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公开(公告)号：CN107703113A
公开(公告)日：2018-02-16
申请号：CN201711152189.6
申请日：2017-11-19
Applicant: 三峡大学
IPC: G01N21/64 , G01N33/574
CPC classification number: G01N21/6428 , G01N33/57484 , G01N2800/7023
Abstract: 本发明公开了一种基于Hochest333258的肿瘤细胞增殖检测方法和应用，该方法通过传代培养肿瘤细胞至细胞培养板，细胞经计数后进行倍比稀释得到不同细胞个数的梯度系列，在培养基中进行常规培养，然后加入含Hochest333258的溶液，混匀后静置一段时间，弃去细胞培养基，用PBS缓冲液洗去残余培养基后再加入PBS缓冲液，最后检测荧光值，通过荧光信号强度来判断细胞增殖水平或存活率。该方法简便易行、重复性和准确性高；能够有效检测肿瘤细胞的增殖水平。
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公开(公告)号：CN102367436B
公开(公告)日：2012-10-24
申请号：CN201110263239.4
申请日：2011-09-07
Applicant: 三峡大学
IPC: C12N5/20 , C12P21/08 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573
Abstract: 本发明涉及一种高特异性、高效价的抗人精胺氧化酶的单克隆抗体、其制备方法及其应用。所述单克隆抗体由杂交瘤细胞株CCTCCC201159产生。该单克隆抗体能识别包含人、小鼠和猴的哺乳动物的精胺氧化酶，并可以进行定性或定量分析，还可以广泛应用于免疫印迹、ELISA、免疫组织化学分析、免疫荧光分析、流式细胞术、免疫沉淀等实验研究中，用来检测精胺氧化酶。
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公开(公告)号：CN113999861B
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202111050778.X
申请日：2021-09-08
Applicant: 三峡大学
IPC: C12N15/35 , C12N15/70 , C07K14/015 , C07K16/08 , C07K16/06 , C07K1/22 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种腺相关病毒衣壳蛋白保守区多克隆抗体的制备方法及应用，通过DNAMAN软件分析，将AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10衣壳蛋白氨基酸序列中连续7个及以上氨基酸同源的序列依次拼接，获得的序列即为AAV衣壳蛋白保守区序列，与保守区氨基酸序列对应可确定编码衣壳蛋白保守区的DNA序列，根据宿主菌的特性，对获得的DNA序列进行密码子优化，将优化后的DNA序列合成并构建到pET‑30a原核表达载体，得到pET‑30a‑AAV‑RC保守区蛋白质粒，DNA序列如SEQ ID NO.1，氨基酸序列如SEQ ID NO.2。成功制备了抗AAV衣壳保守区蛋白的多克隆抗体，识别所有血清型AAV，特异性识别和结合人真核细胞中转染表达的AAV衣壳蛋白。
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公开(公告)号：CN114685651A
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202210396426.8
申请日：2022-04-15
Applicant: 三峡大学
IPC: C07K16/08 , C07K16/06 , C12N15/70 , C12N15/35 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种特异识别AAV9衣壳蛋白的多克隆抗体及制备方法，将8处AAV9衣壳可变区氨基酸序列依次连接即为本发明所指AAV9可变区VR的氨基酸序列SEQ ID NO.1，由氨基酸序列得到编码AAV9衣壳可变区的DNA序列如SEQ ID NO.2，将DNA序列插入到原核表达载体pET30a获得质粒pET30a‑AAV‑VR，转化大肠杆菌扩增，采用IPTG诱导表达多价抗原肽，在变性条件下经Ni‑NTA树脂进行纯化，然后透析复性，纯化得到AAV9可变区蛋白免疫日本大耳朵白兔，以此制备多克隆抗体，ELISA检测抗体效价，Western‑blot及细胞免疫荧光检测抗体的应用。抗体效价为1:10240000，该抗体能特异性识别AAV9衣壳蛋白序列。为后续AAV载体开发以及AAV生物学功能研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107879997B
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN201711424601.5
申请日：2017-12-25
Applicant: 三峡大学
IPC: C07D295/088 , A61P35/00
Abstract: 本发明提供一种小分子抑制剂SLD1338，该小分子抑制剂的结构式为：本发明将所述的小分子抑制剂SLD1338在制备抑制精胺氧化酶的药物上的应用。结果显示SLD1338改变人小细胞肺癌A549细胞生长周期，以及改变A549细胞周期蛋白表达含量，同时可诱导A549细胞发生凋亡。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108164529A
公开(公告)日：2018-06-15
申请号：CN201711423096.2
申请日：2017-12-25
Applicant: 三峡大学
IPC: C07D471/08 , A61P35/00 , A61P35/04 , A61P11/00
Abstract: 本发明提供一种小分子抑制剂SLD9059，该小分子抑制剂的结构式为：本发明将所述的小分子抑制剂SLD9059在制备抑制精胺氧化酶的药物上的应用。结果显示SLD9059改变人小细胞肺癌A549细胞生长周期，以及改变A549细胞周期蛋白表达含量，同时可诱导A549细胞发生自噬。
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公开(公告)号：CN107879997A
公开(公告)日：2018-04-06
申请号：CN201711424601.5
申请日：2017-12-25
Applicant: 三峡大学
IPC: C07D295/088 , A61P35/00
CPC classification number: C07D295/088
Abstract: 本发明提供一种小分子抑制剂SLD1338，该小分子抑制剂的结构式为： 本发明将所述的小分子抑制剂SLD1338在制备抑制精胺氧化酶的药物上的应用。结果显示SLD1338改变人小细胞肺癌A549细胞生长周期，以及改变A549细胞周期蛋白表达含量，同时可诱导A549细胞发生凋亡。
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公开(公告)号：CN103091499A
公开(公告)日：2013-05-08
申请号：CN201310025418.3
申请日：2013-01-23
Applicant: 三峡大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/531
Abstract: 一种肿瘤标志物钙网蛋白检测试剂盒的制备及应用，属于基因工程和临床诊断领域。本发明应用重组CRT蛋白免疫BALB/c小鼠和新西兰大白兔制备了CRT的单克隆抗体、多克隆抗体，并建立了检测CRT最低量为0.3125ng/ml，检测限为40-0.3125ng/ml的高特异性和敏感性的ELISA试剂盒。通过制备的ELISA试剂盒，对收集的临床样品进行检测，结果发现肺癌病人血清中的CRT明显高于正常对照血清，统计学有显著差异(P
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公开(公告)号：CN114685651B
公开(公告)日：2023-07-11
申请号：CN202210396426.8
申请日：2022-04-15
Applicant: 三峡大学
IPC: C07K16/08 , C07K16/06 , C12N15/70 , C12N15/35 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种特异识别AAV9衣壳蛋白的多克隆抗体及制备方法，将8处AAV9衣壳可变区氨基酸序列依次连接即为本发明所指AAV9可变区VR的氨基酸序列SEQ ID NO.1，由氨基酸序列得到编码AAV9衣壳可变区的DNA序列如SEQ ID NO.2，将DNA序列插入到原核表达载体pET30a获得质粒pET30a‑AAV‑VR，转化大肠杆菌扩增，采用IPTG诱导表达多价抗原肽，在变性条件下经Ni‑NTA树脂进行纯化，然后透析复性，纯化得到AAV9可变区蛋白免疫日本大耳朵白兔，以此制备多克隆抗体，ELISA检测抗体效价，Western‑blot及细胞免疫荧光检测抗体的应用。抗体效价为1:10240000，该抗体能特异性识别AAV9衣壳蛋白序列。为后续AAV载体开发以及AAV生物学功能研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113999861A
公开(公告)日：2022-02-01
申请号：CN202111050778.X
申请日：2021-09-08
Applicant: 三峡大学
IPC: C12N15/35 , C12N15/70 , C07K14/015 , C07K16/08 , C07K16/06 , C07K1/22 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供一种腺相关病毒衣壳蛋白保守区多克隆抗体的制备方法及应用，通过DNAMAN软件分析，将AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9、AAV10衣壳蛋白氨基酸序列中连续7个及以上氨基酸同源的序列依次拼接，获得的序列即为AAV衣壳蛋白保守区序列，与保守区氨基酸序列对应可确定编码衣壳蛋白保守区的DNA序列，根据宿主菌的特性，对获得的DNA序列进行密码子优化，将优化后的DNA序列合成并构建到pET‑30a原核表达载体，得到pET‑30a‑AAV‑RC保守区蛋白质粒，DNA序列如SEQ ID NO.1，氨基酸序列如SEQ ID NO.2。成功制备了抗AAV衣壳保守区蛋白的多克隆抗体，识别所有血清型AAV，特异性识别和结合人真核细胞中转染表达的AAV衣壳蛋白。
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