本申请为小鼠进行基因敲除的方法及构建的Tyw5基因敲除小鼠模型，提供一种小鼠Tyw5基因敲除载体，包括载体骨架和靶向小鼠Tyw5基因的sgRNA，所述sgRNA包含与小鼠Tyw5基因的至少一部分互补的核苷酸序列，所述sgRNA包含sgRNA1、sgRNA2、sgRNA3和sgRNA4中的一种或两种，其中sgRNA1、sgRNA2、sgRNA3和sgRNA4均为与小鼠Tyw5基因的至少一部分互补的核苷酸序列，本申请还提供一种对小鼠进行基因敲除的方法。本申请设计了特异性靶向小鼠Tyw5基因特定序列的四条sgRNA，利用CRISPR/Cas9系统进行Tyw5基因特定位置片段敲除，造成移码突变，从而达到对小鼠进行基因敲除的目的。利用该方法构建的小鼠模型为后续深入研究Tyw5基因的功能以及Tyw5基因对精神分裂疾病影响的机制提供更加精准的实验动物模型。