本发明提供一种VISTA基因人源化动物细胞及动物模型的构建方法与应用，涉及动物基因工程领域。本发明构建的VISTA基因人源化动物模型能够加速与人VISTA基因或蛋白相关的领域的研究进展。优选的，本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，将鼠源的VISTA基因替换为人源的VISTA基因，构建能与抗人源VISTA抗体相互作用的小鼠模型，该模型与普通小鼠相比，实现了关键靶分子的人源化改造，可用于筛选和评价针对人VISTA基因的药物，是非常理想的临床前药物测试模型。