一种获得牛初始态诱导多能干细胞的方法
Abstract:
一种获得牛初始态诱导多能干细胞的方法,属于干细胞培养领域,将牛诱导多能干细胞在含有5%二氧化碳,温度37℃条件下培养3~4天,弃掉诱导培养基,用PBS缓冲液洗净,分散酶37℃下孵育,观察克隆边缘与饲养层细胞分离后,吸取消化液,加入诱导培养基,从饲养层细胞上刮取牛诱导多能干细胞;用0.05%的胰酶在37℃的条件下消化,加入1mL转化培养基重悬至1.5mL离心管中,1000rpm离心5min,接种至新鲜的饲养层上,并更换转化培养基进行培养,直至出现圆拱形,类似小鼠胚胎干细胞ESCs样的克隆即为牛初始态诱导多能干细胞。本发明解决了现有牛诱导多能干细胞的多能性不完全等问题。
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