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公开(公告)号：CN102899421A
公开(公告)日：2013-01-30
申请号：CN201210461112.8
申请日：2012-11-16
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种利用双荧光素酶报告基因筛选血管生成相关microRNA的方法，其中，该方法包含：步骤1，进行目标细胞的培养和铺板；步骤2，配置microRNA/DNA/脂质体的混合物，对步骤1所述的细胞进行共转染；步骤3，进行荧光素酶活性检测；该步骤3包含：将步骤2所得的共转染后的细胞，用一种含有VEGFA基因3′UTR与报告基因的重组质粒，以及一种海肾荧光素酶载体分别进行转染；然后将得到的细胞经过培养后，进行收集；将所收集的细胞进行裂解；取15-20μl细胞裂解液于离心管中，加入工作液，然后用发光仪进行测读。该报告基因为萤火虫荧光素酶基因。本发明提供的方法，可用来筛选血管生成相关的microRNA、研究血管生成与microRNA之间的作用机理以及研究肿瘤细胞血管生成的机制等。
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公开(公告)号：CN103110568A
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN201310076421.8
申请日：2013-03-11
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种载丹参酮IIA的纳米给药系统，其中，该纳米给药系统是以缬氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-谷氨酸环肽修饰的聚乙二醇单甲醚-聚乳酸羟基乙酸-聚赖氨酸聚合物作为载体的载丹参酮IIA的纳米粒；纳米粒的直径为10-2000nm；聚合物的分子量为1.5×103-9.5×106。丹参酮IIA和载体聚合物的摩尔比为1-60:1-60；聚合物中乳酸和羟基乙酸摩尔比为1-80:1-80，羟基乙酸和赖氨酸摩尔比为90-50:10-50，聚乙二醇单甲醚-聚乳酸羟基乙酸-聚赖氨酸和缬氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-谷氨酸环肽摩尔比为1-60:1-60。本发明提供的载丹参酮IIA的纳米给药系统，能够有效的降低丹参酮IIA的毒性，增强其靶向性和治疗效果。
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公开(公告)号：CN103173480A
公开(公告)日：2013-06-26
申请号：CN201310065888.2
申请日：2013-03-01
Applicant: 上海中医药大学附属曙光医院 , 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明涉及一种质粒载体，所述的质粒载体包含人ABCB1基因的3′UTR序列和双荧光素酶基因。本发明还涉及一种筛选多药耐药相关microRNA的方法，它是将待测试microRNA和如上所述的质粒载体共转染多药耐药宿主细胞，以转染microRNA的多药耐药宿主细胞为对照，观测双荧光素酶活性的变化，确定待测试microRNA是否为多药耐药相关microRNA。本发明还涉及一种microRNA在制备逆转多药耐药的药物中的用途。使用本发明的方法筛选多药耐药相关microRNA具有快速、高效、简单易行的优点，为提高microRNA检测的灵敏度和特异性，以及研发和检测通过基因调控逆转多药耐药的药物开辟了新的途径。
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公开(公告)号：CN103110567A
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN201310076397.8
申请日：2013-03-11
Applicant: 上海中医药大学附属普陀医院
Abstract: 本发明公开了一种载丹参酮IIA的纳米给药系统的制备方法，包含：步骤1，制备缬氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-谷氨酸环肽修饰的聚乙二醇单甲醚-聚乳酸羟基乙酸-聚赖氨酸；步骤2，缬氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-谷氨酸环肽修饰的聚乙二醇单甲醚-聚乳酸羟基乙酸-聚赖氨酸和丹参酮IIA摩尔比为1-60:1-60时，制备载丹参酮IIA的缬氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-谷氨酸环肽修饰的聚乙二醇单甲醚-聚乳酸羟基乙酸-聚赖氨酸纳米粒。本发明还提供了该方法制备的载丹参酮IIA的纳米给药系统的用途。本发明提供的方法制备的载丹参酮IIA的纳米给药系统，能够有效的降低丹参酮IIA的毒性，增强其靶向性和治疗效果。
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