大黄鱼白细胞介素4/13B基因启动子序列及其应用

    公开(公告)号:CN120040577A

    公开(公告)日:2025-05-27

    申请号:CN202510206741.3

    申请日:2025-02-25

    Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼白细胞介素4/13B(IL‑4/13B)基因的启动子,所述启动子序列如SEQ ID NO.1所示。将重组质粒pGL3‑IL‑4/13B和对照质粒pGL3‑Basic分别转染鲤上皮瘤EPC细胞,以海肾荧光素酶报告基因质粒pRL‑TK为内参,使用双萤光素酶报告基因检测系统分析不同组间萤火虫荧光素酶活性差异;再分别使用Poly(I:C)、植物凝集素PHA和灭活的变形假单胞菌刺激转染pGL3‑IL‑4/13B质粒的EPC细胞,分析萤火虫荧光素酶活性的变化。本发明提供的大黄鱼 IL‑4/13B 基因的启动子序列,具有启动子基础活性,可启动下游报告基因转录表达,并响应Poly(I:C)、PHA、灭活的变形假单胞菌等外源刺激,为研究大黄鱼 IL‑4/13B 基因的转录调控机制提供优良的实验系统,也可用于高效表达外源基因或应用于转基因大黄鱼的研究,具有理论意义和实践价值。

    大黄鱼SOCS3基因启动子序列及其应用

    公开(公告)号:CN120041453A

    公开(公告)日:2025-05-27

    申请号:CN202510206474.X

    申请日:2025-02-25

    Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼SOCS3基因的启动子序列,如SEQ ID NO.1所示。将重组质粒pGL3‑SOCS3转染鲤上皮瘤(EPC)细胞,以海肾荧光素酶为内参,其萤火虫荧光素酶活性最高可达对照组的4.2倍,说明大黄鱼SOCS3启动子启动了下游报告基因的转录表达,具有启动子基础活性。将重组质粒pGL3‑SOCS3和pRL‑TK共转染EPC细胞,再加入poly(I:C),结果显示,Poly(I:C)可显著增强大黄鱼SOCS3启动子的活性,和对照组相比最高上升了1.7倍,说明大黄鱼SOCS3启动子可以响应外源的免疫刺激。本发明为研究大黄鱼 SOCS3 基因的转录调控机制提供优良的实验系统,也可用于高效表达外源基因或应用于转基因大黄鱼的研究,具有理论意义和实践价值。

    大黄鱼白细胞介素22重组蛋白及其应用

    公开(公告)号:CN120040578A

    公开(公告)日:2025-05-27

    申请号:CN202510206915.6

    申请日:2025-02-25

    Abstract: 本发明公开了一种大黄鱼IL‑22重组蛋白,所述重组蛋白为大黄鱼IL‑22成熟肽序列,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过PCR扩增编码大黄鱼IL‑22成熟肽第31~190位氨基酸的基因片段,转化大肠杆菌进行异源表达,获得重组蛋白。本发明大黄鱼IL‑22重组蛋白可激活大黄鱼头肾细胞系(LYCK)中转录因子STAT3,此外,还可诱导大黄鱼免疫器官中炎症因子(IL‑1β、IL‑6和IL‑8)的表达,表明大黄鱼IL‑22重组蛋白具有明显的免疫调节作用,显示出其在水产免疫调节剂研发中的良好应用前景。

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