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公开(公告)号：CN1699578A
公开(公告)日：2005-11-23
申请号：CN200510026026.4
申请日：2005-05-20
Applicant: 上海中医药大学
Abstract: 本发明公开了一种转外源基因技术提高黄芪甲苷含量的方法。本发明将透明颤菌血红蛋白基因(vgb基因)经改造后，采用酶切结合PCR技术，将vgb基因插入质粒pBI121，获得以35s－CaMV强启动子为启动元件的中间表达载体pBI121－vgb，并转入大肠杆菌DH5α。采用三亲杂交法(pRK2013、DH5α和LBA9402)，获得转vgb基因的发根农杆菌LBA9402－vgb。用其侵染黄芪无茵苗，获得转基因黄芪毛状根，经测定其中黄芪甲苷含量高于未转基因毛状根含量5倍。
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公开(公告)号：CN100350046C
公开(公告)日：2007-11-21
申请号：CN200510026026.4
申请日：2005-05-20
Applicant: 上海中医药大学
Abstract: 本发明公开了一种转外源基因技术提高黄芪甲苷含量的方法。本发明将透明颤菌血红蛋白基因(vgb基因)经改造后，采用酶切结合PCR技术，将vgb基因插入质粒pBI121，获得以35s-CaMV强启动子为启动元件的中间表达载体pBI121-vgb，并转入大肠杆菌DH5α。采用三亲杂交法(pRK2013、DH5α和LBA9402)，获得转vgb基因的发根农杆菌LBA9402-vgb。用其侵染黄芪无菌苗，获得转基因黄芪毛状根，经测定其中黄芪甲苷含量高于未转基因毛状根含量5倍。
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公开(公告)号：CN1699566A
公开(公告)日：2005-11-23
申请号：CN200510026025.X
申请日：2005-05-20
Applicant: 上海中医药大学
IPC: C12N15/09 , C12N15/10 , C12N15/54 , C12N15/63 , C12N15/87 , C12N15/82 , C12N5/04 , C12N15/70 , C12N15/74 , A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种内源基因超量表达技术提高黄芪甲苷含量的方法。本发明将多糖代谢途径的两个代谢反应偶连的关键酶基因ugp基因(尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因)和gbss基因(腺苷二磷酸葡萄糖苷转移酶基因)，经体外修饰，增加强化表达的调控元件，构建成功中间载体，通过电穿孔法将表达中间载体pBI－UG转入发根农杆菌LBA－9402，获得转多糖合成双基因的黄芪毛状根。其中黄芪甲苷的含量比未转基因的黄芪毛状根高6倍。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1314804C
公开(公告)日：2007-05-09
申请号：CN200510026025.X
申请日：2005-05-20
Applicant: 上海中医药大学
IPC: C12N15/09 , C12N15/10 , C12N15/54 , C12N15/63 , C12N15/87 , C12N15/82 , C12N5/04 , C12N15/70 , C12N15/74 , A01H4/00 , A61K36/481 , A61P9/10
Abstract: 本发明公开了一种内源基因超量表达技术提高黄芪甲苷含量的方法。本发明将多糖代谢途径的两个代谢反应偶连的关键酶基因ugp基因(尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因)和gbss基因(腺苷二磷酸葡萄糖苷转移酶基因)，经体外修饰，增加强化表达的调控元件，构建成功中间载体，通过电穿孔法将表达中间载体pBI-UG转入发根农杆菌LBA-9402，获得转多糖合成双基因的黄芪毛状根。其中黄芪甲苷的含量比未转基因的黄芪毛状根高6倍。
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公开(公告)号：CN1401781A
公开(公告)日：2003-03-12
申请号：CN02136919.4
申请日：2002-09-10
Applicant: 上海中医药大学
Abstract: 本发明属生物工程技术领域。具体涉及一种激素完全适应型长春花细胞培养生成吲哚类生物碱的新方法。本发明以野生长春花种子为原始材料，获得长春花无菌苗，进一步诱导出愈伤组织，经过多代定向诱导驯化，建立了适合大规模培养的激素完全适应型细胞培养系统，该培养物中总生物碱含量和野生长春花相当，但培养物中不含具有细胞毒的长春碱和长春新碱。
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