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公开(公告)号:CN106496323B
公开(公告)日:2020-02-04
申请号:CN201610876473.7
申请日:2016-10-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/795 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K1/107 , C07K16/14 , C07K16/06 , G01N33/53
Abstract: 本发明公开了一种簇选择性赭曲霉毒素人工抗原及其广谱性多克隆抗体的制备方法。将赭曲霉毒素B经活泼酯法与载体蛋白偶联,透析后获得赭曲霉毒素人工抗原。然后将所述人工抗原乳化后免疫兔,分离纯化兔血清后得到赭曲霉毒素的广谱性多克隆抗体。该多克隆抗体对赭曲霉毒素A、B、C的识别性能均良好,对三者的IC50分别为0.85 ng/mL,3.53 ng/mL和0.29 ng/mL。本发明制备得到了有效的赭曲霉毒素B人工抗原,且得到的赭曲霉毒素多抗灵敏度高,广谱识别性良好,为建立赭曲霉毒素的广谱性免疫检测方法提供了核心原材料,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN106565737B
公开(公告)日:2018-11-27
申请号:CN201610875386.X
申请日:2016-10-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D493/14 , C07K14/765 , C07K14/795 , C07K16/02 , C07K16/14 , G01N33/53
Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉毒素B1半抗原、人工抗原及其高灵敏度、高特异性卵黄抗体的制备方法。本发明首先将黄曲霉毒素B1分子上双呋喃环中的碳碳双键进行加成反应引入游离羧基形成黄曲霉毒素B1半抗原,其结构式如式(I)所示:式(I);再将该半抗原与载体蛋白偶联得到黄曲霉毒素B1人工抗原;由该人工抗原乳化后免疫鸡,得到黄曲霉毒素B1卵黄抗体。所述抗体对黄曲霉毒素B1的半抑制浓度(IC50)为4.23ng/mL,定量检测范围为0.29~61.83ng/mL,检测限为0.06ng/mL,且该抗体对AFB2、AFG1和AFG2的交叉反应率均低于1%。本发明的抗体同时具备高灵敏、特异性的特点,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN107167585A
公开(公告)日:2017-09-15
申请号:CN201710224738.X
申请日:2017-04-07
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/531 , G01N33/559 , G01N33/543
CPC classification number: G01N33/531 , G01N33/54346 , G01N33/559
Abstract: 本发明公开了一种新型小分子结构及其在检测蓝绿藻肝毒素方面的应用。所述新型小分子结构的结构式如式(I)所示:本发明首先获得了一种特殊的新型小分子结构作为免疫原,将该小分子及微囊藻毒素MC‑LR分别与载体蛋白偶联制得人工抗原,利用将该小分子人工抗原制备多克隆抗体,制备抗体标记的纳米金颗粒,将MC‑LR人工抗原包被于硝酸纤维膜上作为检测带,羊抗兔二抗作为控制带,依据免疫竞争法原理建立得快速检测蓝绿藻肝毒素的广谱性免疫层析试纸条。该免疫层析试纸条灵敏性度高、广谱性强,可半定量检测蓝绿藻肝毒素,适用于多种微囊藻毒素类似物和节球藻毒素,且具有快速、直观、易于操作等优势。
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公开(公告)号:CN106565737A
公开(公告)日:2017-04-19
申请号:CN201610875386.X
申请日:2016-10-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D493/14 , C07K14/765 , C07K14/795 , C07K16/02 , C07K16/14 , G01N33/53
CPC classification number: C07D493/14 , C07K14/765 , C07K14/795 , C07K16/02 , C07K16/14 , G01N33/53
Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉毒素B1半抗原、人工抗原及其高灵敏度、高特异性卵黄抗体的制备方法。本发明首先将黄曲霉毒素B1分子上双呋喃环中的碳碳双键进行加成反应引入游离羧基形成黄曲霉毒素B1半抗原,其结构式如式(I)所示:式(Ⅰ);再将该半抗原与载体蛋白偶联得到黄曲霉毒素B1人工抗原;由该人工抗原乳化后免疫鸡,得到黄曲霉毒素B1卵黄抗体。所述抗体对黄曲霉毒素B1的半抑制浓度(IC50)为4.23ng/mL,定量检测范围为0.29~61.83ng/mL,检测限为0.06ng/mL,且该抗体对AFB2、AFG1和AFG2的交叉反应率均低于1%。本发明的抗体同时具备高灵敏、特异性的特点,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN107167585B
公开(公告)日:2018-09-18
申请号:CN201710224738.X
申请日:2017-04-07
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/531 , G01N33/559 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种新型小分子结构及其在检测蓝绿藻肝毒素方面的应用。所述新型小分子结构的结构式如式(I)所示:本发明首先获得了一种特殊的新型小分子结构作为免疫原,将该小分子及微囊藻毒素MC‑LR分别与载体蛋白偶联制得人工抗原,利用将该小分子人工抗原制备多克隆抗体,制备抗体标记的纳米金颗粒,将MC‑LR人工抗原包被于硝酸纤维膜上作为检测带,羊抗兔二抗作为控制带,依据免疫竞争法原理建立得快速检测蓝绿藻肝毒素的广谱性免疫层析试纸条。该免疫层析试纸条灵敏性度高、广谱性强,可半定量检测蓝绿藻肝毒素,适用于多种微囊藻毒素类似物和节球藻毒素,且具有快速、直观、易于操作等优势。
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公开(公告)号:CN106496323A
公开(公告)日:2017-03-15
申请号:CN201610876473.7
申请日:2016-10-08
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/795 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K1/107 , C07K16/14 , C07K16/06 , G01N33/53
Abstract: 本发明公开了一种簇选择性赭曲霉毒素人工抗原及其广谱性多克隆抗体的制备方法。将赭曲霉毒素B经活泼酯法与载体蛋白偶联,透析后获得赭曲霉毒素人工抗原。然后将所述人工抗原乳化后免疫兔,分离纯化兔血清后得到赭曲霉毒素的广谱性多克隆抗体。该多克隆抗体对赭曲霉毒素A、B、C的识别性能均良好,对三者的IC50分别为0.85 ng/mL,3.53 ng/mL和0.29 ng/mL。本发明制备得到了有效的赭曲霉毒素B人工抗原,且得到的赭曲霉毒素多抗灵敏度高,广谱识别性良好,为建立赭曲霉毒素的广谱性免疫检测方法提供了核心原材料,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN105669628A
公开(公告)日:2016-06-15
申请号:CN201610021937.6
申请日:2016-01-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07D311/36 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , G01N33/53
CPC classification number: C07D311/36 , C07K14/765 , C07K14/77 , C07K16/44 , C07K19/00 , G01N33/5308 , G01N2400/00
Abstract: 本发明公开了一种黄豆苷元半抗原和完全抗原及其制备方法和应用。所述黄豆苷元半抗原的分子结构如下式(Ⅰ)或式(Ⅱ)所示:本发明以黄豆苷元为原料,经过2步化学反应分别得到黄豆苷元7-衍生物和4`-衍生物半抗原,成功地合成了黄豆苷元半抗原,合成方法安全有效,产物纯度高。在此基础上进一步采用活泼酯法制备适合于动物免疫的黄豆苷元完全抗原,以此抗原免疫Balb/c小鼠,效价可达1:32000,抑制率可达94.9%,为建立黄豆苷元的免疫分析方法提供了核心原材料和有利条件,具有广阔的实际应用前景。
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