大黄鱼白细胞介素4/13B基因启动子序列及其应用

    公开(公告)号:CN120040577A

    公开(公告)日:2025-05-27

    申请号:CN202510206741.3

    申请日:2025-02-25

    Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼白细胞介素4/13B(IL‑4/13B)基因的启动子,所述启动子序列如SEQ ID NO.1所示。将重组质粒pGL3‑IL‑4/13B和对照质粒pGL3‑Basic分别转染鲤上皮瘤EPC细胞,以海肾荧光素酶报告基因质粒pRL‑TK为内参,使用双萤光素酶报告基因检测系统分析不同组间萤火虫荧光素酶活性差异;再分别使用Poly(I:C)、植物凝集素PHA和灭活的变形假单胞菌刺激转染pGL3‑IL‑4/13B质粒的EPC细胞,分析萤火虫荧光素酶活性的变化。本发明提供的大黄鱼 IL‑4/13B 基因的启动子序列,具有启动子基础活性,可启动下游报告基因转录表达,并响应Poly(I:C)、PHA、灭活的变形假单胞菌等外源刺激,为研究大黄鱼 IL‑4/13B 基因的转录调控机制提供优良的实验系统,也可用于高效表达外源基因或应用于转基因大黄鱼的研究,具有理论意义和实践价值。

    一种分泌抗大黄鱼免疫球蛋白T单克隆抗体的杂交瘤细胞株

    公开(公告)号:CN110713540B

    公开(公告)日:2021-07-20

    申请号:CN201911130192.7

    申请日:2019-11-18

    Abstract: 本发明公开了一种分泌抗大黄鱼IgT单克隆抗体的杂交瘤细胞株IgT‑6,保藏号为:CCTCC NO:C2019215。本发明以纯化的重组大黄鱼IgT重链胞外区蛋白抗原四次免疫BALB/C小鼠后;将针对大黄鱼IgT抗体效价最高的小鼠取脾细胞,与SP2/0骨髓细胞进行融合,筛选获得抗大黄鱼IgT单克隆抗体的杂交瘤细胞株IgT‑6。用本发明方法制备获得的单克隆抗体IgT‑6具有特异性强、效价高、稳定性好等特点,可用于大黄鱼疾病的诊断和疫苗使用效果的评价,对大黄鱼疾病的研究及防治具有重要理论和现实意义。

    大黄鱼SOCS3基因启动子序列及其应用

    公开(公告)号:CN120041453A

    公开(公告)日:2025-05-27

    申请号:CN202510206474.X

    申请日:2025-02-25

    Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼SOCS3基因的启动子序列,如SEQ ID NO.1所示。将重组质粒pGL3‑SOCS3转染鲤上皮瘤(EPC)细胞,以海肾荧光素酶为内参,其萤火虫荧光素酶活性最高可达对照组的4.2倍,说明大黄鱼SOCS3启动子启动了下游报告基因的转录表达,具有启动子基础活性。将重组质粒pGL3‑SOCS3和pRL‑TK共转染EPC细胞,再加入poly(I:C),结果显示,Poly(I:C)可显著增强大黄鱼SOCS3启动子的活性,和对照组相比最高上升了1.7倍,说明大黄鱼SOCS3启动子可以响应外源的免疫刺激。本发明为研究大黄鱼 SOCS3 基因的转录调控机制提供优良的实验系统,也可用于高效表达外源基因或应用于转基因大黄鱼的研究,具有理论意义和实践价值。

    大黄鱼白细胞介素22重组蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN120040578A

    公开(公告)日:2025-05-27

    申请号:CN202510206915.6

    申请日:2025-02-25

    Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼IL‑22重组蛋白,所述重组蛋白为大黄鱼IL‑22成熟肽序列,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过PCR扩增编码大黄鱼IL‑22成熟肽第31~190位氨基酸的基因片段,转化大肠杆菌进行异源表达,获得重组蛋白。本发明大黄鱼IL‑22重组蛋白可激活大黄鱼头肾细胞系(LYCK)中转录因子STAT3,此外,还可诱导大黄鱼免疫器官中炎症因子(IL‑1β、IL‑6和IL‑8)的表达,表明大黄鱼IL‑22重组蛋白具有明显的免疫调节作用,显示出其在水产免疫调节剂研发中的良好应用前景。

    一种大黄鱼SOCS1基因启动子及其应用

    公开(公告)号:CN119842711A

    公开(公告)日:2025-04-18

    申请号:CN202510121197.2

    申请日:2025-01-26

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,尤其涉及一种大黄鱼SOCS1基因启动子及其应用。所述大黄鱼SOCS1基因启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。将所述大黄鱼SOCS1基因启动子构建至pGL3.0载体,转染至鲤上皮瘤细胞(EPC)具有较高的基础活性,突变干扰素刺激响应元件(ISRE)基序,大黄鱼SOCS1基因启动子的活性显著下降;在病毒类似物poly(I:C)刺激下,该所述大黄鱼SOCS1基因启动子的活性进一步提高,而突变的启动子活性下降。本发明提供的所述大黄鱼SOCS1基因启动子可用于启动目的基因表达、鱼类抗病毒免疫机制研究及鱼类转基因育种。

    一种靶向抑制大黄鱼SOCS3基因表达的miRNA模拟物及其应用

    公开(公告)号:CN119842709A

    公开(公告)日:2025-04-18

    申请号:CN202510120762.3

    申请日:2025-01-26

    Abstract: 本发明公开了一种抑制大黄鱼SOCS3基因表达的miRNA模拟物及其应用,属于生物技术与基因工程领域。所述miRNA为miR‑181b,其核苷酸序列如SEQ ID NO .2所示。本发明公开了miR‑181b的模拟物,所述模拟物由正义链和反义链合成,其核苷酸序列如SEQ ID NO .3~SEQ ID NO .4所示,在大黄鱼原代淋巴细胞中转染miR‑181b模拟物,可显著降低大黄鱼SOCS3基因的mRNA水平,促进T、B淋巴细胞增殖,从而增强适应性免疫反应。因此,miR‑181b模拟物具有开发大黄鱼免疫调节剂的潜在应用价值。

    一种促进癌细胞铁死亡的鱼源抗菌肽及其应用

    公开(公告)号:CN116637175A

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202310762876.9

    申请日:2023-06-27

    Abstract: 本发明涉及一种可促进癌细胞铁死亡的鱼源抗菌肽Lchamp2‑2及其应用。本申请研究发现,鱼源抗菌肽Lchamp2‑2可提高癌细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,提高细胞内Fe2+和丙二醛(malondinl dehyde,MDA)含量,同时抑制谷胱苷肽过氧化物酶(recombinant glutathione peroxidase 4,GPX4)活性,破坏细胞的氧化还原状态,可造成癌细胞铁死亡。且研究还发现,在铁死亡抑制剂Ferrostatin‑1的联合作用下,Lchamp2‑2引起的癌细胞死亡率明显降低。因此,Lchamp2‑2是一种新型的可通过促进癌细胞铁死亡达到有效抗癌效果的鱼源抗菌肽。

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