公开(公告)号：CN105647954A

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201610157906.3

申请日：2016-03-18

申请人： 黑龙江大学

发明人： 葛菁萍 ,  孙姗姗 ,  叶广斌 ,  宋刚 ,  平文祥 ,  修宝林

IPC分类号： C12N15/74 ,  C12N1/20 ,  C12P7/18 ,  C12R1/22

CPC分类号： C12N9/0006 ,  C12P7/18

摘要： 高产2,3-丁二醇的产酸克雷伯氏基因工程菌株的构建方法及其发酵方法，涉及一种高产2,3-丁二醇的基因工程菌株的构建方法及其发酵方法。本发明是为了解决目前产酸克雷伯氏菌产2,3-丁二醇产量低、转化率低、生产强度低及纯度低的问题。构建方法：一、ldh基因同源左臂片段ldh-L和右臂片段ldh-R的构建；二、pldh-L和pldh-R质粒构建；三、pldh-LR质粒构建；四、pT-Cmr质粒构建；五、同源重组片段ldhL-Cmr-ldhR的构建；六、K.oxytoca HD79/pKD46菌株构建；七、ldhL-Cmr-ldhR转化K.oxytoca HD79/pKD46。发酵方法：一、将产酸克雷伯氏基因工程菌株接种到种子培养基中，培养至对数生长期，得种子液；二、将种子液接种到发酵培养基中，底物葡萄糖150g/L，发酵，结束。本发明用于生产2,3-丁二醇。

公开(公告)号：CN105647953A

公开(公告)日：2016-06-08

申请号：CN201610157897.8

申请日：2016-03-18

申请人： 黑龙江大学

发明人： 葛菁萍 ,  孙姗姗 ,  叶广斌 ,  凌宏志 ,  修宝林 ,  平文祥

IPC分类号： C12N15/74 ,  C12N1/20 ,  C12P7/18 ,  C12R1/22

CPC分类号： C12N9/0006 ,  C12N9/1217 ,  C12P7/18 ,  C12Y207/02001

摘要： 高产2,3-丁二醇的产酸克雷伯氏基因工程菌株的构建方法及其发酵方法，涉及一种高产2,3-丁二醇的基因工程菌株的构建方法及其发酵方法。本发明是为了解决目前产酸克雷伯氏菌产2,3-丁二醇产量低、转化率低、生产强度低及纯度低的问题。构建方法：一、ack基因同源左臂片段ack-L和右臂片段ack-R的构建；二、pack-L和pack-R质粒构建；三、pack-LR质粒构建；四、pT-Kanr质粒构建；五、同源重组片段ackL-Kanr-ackR的构建；六、K.oxytoca HD79-01/pKD46菌株构建；七、ackL-Kanr-ackR转化K.oxytoca HD79-01/pKD46。发酵方法：一、将产酸克雷伯氏基因工程菌株接种到种子培养基中，培养至对数生长期，得种子液；二、将种子液接种到发酵培养基中，底物葡萄糖150g/L，发酵，结束。本发明用于生产2,3-丁二醇。