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公开(公告)号：CN114149972A
公开(公告)日：2022-03-08
申请号：CN202111044626.9
申请日：2021-09-07
Applicant: 上海交通大学医学院
IPC: C12N5/09 , C12N5/071 , C12Q1/6886 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明公开了一种鼻腔乳头状瘤组织的单细胞悬液制备方法及应用，涉及生物检测技术领域，该方法的酶溶液为II型胶原酶、胰蛋白酶、脱氧核糖核酸酶I的无钙镁PBS溶液；该方法包括的步骤为酶解和孵育鼻腔乳头状瘤肿瘤组织，过滤得到细胞悬液，红细胞裂解得到细胞沉淀，清洗得到鼻腔乳头状瘤单细胞悬液。本发明制备得到的鼻腔乳头状瘤单细胞悬液中单细胞活性高，数量充足，且细胞分离度高，有利于进行下游包括高通量单细胞测序、细胞分选后进行单个细胞的测序等实验。
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公开(公告)号：CN118562787A
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202410626437.X
申请日：2024-05-20
Applicant: 上海交通大学医学院
IPC: C12N15/10 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明公开一种动脉粥样硬化斑块样本单细胞核悬液的制备方法及应用。用于制备动脉粥样硬化斑块样本单细胞核悬液的消化体系包括CA‑630、匀浆缓冲液；所述匀浆缓冲液包括Tris缓冲液、无机盐、糖、二硫苏糖醇(DTT)，酶抑制剂。CA‑630和匀浆缓冲液配置的消化体系对斑块组织样本进行消化解离处理，再经匀浆缓冲液和细胞核重悬液进行梯度离心以去除钙化碎片等杂质，从而得分离度高的高质量单细胞核悬液。本发明的单细胞核悬液得率高、纯度好、细胞类型丰富，充分还原病理及生理状态下的细胞类型及比例，为鲜离体的、以及已冻存的样本组织提供如单细胞测序、流式分析等多种研究的基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118345026A
公开(公告)日：2024-07-16
申请号：CN202410484773.5
申请日：2024-06-13
Applicant: 上海交通大学医学院
Abstract: 本发明公开了一种通用型制备高活性的小鼠胰腺离体组织单细胞悬液的方法及多种应用。涉及生物检测技术领域，特别是一种用于制备胰腺导管腺癌小鼠胰腺组织单细胞悬液的方法。由于胰腺导管腺癌的组织结构复杂、细胞紧密相连，传统的细胞分离方法存在困难，影响了单细胞测序技术的准确性和可靠性。为解决这一问题，本发明提供了一种混合酶液，包括IV型胶原酶、Dispase II、胰蛋白酶抑制剂、胎牛血清、DNAse I和细胞培养基，用于制备小鼠胰腺组织单细胞悬液。该方法简单、方便，能够获得高活性、高分散的单细胞悬液，有助于深入研究胰腺导管腺癌的微环境。
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公开(公告)号：CN118406636A
公开(公告)日：2024-07-30
申请号：CN202410617733.3
申请日：2024-05-17
Applicant: 上海交通大学医学院
IPC: C12N5/071 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明公开了一种供移植用皮肤组织单细胞悬液的制备方法及应用；本发明供移植用皮肤单细胞悬液制备用酶解体系所述酶解体系包括组织酶解液I和组织酶解液II；所述组织酶解液I包括Liberase TL、分散酶、DNAse I；所述组织酶解液II包括胶原酶II、透明质酸酶、DNAse I。所述供移植用皮肤组织的单细胞悬液的制备方法，包括皮肤组织在组织预处理液中预处理的步骤；预处理后的皮肤组织在组织酶解液I和组织酶解液II中进行消化的步骤；S3、消化后的进行红细胞裂解，去除红细胞的步骤；S5、用细胞重悬液重悬去除红细胞的细胞沉淀的步骤。本发明为未来的皮肤再生生物学研究提供了重要的技术支持。
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公开(公告)号：CN114149972B
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202111044626.9
申请日：2021-09-07
Applicant: 上海交通大学医学院
IPC: C12N5/09 , C12N5/071 , C12Q1/6886 , C12Q1/6869
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公开(公告)号：CN116042525A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202310160730.7
申请日：2023-02-23
Applicant: 上海交通大学医学院
IPC: C12N5/09 , C12Q1/6886
Abstract: 本发明提供了一种肝肿瘤组织单细胞悬液的制备方法及应用，所述制备方法包括以下步骤：步骤1、预处理肝肿瘤组织；步骤2、分步酶解；利用酶溶液分步酶解步骤1中的预处理后的肝肿瘤组织，并过滤后收集每一步的酶解液，得到细胞悬液；步骤3、梯度离心；利用细胞分离液对细胞悬液进行梯度离心，分离免疫细胞和肝实质细胞；步骤4、红细胞裂解；用红细胞裂解液对步骤3获得的免疫细胞进行红细胞裂解，并离心清洗，获得免疫细胞沉淀；步骤5、收集步骤3中的肝实质细胞和步骤4中的免疫细胞沉淀，用细胞清洗液清洗后离心获得细胞沉淀，用细胞重悬液重悬细胞沉淀并过滤，得到所述肝肿瘤组织单细胞悬液。
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公开(公告)号：CN114457020A
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202210192165.8
申请日：2022-02-28
Applicant: 上海交通大学医学院
IPC: C12N5/09 , C40B50/06 , G01N15/14 , C12Q1/6869
Abstract: 本发明提供一种单细胞分选方法及其应用，所涉及的内容包括样本准备、样品加载、位置校准、单细胞滴定分选、单个细胞进行全长转录组文库分析；通过单细胞滴定分选方法可以得到单个细胞，不但高活性而且对起始样本细胞数要求低，最佳分选浓度为105个细胞/ml，还可以提高单个细胞全长转录组文库构建成功率，大大节省下游实验的试剂用量，相比现有其他单细胞分选及单细胞测序技术有显著的提升，使单细胞测序技术可以更广泛地应用于肿瘤组织微环境的研究。
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