本发明公开了一种O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸巯基转移酶突变体及其应用，所述突变体是将SEQ ID NO.1所示的O‑琥珀酰‑L‑高丝氨酸巯基转移酶氨基酸序列的第59位、第119位进行单突变或多突变获得的。本发明通过半理性设计，定点突变技术改造MetZ，最终获得了在不损失酶活力的情况下对高浓度甲硫醇钠环境下耐受性提高的突变体。本发明的突变体对甲硫醇钠的耐受性大幅提高，由突变前的5％提高到15％，具有很大工业价值。本发明突变体对底物的转化率显著提高，有利于生产应用。