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公开(公告)号：CN119708178A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202510016776.0
申请日：2025-01-06
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/32 , C05F11/08 , C05G3/80 , C12N15/31 , G01N33/68 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N15/82 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于蛋白质技术领域，公开了一个突变体NhaM‑T11D，包括其基因、氨基酸、蛋白功能及Na+(Li+,K+)/H+逆向转运蛋白活性检测，本发明明确了NhaM蛋白高度保守的一个氨基酸位点：11位苏氨酸(T)突变成天冬氨酸(D)的一个突变体NhaM‑T11D的重要功能，证明了突变体NhaM‑T11D蛋白具有0.2M NaCl和碱性pH值抗性功能。本发明还指出，突变体NhaM‑T11D的基因、蛋白对盐碱地土壤改良具有重要意义，可用于耐盐碱基因改造，为构建高效耐盐碱工程菌株、开发微生物肥料和提高植物耐盐碱性的转基因植物领域研究提供一种新的有效选择。
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公开(公告)号：CN101864436A
公开(公告)日：2010-10-20
申请号：CN201010183169.7
申请日：2010-05-26
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 同位素13C标记的4-羟基脯氨酸的生物合成方法，它涉及4-羟基脯氨酸的合成方法。它解决了现有制备4-羟基脯氨酸的方法不适用于合成13C标记的4-羟基脯氨酸的问题。方法：一、对指孢囊菌中编码L-脯氨酸的4-羟基化酶的基因phy-1的原始序列进行密码子优化，获得优化的phy-1基因；二、优化的phy-1基因与pET19分别进行双酶切，构建原核表达载体，转入大肠杆菌中进行蛋白高效表达及纯化；三、纯化后的L-脯氨酸的4-羟基化酶进行酶反应，纯化后即完成。本发明实现了13C标记的4-羟基脯氨酸的制备，纯化过程简单，成本低，并且所得13C标记的4-羟基脯氨酸的纯度达99.99％，回收产率为75.34％。
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公开(公告)号：CN110357948B
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN201910048712.3
申请日：2019-01-18
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明属于蛋白质技术领域，公开了一种MdrP突变体的基因、氨基酸、蛋白功能及药物积累活性检测，在含有阳离子(Na+、K+)的Buffer中加入CCCP移除跨膜H+梯度只保留跨膜阳离子梯度驱动蛋白转运，或在buffer中分别加入Monensin或Nigericin移除阳离子梯度只保留跨膜H+梯度来驱动蛋白转运，实现不同驱动作用之间的相对定量对比。本发明明确了MdrP蛋白高度保守氨基酸位点的重要功能，证明了MdrP蛋白是一个H+和Na+驱动的药物外排蛋白；N146是H+结合位点，D223、Q242是Na+、H+竞争结合位点，或可以成为对MFS家族抗药蛋白理解的有利理论支撑。
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公开(公告)号：CN107630023B
公开(公告)日：2020-03-27
申请号：CN201710731820.1
申请日：2017-08-23
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种肇东盐单胞菌耐盐碱基因duf2062及其鉴定方法，肇东盐单胞菌耐盐碱基因duf2062序列全长552bp，含一个完整开放阅读框ORF，ORF的核苷酸序列为SEQ ID NO.1；鉴定方法包括：通过基因文库和功能互补相结合的方法，以0.2M NaCl的氨苄抗性固体培养基作为筛选工具，得到含有耐盐碱基因的片段等等。本发明所提出的Hz_duf2062基因对盐碱地土壤改良具有重要意义，可用于构建高效的耐盐碱工程菌、开发微生物肥料和提高植物耐盐碱性的转基因领域的应用。
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公开(公告)号：CN109055397A
公开(公告)日：2018-12-21
申请号：CN201810765939.5
申请日：2018-07-12
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N15/31 , C07K14/32 , C12N15/70 , C12N15/90 , C12N1/21 , C05F11/08 , C12N15/82 , A01H5/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于分子生物学和基因工程技术领域，公开了一种喜盐芽胞杆菌新型钠/氢逆向转运蛋白基因sdmlT及鉴定，喜盐芽胞杆菌钠/氢逆向转运蛋白基因sdmlT是完整开放阅读框ORF，ORF的核苷酸序列如SEQ ID NO.1；鉴定方法包括首先得到含有耐盐碱基因的片段；构建含有sdmlT基因的原核表达载体；对该基因的生理功能以及其编码的蛋白功能进行了鉴定。本发明从安达喜盐芽孢杆菌中获取的sdmlT基因可使大肠杆菌(Escherichia coli)盐敏感突变株KNabc的耐盐碱能力有了显著的提高；本发明所提出的sdmlT基因丰富了微生物耐盐碱基因资源，可用于构建高效的耐盐碱工程菌或抗逆型作物等，特别是耐盐或耐碱胁迫的植株具有重大价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119708177A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202510016328.0
申请日：2025-01-06
Applicant: 东北农业大学
IPC: C07K14/32 , C05F11/08 , C05G3/80 , C12N15/31 , G01N33/68 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12N15/82 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于蛋白质技术领域，公开了一个突变体NhaM‑S67T，包括其基因、氨基酸、蛋白功能及Na+(Li+,K+)/H+逆向转运蛋白活性检测，本发明明确了NhaM蛋白高度保守的一个氨基酸位点：67位丝氨酸(S)突变成苏氨酸(T)的一个突变体NhaM‑S67T重要功能，证明了突变体NhaM‑S67T蛋白具有0.2MNaCl和碱性pH值抗性功能。本发明还指出，突变体NhaM‑S67T的基因、蛋白对盐碱地土壤改良具有重要意义，可用于耐盐碱基因改造、构建高效耐盐碱工程菌株、开发微生物肥料和提高植物耐盐碱性的转基因植物领域的研究。
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公开(公告)号：CN107641629A
公开(公告)日：2018-01-30
申请号：CN201710731793.8
申请日：2017-08-23
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学和基因工程技术领域，公开了一种安达喜盐芽孢杆菌耐盐碱基因rdd及其鉴定方法，一安达喜盐芽孢杆菌耐盐碱基因rdd，含一个534bp的完整开放阅读框ORF，ORF的核苷酸序列为SEQ ID NO.1；鉴定方法包括：筛选技含有耐盐碱相关的基因片段，构建含有rdd基因的原核表达载体；通过化转异源宿主Escherichia coli KNabc，将基因rdd导入KNabc宿主中，对基因rdd生理功能及编码的蛋白活性进行鉴定。本发明所提出的rdd基因对盐碱地土壤改良具有重要意义，可用于构建高的效耐盐碱工程菌、开发微生物肥料和提高植物耐盐碱性的转基因领域的研究。
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公开(公告)号：CN101831499A
公开(公告)日：2010-09-15
申请号：CN201010181319.0
申请日：2010-05-24
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种检测粪便中产甲酸草酸杆菌定殖数量的实时PCR方法，它涉及一种定殖数量检测的方法。本发明解决了现有检测产甲酸草酸杆菌数量的方法存在的费时费力，结果误差较大、获得结果的周期长的问题。方法：一、确定检测的粪便中产甲酸草酸杆菌是第一亚组还是第二亚组；二、实时PCR检测、三、根据公式进行计算即得到粪便中产甲酸草酸杆菌定殖数量。本发明的检测方法操作简单，误差小，便于推广，获得结果的周期短，与现有的方法相比较，时间缩短了80％以上，且本发明所得到结果准确，误差小。
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公开(公告)号：CN107641629B
公开(公告)日：2020-03-10
申请号：CN201710731793.8
申请日：2017-08-23
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学和基因工程技术领域，公开了一种安达喜盐芽孢杆菌耐盐碱基因rdd及其鉴定方法，一安达喜盐芽孢杆菌耐盐碱基因rdd，含一个534bp的完整开放阅读框ORF，ORF的核苷酸序列为SEQ ID NO.1；鉴定方法包括：筛选技含有耐盐碱相关的基因片段，构建含有rdd基因的原核表达载体；通过化转异源宿主Escherichia coli KNabc，将基因rdd导入KNabc宿主中，对基因rdd生理功能及编码的蛋白活性进行鉴定。本发明所提出的rdd基因对盐碱地土壤改良具有重要意义，可用于构建高的效耐盐碱工程菌、开发微生物肥料和提高植物耐盐碱性的转基因领域的研究。
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公开(公告)号：CN110357948A
公开(公告)日：2019-10-22
申请号：CN201910048712.3
申请日：2019-01-18
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明属于蛋白质技术领域，公开了一种MdrP突变体的基因、氨基酸、蛋白功能及药物积累活性检测，在含有阳离子(Na+、K+)的Buffer中加入CCCP移除跨膜H+梯度只保留跨膜阳离子梯度驱动蛋白转运，或在buffer中分别加入Monensin或Nigericin移除阳离子梯度只保留跨膜H+梯度来驱动蛋白转运，实现不同驱动作用之间的相对定量对比。本发明明确了MdrP蛋白高度保守氨基酸位点的重要功能，证明了MdrP蛋白是一个H+和Na+驱动的药物外排蛋白；N146是H+结合位点，D223、Q242是Na+、H+竞争结合位点，或可以成为对MFS家族抗药蛋白理解的有利理论支撑。
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