组合;所述氮源初始加入量为0.1‑10%(w/v);所述碳源初始加入量为0.1‑10%(w/v);补加的时间为反应开始后1‑40小时或酶活力降低点时或菌体数降低点时或还原糖降低点时,优选的补加时同时加入碳源和氮源,或不同时间加入碳源和氮源;所述氮源补加量为0.1‑10%(w/v);所述碳源补加量为0.1‑10%(w/v)。

    副干酪乳杆菌HD1.7prcR基因siRNA

    公开(公告)号:CN104845971B

    公开(公告)日:2017-12-08

    申请号:CN201510259659.3

    申请日:2015-05-20

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: C12N15/113

    摘要: 副干酪乳杆菌HD1.7prcR基因siRNA,它涉及副干酪乳杆菌基因的siRNA分子。它解决构建自杀质粒难度大,同源臂的长短依赖目的基因的长短,不利于同源重组的发生等问题。siRNA‑R1核苷酸序列为5'‑AUACCCAACAUUGUUUCGCTT‑3'。siRNA‑R2核苷酸序列为5'‑AUGCAGAACGCGAAAUCGCTT‑3'。本发明的两种siRNA分子都能够高效的阻断副干酪乳杆菌HD1.7prcR基因的表达,从而降低副干酪乳杆菌HD1.7细菌素的产量。

    一种地衣芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的补料方法

    公开(公告)号:CN105936899A

    公开(公告)日:2016-09-14

    申请号:CN201610284478.0

    申请日:2016-05-03

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: C12N9/24 C12R1/10

    CPC分类号: C12N9/2494 C12Y302/01078

    摘要: 一种地衣芽孢杆菌产β‑甘露聚糖酶的补料方法,其包括如下步骤:以发酵产酶培养基为基础,37℃摇瓶培养;其中,发酵产酶培养基中包含氮源和碳源,所述氮源为NH4NO3、氨水、NH4Cl、(NH4)2SO4、酵母粉、牛肉膏、蛋白胨、麸皮、尿素、豆粕或其组合,优选地,氮源为两种以上的组合;所述碳源为魔芋粉、葡萄糖、面粉或其组合,优选地,碳源为两种以上的组合;所述氮源初始加入量为0.1‑10%(w/v);所述碳源初始加入量为0.1‑10%(w/v);补加的时间为反应开始后1‑40小时或酶活力降低点时或菌体数降低点时或还原糖降低点时,优选的补加时同时加入碳源和氮源,或不同时间加入碳源和氮源;所述氮源补加量为0.1‑10%(w/v);所述碳源补加量为0.1‑10%(w/v)。

    高产2,3-丁二醇的产酸克雷伯氏基因工程菌株的构建方法及其发酵方法

    公开(公告)号:CN105647953A

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201610157897.8

    申请日:2016-03-18

    申请人: 黑龙江大学

    摘要: 高产2,3-丁二醇的产酸克雷伯氏基因工程菌株的构建方法及其发酵方法,涉及一种高产2,3-丁二醇的基因工程菌株的构建方法及其发酵方法。本发明是为了解决目前产酸克雷伯氏菌产2,3-丁二醇产量低、转化率低、生产强度低及纯度低的问题。构建方法:一、ack基因同源左臂片段ack-L和右臂片段ack-R的构建;二、pack-L和pack-R质粒构建;三、pack-LR质粒构建;四、pT-Kanr质粒构建;五、同源重组片段ackL-Kanr-ackR的构建;六、K.oxytoca HD79-01/pKD46菌株构建;七、ackL-Kanr-ackR转化K.oxytoca HD79-01/pKD46。发酵方法:一、将产酸克雷伯氏基因工程菌株接种到种子培养基中,培养至对数生长期,得种子液;二、将种子液接种到发酵培养基中,底物葡萄糖150g/L,发酵,结束。本发明用于生产2,3-丁二醇。

    一种脱色用β-甘露聚糖酶及其用途

    公开(公告)号:CN105621630A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201610031200.2

    申请日:2016-01-18

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: C02F3/34 C12N9/24

    摘要: 本发明涉及一种β-甘露聚糖酶用于染料脱色的用途,所述染料为偶氮类染料、三芳甲烷类染料,其中所述偶氮类染料为刚果红、甲基橙、达旦黄和铬黑T;所述三芳甲烷类染料为水溶苯胺蓝、孔雀石绿、结晶紫和苯酚红。所述β-甘露聚糖酶是由地衣芽胞杆菌,优选地是由地衣芽胞杆菌HDGLJT-01产出的,具体是由以下方法制备的:将过夜培养的地衣芽胞杆菌HDGLJT-01种子液转接至魔芋胶发酵产酶培养基中,37℃、160rpm振荡培养48h,取40mL发酵液,4500r/min、4℃离心20min,得到的上清液,即粗酶液;利用丙酮沉淀法纯化粗酶液,再采用离子交换层析和凝胶过滤层析进一步纯化。本发明的产品比商品化的β-甘露聚糖酶脱色效果好。

    一株产杀白蚁化合物的树木内生细菌及其在白蚁防治中的应用

    公开(公告)号:CN105586301A

    公开(公告)日:2016-05-18

    申请号:CN201610168466.1

    申请日:2016-03-22

    申请人: 黑龙江大学

    摘要: 一株产杀白蚁化合物的树木内生细菌及其在白蚁防治中的应用,它涉及一种树木内生菌及其在白蚁防治中的应用。它提供一株产杀白蚁化合物的树木内生细菌及其在白蚁防治中的应用,通过对该菌株的培养繁殖与发酵生产杀白蚁的次生代谢产物,为开发生产绿色、天然生物白蚁防治剂开辟了一条新途径。罗森桧芽孢杆菌新种(Bacillus lawsoniana Zhou,Liu,Zhao,Hse et Ping sp.nov)HUB-I-004,保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC No:M2015817。罗森桧芽孢杆菌新种在白蚁防治中的应用。

    一种敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT及其构建方法

    公开(公告)号:CN103614408B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201310572458.X

    申请日:2013-11-15

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: C12N15/74 C12N15/66 C12R1/245

    摘要: 一种敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT及其构建方法,它涉及一种自杀质粒及其构建方法。敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT由prcK基因左侧片段prcKL、prcK基因右侧片段prcKR、四环素抗性基因和质粒pUC18构成。构建方法:一、扩增片段prcKL;二、得到质粒pUC18-KL;三、扩增片段prcKR;四、得到质粒pUC18-KLKR;五、扩增四环素抗性基因Tet;六、得到敲除prcK基因的自杀质粒pYTKLKRT。本发明用于生物工程研究领域。

    一种芽孢八叠球菌产果胶酶和甘露聚糖酶的方法

    公开(公告)号:CN104962542A

    公开(公告)日:2015-10-07

    申请号:CN201510409007.3

    申请日:2015-07-13

    申请人: 黑龙江大学

    IPC分类号: C12N9/88 C12N9/42 C12N1/20

    摘要: 一种芽孢八叠球菌产果胶酶和甘露聚糖酶的方法,涉及一种细菌产果胶酶和甘露聚糖酶的方法。本发明提供一种利用细菌产果胶酶和甘露聚糖酶的方法,拓展了产果胶酶和β-甘露聚糖酶的微生物菌种来源。方法:将芽孢八叠球菌属细菌HDYM-26接种于魔芋粉培养基中,在36~37℃、130~150r/min的条件下振荡培养22~26h,得到发酵液,对发酵液进行提取,获得果胶酶和甘露聚糖酶。该方法简便,成本低廉。该发酵液用于亚麻脱胶时间短、胶质去除彻底、残胶率低,亚麻纤维得率高、强度高。本发明用于产果胶酶和甘露聚糖酶。