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公开(公告)号:CN111663006A
公开(公告)日:2020-09-15
申请号:CN201910670632.1
申请日:2019-07-24
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测猪细小病毒7型的环介导等温扩增方法的引物组,包括一对外引物、一对内引物和一对环引物,其中所述一对外引物包括F3和B3;所述一对内引物包括FIP和BIP;所述一对环引物LF和LB;本发明进一步公开了一种包含上述引物组的试剂盒,该试剂盒包括所述引物组、等温扩增反应缓冲液、Bst 2.0WarmStart DNA聚合酶、dNTP Mix、MgSO4、超纯水和荧光显色检测试剂。本发明提供一种猪细小病毒7型环介导等温扩增检测引物组及其试剂盒,本发明污染小,操作简便、快速、可用肉眼直接观察结果。具有特异性强、灵敏度高等优点,无需昂贵仪器设备,尤其便于基层使用。
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公开(公告)号:CN111663005A
公开(公告)日:2020-09-15
申请号:CN201910670449.1
申请日:2019-07-24
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851
Abstract: 本发明公开了一种用于检测猪细小病毒6型的荧光定量PCR方法,包括如下步骤:S1、制备特异性引物;根据GenBank PPV6的Cap基因序列,登录号:KU563733.1,应用Primer Premier5.0软件设计一对特异性引物如下:F:5’-GAAAAAGAACAGGCGCAGAC-3’,R:5’-GGGATTATGAAGCCAGACG-3’;S2、重组质粒标准品制备并提取DNA;取适量采集的淋巴结、脾、肺等组织加入含青霉素和链霉素各1000IU/ml的PBS匀浆用研钵充分碾磨;反复冻融3次,6000r/min离心10min,取上清液,置于-80℃冰箱待用;将制备好的样品按照DNA/RNA提取试剂盒使用说明书提取DNA;本发明提供一种能够快速、简便、灵敏地检测猪细小病毒6型的方法;本发明根据Cap基因设计特异性引物,建立了一种基于SYBR Green I的real-time荧光定量PCR检测方法。
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公开(公告)号:CN108902538A
公开(公告)日:2018-11-30
申请号:CN201811081897.X
申请日:2018-09-17
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明属于家禽养殖技术,具体涉及一种抗肉鸡应激的富硒中草药添加剂、制备方法及使用方法,本发明的富硒中草药添加剂由中草药提取物和磨成粉末的酵母硒片按照1000:1-1.5的质量比例混合而成;所述中草药提取物由如下重量份的中药原料制备而成:构树叶20-35份、青蒿10-20份、柴胡10-15份、小地松12-15份、银杏叶15-35份、刺五加5-8份、霍香6-12份、山楂8-15份。本发明的抗肉鸡应激的富硒中草药添加剂能够有效降低应激的不良影响,提高调节的免疫功能,改善肉鸡的消化吸收功能和生长性能,发挥了营养物质和药物的双重作用。
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公开(公告)号:CN107805628A
公开(公告)日:2018-03-16
申请号:CN201711015432.X
申请日:2017-10-26
Applicant: 安徽农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867
CPC classification number: C07K14/70503 , C12N15/86 , C12N2740/15043
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达小反刍兽疫病毒受体Nectin-4的细胞系及其构建方法,本发明采用合成的Nectin-4基因,利用慢病毒载体系统,构建重组质粒pLOV-eGFP-Nectin-4。将该重组质粒与pSPAX2和pMD2.G质粒共转染293T细胞,获得逆转录病毒样颗粒。将含有逆转录病毒样颗粒的细胞培养上清液感染MDBK细胞,利用嘌呤霉素筛选、纯化,获得了稳定表达Nectin-4蛋白的MDBK细胞,将其命名为MDBK-Nectin-4。该细胞系的建立为深入研究PPRV与受体Nectin-4的相互作用,以及临床快速分离PPRV提供了实验材料。
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