公开(公告)号：CN111304157B

公开(公告)日：2023-05-12

申请号：CN202010181822.X

申请日：2020-03-16

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张学明 ,  姜禹 ,  李子义 ,  朱文倩 ,  蔡宁宁 ,  汪正铸 ,  安星兰 ,  杨蕊

IPC: C12N5/074

Abstract: 一种获得牛初始态诱导多能干细胞的方法，属于干细胞培养领域，将牛诱导多能干细胞在含有5％二氧化碳，温度37℃条件下培养3～4天，弃掉诱导培养基，用PBS缓冲液洗净，分散酶37℃下孵育，观察克隆边缘与饲养层细胞分离后，吸取消化液，加入诱导培养基，从饲养层细胞上刮取牛诱导多能干细胞；用0.05％的胰酶在37℃的条件下消化，加入1mL转化培养基重悬至1.5mL离心管中，1000rpm离心5min，接种至新鲜的饲养层上，并更换转化培养基进行培养，直至出现圆拱形，类似小鼠胚胎干细胞ESCs样的克隆即为牛初始态诱导多能干细胞。本发明解决了现有牛诱导多能干细胞的多能性不完全等问题。

公开(公告)号：CN111304157A

公开(公告)日：2020-06-19

申请号：CN202010181822.X

申请日：2020-03-16

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张学明 ,  姜禹 ,  李子义 ,  朱文倩 ,  蔡宁宁 ,  汪正铸 ,  安星兰 ,  杨蕊

IPC: C12N5/074

Abstract: 一种获得牛初始态诱导多能干细胞的方法，属于干细胞培养领域，将牛诱导多能干细胞在含有5％二氧化碳，温度37℃条件下培养3～4天，弃掉诱导培养基，用PBS缓冲液洗净，分散酶37℃下孵育，观察克隆边缘与饲养层细胞分离后，吸取消化液，加入诱导培养基，从饲养层细胞上刮取牛诱导多能干细胞；用0.05％的胰酶在37℃的条件下消化，加入1mL转化培养基重悬至1.5mL离心管中，1000rpm离心5min，接种至新鲜的饲养层上，并更换转化培养基进行培养，直至出现圆拱形，类似小鼠胚胎干细胞ESCs样的克隆即为牛初始态诱导多能干细胞。本发明解决了现有牛诱导多能干细胞的多能性不完全等问题。

公开(公告)号：CN112226404B

公开(公告)日：2023-09-05

申请号：CN202010878659.2

申请日：2020-08-27

Applicant: 吉林大学第一医院

Inventor： 李子义 ,  代相鹏 ,  翟岩辉 ,  孔祥杰 ,  张胜 ,  安星兰 ,  李奇 ,  张楠

IPC: C12N5/073

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及培养基组合物及促进动物胚胎体外发育的培养方法。本发明的优点在于能够显著提高猪体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer，SCNT)胚胎的体外发育效率。在正常的PZM‑3的胚胎培养液中的SCNT胚胎囊胚率是18％～20％，采用换液的方法可以显著提高猪SCNT的囊胚率到45.7％，同使用正常胚胎培养液PZM‑3的囊胚率相比，囊胚率提高了25.7％。同时，此方法还操作方便，只要在SCNT胚胎激活24～48h后从PZM‑3(‑)的培养基中换液到PZM‑3‑Glutamax中继续培养即可，操作简单方便，适宜后续应用。

公开(公告)号：CN109706114A

公开(公告)日：2019-05-03

申请号：CN201910130261.8

申请日：2019-02-21

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张学明 ,  姜禹 ,  李子义 ,  安星兰 ,  蔡宁宁 ,  张胜 ,  赵欣欣 ,  朱文倩 ,  唐博

IPC: C12N5/074 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明公开了一种牛睾丸支持细胞诱导多能干细胞的方法，属于干细胞领域，包括如下步骤：步骤1、分离牛睾丸支持细胞；步骤2、培养牛睾丸支持细胞；步骤3、将编码Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4四种转录因子转入牛睾丸支持细胞中，产生多能性干细胞。与现有技术相比，本发明充分利用了牛睾丸支持细胞差异贴壁的特点，培养出了形态均一的牛睾丸支持细胞。由于牛睾丸支持细胞来自于肉用犊牛具有较高的重编程能力。以牛睾丸支持细胞代替牛成体成纤维细胞、间充质干细胞等作为来源细胞制备诱导多能干细胞，不仅细胞获取简便而且重编程率高。

公开(公告)号：CN112226404A

公开(公告)日：2021-01-15

申请号：CN202010878659.2

申请日：2020-08-27

Applicant: 吉林大学第一医院

Inventor： 李子义 ,  代相鹏 ,  翟岩辉 ,  孔祥杰 ,  张胜 ,  安星兰 ,  李奇 ,  张楠

IPC: C12N5/073

Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及培养基组合物及促进动物胚胎体外发育的培养方法。本发明的优点在于能够显著提高猪体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer，SCNT)胚胎的体外发育效率。在正常的PZM‑3的胚胎培养液中的SCNT胚胎囊胚率是18％～20％，采用换液的方法可以显著提高猪SCNT的囊胚率到45.7％，同使用正常胚胎培养液PZM‑3的囊胚率相比，囊胚率提高了25.7％。同时，此方法还操作方便，只要在SCNT胚胎激活24～48h后从PZM‑3(‑)的培养基中换液到PZM‑3‑Glutamax中继续培养即可，操作简单方便，适宜后续应用。