公开(公告)号：CN113929753A

公开(公告)日：2022-01-14

申请号：CN202111207794.5

申请日：2021-10-18

Applicant: 扬州大学 ,  国药集团扬州威克生物工程有限公司

Inventor： 叶建强 ,  隆玉兰 ,  谢松桦 ,  张建军 ,  张伟 ,  谢泉 ,  万志敏 ,  李拓凡 ,  王伟康

IPC: C07K14/075 ,  C12N15/866 ,  C12N5/10 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明公开了一种真核重组蛋白在试剂盒中的应用、试剂盒及其应用。将真核重组Fiber‑1蛋白和/或真核重组Fiber‑2蛋白应用在制备用于检测Fiber蛋白抗体的试剂盒中，所述真核重组Fiber‑1蛋白和/或真核重组Fiber‑2蛋白由Sf9昆虫表达系统表达获得。本发明将由Sf9昆虫表达系统表达获得的真核重组Fiber‑1蛋白和/或真核重组Fiber‑2蛋白应用在制备用于检测Fiber蛋白抗体的试剂盒中，具有良好的FAdV‑4特异性、敏感性，能够特异地、有效地检测出感染FAdV‑4或免疫FAdV‑4疫苗的鸡群中抗FAdV‑4抗体，在FAdV‑4病毒流行病学调查中具有良好的应用价值，可用于FAdV‑4感染及免疫状况流行病学调查。

公开(公告)号：CN113917139A

公开(公告)日：2022-01-11

申请号：CN202111207886.3

申请日：2021-10-18

Applicant: 扬州大学 ,  国药集团扬州威克生物工程有限公司

Inventor： 郭艺文 ,  叶建强 ,  谢松桦 ,  张建军 ,  徐贞琦 ,  张伟 ,  谢泉 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/58 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明公开了一种基于重组荧光病毒的血清4型禽腺病毒中和抗体的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、将待检血清稀释后与10000～20000TCID50/50μL的荧光病毒FAdV‑4‑EGFP混合，恒温孵育1～2h；S2、将孵育好的病毒与血清的混合物接种于LMH细胞中并培养24～36h，然后在荧光显微镜下观察荧光病毒被中和情况。本发明以前期拯救的表达绿色荧光蛋白的重组病毒FAdV‑4‑EGFP为基础，该毒株为高度致弱疫苗候选株，高剂量肌注感染鸡也不发病，与亲本株生长特性相近、生物安全性高、不存在散播强毒的隐患；相比于传统的中和试验，本发明提供的方案最短仅需要感染重组病毒24h后即可观察结果，可实现中和试验结果提前2‑3天，大幅缩短了检测所需时间。

公开(公告)号：CN112710832A

公开(公告)日：2021-04-27

申请号：CN202011533179.9

申请日：2020-12-22

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  谢松桦 ,  王萍 ,  王伟康 ,  谢泉 ,  万志敏 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  李拓凡

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/558 ,  G01N33/543

Abstract: 本发明提供了一种基于Fiber2蛋白的检测血清4型禽腺病毒的试纸条，涉及禽类疾病诊断技术领域，包括底板和依次搭建于底板上的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸收垫，所述金标垫上喷绘有金标抗体，所述硝酸纤维素膜上喷绘有检测线和质控线；所述金标抗体为杂交瘤细胞株5A3制备小鼠腹水后经Protein G柱进行IgG纯化后得到的金标的特异性识别血清4型禽腺病毒Fiber2蛋白的单克隆抗体5A3；所述检测线上喷绘有检测抗体，所述检测抗体为杂交瘤细胞株1D7制备小鼠腹水后经Protein G柱进行IgG纯化后得到的特异性识别血清4型禽腺病毒Fiber2蛋白的单克隆抗体1D7。采用本发明提供的试纸条能够准确地检测禽类是否感染FAdV‑4，准确率达到100％。