公开(公告)号：CN101818127A

公开(公告)日：2010-09-01

申请号：CN201010138769.1

申请日：2010-03-31

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 宋锐 ,  曹鸿国 ,  陶勇 ,  章孝荣 ,  张运海 ,  李运生 ,  殷慧群 ,  刘亚 ,  方富贵 ,  刘旭光 ,  任春环 ,  张子军 ,  丁建平

IPC: C12N5/076

Abstract: 本发明公开了一种小鼠精原干细胞分离培养方法，利用中性蛋白酶消化性质温和、高效、对细胞刺激性小的特点分离小鼠精原干细胞，将小鼠精原干细胞的富集步骤与传代有机结合，使用中性蛋白消化贴壁的小鼠精原干细胞集落，达到较好的富集效果。本发明具有分离培养操作简单，时间短，效果好，且成本低的特点。

公开(公告)号：CN101955910A

公开(公告)日：2011-01-26

申请号：CN201010138753.0

申请日：2010-03-31

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 张运海 ,  曹鸿国 ,  章孝荣 ,  李运生 ,  殷慧群 ,  孙雪萍 ,  薛奕杰 ,  张卫琴 ,  黄伟玲 ,  陈涛 ,  宋锐 ,  陶勇 ,  刘亚 ,  方富贵 ,  刘旭光 ,  任春环 ,  张子军 ,  殷宗俊 ,  丁建平

IPC: C12N5/073 ,  C12N15/62 ,  C12N15/867 ,  C12N7/01

Abstract: 本发明公开了一种猪诱导性多能干细胞诱导方法，利用外源限定因子与增强型绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein，EGFP)报告基因构建融合蛋白慢病毒表达载体用于猪诱导性多能干细胞的诱导，对表达外源限定因子融合蛋白的猪胎儿成纤维细胞进行培养传代，逐步分离培养出集落边缘界限清晰的细胞克隆，细胞集落生长状态稳定，核型正常，碱性磷酸酶检测为阳性，免疫细胞化学检测显示Oct4、Nanog、SSEA-1蛋白表达为阳性，体内能够分化形成含有三个胚层的畸胎瘤，分离培养的细胞克隆得到猪诱导性多能干细胞。

公开(公告)号：CN101818127B

公开(公告)日：2011-12-28

申请号：CN201010138769.1

申请日：2010-03-31

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 宋锐 ,  曹鸿国 ,  陶勇 ,  章孝荣 ,  张运海 ,  李运生 ,  殷慧群 ,  刘亚 ,  方富贵 ,  刘旭光 ,  任春环 ,  张子军 ,  丁建平

IPC: C12N5/076

Abstract: 本发明公开了一种小鼠精原干细胞分离培养方法，利用中性蛋白酶消化性质温和、高效、对细胞刺激性小的特点分离小鼠精原干细胞，将小鼠精原干细胞的富集步骤与传代有机结合，使用中性蛋白消化贴壁的小鼠精原干细胞集落，达到较好的富集效果。本发明具有分离培养操作简单，时间短，效果好，且成本低的特点。