双宿主重组杆状病毒表达载体及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN101724651A

    公开(公告)日:2010-06-09

    申请号:CN200810230451.9

    申请日:2008-10-16

    Abstract: 一种双宿主重组杆状病毒表达载体及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。该双宿主重组杆状病毒表达载体具有昆虫细胞可识别的Polyhedrin启动子和动物细胞可识别的CMV-IE启动子。该双宿主重组杆状病毒可在昆虫细胞上用于制备功能蛋白,又可在动物细胞上表达目的外源蛋白,可作为基因治疗和非复制型载体疫苗应用。该双宿主重组杆状病毒表达载体的构建方法是以Bac-to-Bac表达系统中转移载体pFastBac系列为基础,在Polyhedrin启动子上游引入CMV-IE启动子表达盒,构建转移载体,转化DH10Bac感受态细胞,重组双宿主Bacmid穿梭载体,然后转染对数生长期的昆虫细胞即可获得双宿主重组杆状病毒表达载体。

    五爪黄麻羽鸡的培育方法及应用

    公开(公告)号:CN100571506C

    公开(公告)日:2009-12-23

    申请号:CN200610017907.4

    申请日:2006-06-06

    Abstract: 本发明涉及一种五爪黄麻羽鸡的培育方法,该方法按以下步骤进行:(1)用丝毛乌骨鸡种与黄麻羽鸡杂交,生产F1代;(2)在F1代中选留具有五爪特征的黄麻羽鸡自交,生产出F2代鸡;(3)对F2代中具有五爪特征的黄麻羽鸡进行测交,选择纯合公母鸡纯繁,对纯繁群进行横交固定,家系选择及个体选择,则培育出五爪黄麻羽鸡新品系。用五爪黄麻鸡做父本,四爪做母本,其配套后代鸡均为五爪,可用于商品生产。该品种鸡或其配套系屠宰后,特有的五爪特征可作为该品种的标致用于保护黄麻羽鸡品种并作为企业产品的标示。采用本发明的方法所培育出的五爪黄麻羽鸡屠宰后,其五爪特征可作为保护本品种的标志及企业产品的标示。

    一种动物基因工程干扰素α和γ复合制剂及其生产方法和临床应用

    公开(公告)号:CN101209345A

    公开(公告)日:2008-07-02

    申请号:CN200610128462.7

    申请日:2006-12-26

    CPC classification number: Y02A50/473

    Abstract: 一种动物基因工程干扰素复合制剂及其生产方法和临床应用。该动物基因工程干扰素复合制剂通过提取动物外周血或脾淋巴细胞,经培养和体外诱导剂诱导,Trizol提取细胞总RNA,设计特异性引物,通过RT-PCR技术克隆干扰素基因,通过T-A策略将其连接到pGEM-T载体;重新设计引物,两端加入不同的酶切序列和起始密码子ATG、终止密码子TAA,并去除前导肽序列,以重组T载体为模板进行PCR扩增,获取动物干扰素基因表达片段;将表达片段进行稀有密码子突变,经双酶切后,胶回收目的片段,连接到经同样双酶切的载体pFastBacTMDual上;将动物interferon-α克隆到Polyhedrin promoter控制下的多克隆位点,将同一种属动物interferon-γ克隆到p10 promoter控制下的多克隆位点;将构建好的载体pFastBacTMDual+interferon α+interferon γ转染到DH10BacTME.coli进行重组;经蓝白斑筛选,PCR鉴定后,将构建好的recombinant bacmid提取纯化,通过脂质体法转染SF9昆虫细胞;表达产物鉴定、纯化;动物基因工程干扰素复合制剂抗病毒活性检测和临床应用效果评价。该动物基因工程干扰素在昆虫细胞共表达的生产方法和临床应用。

    耐粗饲放养鸡新品系的培育方法

    公开(公告)号:CN101084742A

    公开(公告)日:2007-12-12

    申请号:CN200610017908.9

    申请日:2006-06-06

    Abstract: 本发明涉及一种耐粗饲放养鸡新品系的培育方法:(1)组建F0代地方鸡群;(2)F0公母鸡养至性成熟,测定公母鸡个体对粗纤维的消化率,选择对粗纤维消化率大于17%的公母鸡留种组建家系,并繁殖F1代;(3)F1代雏鸡饲养至8周龄,每家系选择其部分全同胞或半同胞个体,测定其盲肠中纤维素酶的活性,F1代养至性成熟,测定公母鸡个体对粗纤维的消化率,选择对粗纤维消化率大于17%的公母,同时结合8周龄测定的每个家系全同胞或半同胞盲肠中纤维素酶活性的结果,选择粗纤维消化率高,且纤维素酶活性高的家系或个体留种,组建家系,繁殖F2代,并同时配合低蛋白、粗纤维含量高的日粮饲喂各世代雏鸡群;(4)重复步骤(3);(5)经4-5代选育,培育出耐粗饲放养鸡品系。

    矮小型绿壳蛋鸡的培育生产方法

    公开(公告)号:CN1748484A

    公开(公告)日:2006-03-22

    申请号:CN200410060517.6

    申请日:2004-09-15

    Abstract: 本发明公开了一种矮小型绿壳蛋鸡的培育生产方法,该培育生产方法按以下步骤进行:选用含有矮小基因的公鸡或母鸡与绿壳蛋鸡品种中母鸡或公鸡配种,生产F1代;在F1代中选留具有矮小基因特征的母鸡个体或携带矮小型基因的公鸡个体;再次用从F1代中选留的具有矮小基因特征的母鸡或携带矮小型基因的公鸡个体与含有矮小基因的公鸡或母鸡交配,生产F2代;在F2公母鸡中均有具有矮小基因特征的个体,选留这些具有矮小基因特征的公母鸡;通过家系选育和个体选择,测交检测,培育出具有矮小特征的绿壳蛋鸡新品系。本发明是将矮小型基因导入绿壳蛋鸡品种中,以达到既充分利用矮小型基因,又保护了我国绿壳蛋鸡品种的目的。

    一种悬浮式磁力搅拌子
    98.
    实用新型

    公开(公告)号:CN201644040U

    公开(公告)日:2010-11-24

    申请号:CN201020122359.3

    申请日:2010-03-03

    Inventor: 王彦彬 康相涛

    Abstract: 本实用新型公开了一种悬浮式磁力搅拌子,包括磁芯及搅拌叶片,所述的搅拌叶片包括两侧相向倾斜设置相交于叶片顶部的侧壁及桥接在两侧壁底面边沿的圆弧形底面,所述的两侧的侧壁及圆弧形的底面围成截面呈上尖下圆的水滴形结构。本实用新型采用上述技术方案,其结构简单,制作方便,通过水滴形截面的搅拌叶片加强了搅拌子的搅拌效果,从而使培养液混合更加均匀,并降低生物培养物因剪切力过大而受损,有利于细胞的生长。

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