公开(公告)号：CN119199128A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411207221.6

申请日：2024-08-30

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 沈兴 ,  黄颖茵 ,  郑佳乐 ,  雷红涛 ,  赵岗 ,  李向梅 ,  徐振林

IPC: G01N33/577 ,  G01N33/533 ,  G01N33/558 ,  G01N33/53 ,  G01N33/531 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/682 ,  C12Q1/6804 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6876 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明具体涉及了一种CRISPR‑免疫联合小分子检测探针制备及其相关检测方法和用途。探针制备主要采用一种化学生物偶联方法，用双功能交联剂4‑（N‑马来酰亚胺甲基）环己烷‑1‑羧酸磺酸基琥珀酰亚胺酯钠盐（Sulfo‑SMCC）和N‑琥珀酰亚胺基‑S‑乙酰硫基乙酸酯（SATA），将5’端修饰‑NH2的dsDNA和单克隆抗体共价偶联制备成dsDNA‑抗体探针。其次，本检测方法以dsDNA‑抗体探针作为桥梁将免疫系统和CRISPR/Cas12a系统结合，利用抗体对小分子的特异性识别能力，并借助RPA核酸扩增进行信号放大及CRISPR/Cas12a的顺式切割活性和/或反式单链DNA切割活性产生荧光信号，实现免疫反应信号向高强度荧光信号的转变，建立了CRISPR‑免疫联合小分子检测体系。所述检测方法操作简单、特异性强、灵敏度极高且信号稳定等优点。

公开(公告)号：CN113969320B

公开(公告)日：2023-07-25

申请号：CN202111130360.X

申请日：2021-09-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  赵岗 ,  沈兴 ,  王锦

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于鉴别猪源性成分的RPA引物及检测体系和方法。本发明所述RPA引物和crRNA探针的特异性强，基于二者所构建的鉴别方法具有双重特异性，不会对其他物种进行非特异性识别，检测结果准确。同时，本发明所述猪源性成分鉴别方法的操作简便，所需时间短，结果准确，适用于一线检测人员对猪源性成分的现场快速检测。此外，本发明所述检测方法结合CTAB法提取样品核酸，对牛肉制品中掺杂的猪源性成分检测限可达0.001％(w/w)，适用于多种肉类加工产品中猪源性成分鉴别检测，适用范围广、可靠性高。

公开(公告)号：CN113969320A

公开(公告)日：2022-01-25

申请号：CN202111130360.X

申请日：2021-09-26

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  赵岗 ,  沈兴 ,  王锦

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于鉴别猪源性成分的RPA引物及检测体系和方法。本发明所述RPA引物和crRNA探针的特异性强，基于二者所构建的鉴别方法具有双重特异性，不会对其他物种进行非特异性识别，检测结果准确。同时，本发明所述猪源性成分鉴别方法的操作简便，所需时间短，结果准确，适用于一线检测人员对猪源性成分的现场快速检测。此外，本发明所述检测方法结合CTAB法提取样品核酸，对牛肉制品中掺杂的猪源性成分检测限可达0.001％(w/w)，适用于多种肉类加工产品中猪源性成分鉴别检测，适用范围广、可靠性高。

公开(公告)号：CN112094919A

公开(公告)日：2020-12-18

申请号：CN202010997172.6

申请日：2020-09-21

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 雷红涛 ,  赵岗 ,  沈兴 ,  韦晓群 ,  钟鹏 ,  徐振林 ,  孙远明

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种快速鉴别牛猪鸡鸭动物源成分的多重PCR引物组及其方法和试剂盒。所述多重PCR引物组包括4对引物：牛源性成分检测引物对B‑F/R、猪源性成分检测引物对P‑F/R、鸡源性成分检测引物对C‑F/R和鸭源性成分检测引物对D‑F/R，其引物序列依次如SEQ ID NO:1～8所示。所述引物对仅对各自物种的目标片段进行特异性扩增，不会对其他物种进行非特异性扩增，检测时间短，其对牛肉制品中掺杂的猪、鸡、鸭源性成分检测限可达0.1％(w/w)，适用于多种肉类加工产品中动物源成分鉴别检验，适用范围广、可靠性高。