公开(公告)号：CN112226378A

公开(公告)日：2021-01-15

申请号：CN202011195277.6

申请日：2020-10-31

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 陈新华 ,  黎球华 ,  许丽冰 ,  母尹楠 ,  何天良

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C07K14/81 ,  A61K38/57 ,  A61P37/04 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提供一种大黄鱼半胱氨酸蛋白酶抑制剂Cystatin重组蛋白及其应用，属于基因工程技术领域。本发明构建了高效表达大黄鱼Cystatin重组蛋白的毕赤酵母工程菌，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2020369。利用毕赤酵母工程菌生产的大黄鱼Cystatin重组蛋白，可抑制木瓜蛋白酶、大黄鱼组织蛋白酶B和S的活性，上调巨噬细胞内炎症相关因子TNFα的表达水平，并诱导巨噬细胞中抗菌活性物质一氧化氮产生，表明大黄鱼Cystatin重组蛋白作为蛋白酶抑制剂和免疫增强剂具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN112226378B

公开(公告)日：2022-07-12

申请号：CN202011195277.6

申请日：2020-10-31

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 陈新华 ,  黎球华 ,  许丽冰 ,  母尹楠 ,  何天良

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C07K14/81 ,  A61K38/57 ,  A61P37/04 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明提供一种大黄鱼半胱氨酸蛋白酶抑制剂Cystatin重组蛋白及其应用，属于基因工程技术领域。本发明构建了高效表达大黄鱼Cystatin重组蛋白的毕赤酵母工程菌，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2020369。利用毕赤酵母工程菌生产的大黄鱼Cystatin重组蛋白，可抑制木瓜蛋白酶、大黄鱼组织蛋白酶B和S的活性，上调巨噬细胞内炎症相关因子TNFα的表达水平，并诱导巨噬细胞中抗菌活性物质一氧化氮产生，表明大黄鱼Cystatin重组蛋白作为蛋白酶抑制剂和免疫增强剂具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN112779258A

公开(公告)日：2021-05-11

申请号：CN202110227210.4

申请日：2021-03-02

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 陈新华 ,  黎球华 ,  邵光明 ,  丁阳阳 ,  母尹楠 ,  许丽冰

IPC: C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N15/89

Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼CRISPR/Cas9基因编辑方法，所述方法包括以下步骤：利用体外转录合成Cas9 mRNA和靶基因sgRNA，将它们与酚红混合，Cas9 mRNA和靶基因sgRNA的终浓度分别为1000 ng/μL和120 ng/μL，再利用显微注射的方式，将混合物导入卵膜变硬之前的大黄鱼受精卵中；孵化48 h后，检测并获得相应的基因突变体。本发明首次成功建立了大黄鱼基因编辑的方法，不仅可用于大黄鱼基因功能的研究，还为大黄鱼遗传改良育种开辟新的途径。