一种化学-生物级联合成L-草铵膦的方法及突变体

    公开(公告)号:CN118931985A

    公开(公告)日:2024-11-12

    申请号:CN202410819732.7

    申请日:2024-06-24

    摘要: 本发明公开了一种化学‑生物级联合成L‑草铵膦的方法及突变体,以甲基亚磷酸二乙酯和丙烯酸加成反应合成3‑(甲基乙氧基膦酰基)丙酸乙酯,然后将3‑(甲基乙氧基膦酰基)丙酸乙酯与乙醇钠缩合反应后,再与草酸二乙酯水解合成2‑羰基‑4‑(羟基甲基膦酰基)丁酸,最后采用草铵膦脱氢酶与醇脱氢酶共表达湿菌体或草铵膦脱氢酶突变体与醇脱氢酶共表达湿菌体为生物催化剂合成L‑草铵膦,解决了现有L‑草铵膦合成繁锁,不对称胺化还原活性不高和稳定性较差的问题。本发明工艺路线绿色、简单、温和,避免了合成D,L‑草铵膦所用剧毒氰化物,三废产生量较D,L‑草铵膦减少50%以上。本发明生物催化步骤转化率达到100%,无底物残留,产物ee值大于99%。

    降解尿酸的马克斯克鲁维酵母YZC-01制剂及其应用

    公开(公告)号:CN118931741A

    公开(公告)日:2024-11-12

    申请号:CN202410539518.6

    申请日:2024-04-30

    发明人: 闫海 吴安情

    摘要: 本发明属于生物技术领域,涉及一种降解尿酸的马克斯克鲁维酵母YZC‑01株,其能够产生催化降解尿酸的酶。本发明还涉及一种降解尿酸的马克斯克鲁维酵母YZC‑01制剂,该马克斯克鲁维酵母YZC‑01制剂含有上述马克斯克鲁维酵母YZC‑01株的菌细胞和/或粗酶。研究结果表明,本发明所提供的用于生物降解尿酸的马克斯克鲁维酵母YZC‑01株及其所产生的酶对人体安全,且均能够高效生物降解尿酸,在去除尿酸用于防治痛风及相应并发症方面具有重要的应用前景。

    亚胺还原酶突变体及其在光学纯2-芳基吡咯烷合成中的应用

    公开(公告)号:CN118909993A

    公开(公告)日:2024-11-08

    申请号:CN202411129249.2

    申请日:2024-08-16

    摘要: 本发明属于生物工程技术领域,涉及亚胺还原酶突变体及其在光学纯2‑芳基吡咯烷合成中的应用。本发明提供的亚胺还原酶突变体的催化2‑(3,5‑二甲基苯基)吡咯啉的比活力高达136.8U/mg,能高效催化2‑(3,5‑二甲基苯基)吡咯啉不对称还原合成阿替卡仑(Aticaprant)手性中间体(S)‑2‑(3,5‑二甲基苯基)吡咯烷。与树脂原位吸附耦联的酶促反应中的底物浓度高达100g/L,产物时空得率高达438g/L/d,光学纯度大于99%。此外该亚胺还原酶突变体对于其他多种2‑芳基吡咯啉也具有较高的比活、转化率和光学活性。综上,本发明提供的亚胺还原酶突变体具有极高的催化活性和时空产率,有效解决了底物抑制的问题,在手性2‑芳基吡咯烷特别是阿替卡仑手性中间体(S)‑2‑(3,5‑二甲基苯基)吡咯烷的合成中具有较强的工业应用前景。

    还原胺化酶突变体及其在烷基化吡咯烷手性胺合成中的应用

    公开(公告)号:CN116103257B

    公开(公告)日:2024-10-29

    申请号:CN202310233977.7

    申请日:2023-03-11

    IPC分类号: C12N9/06 C12P17/10

    摘要: 本发明属于酶工程技术领域。本发明公布了一种还原胺化酶突变体,所述还原胺化酶突变体为突变体V1、突变体V2、突变体V3、突变体V4、或突变体V5;所述突变体V1的氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示;所述突变体V2的氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示;所述突变体V3的氨基酸序列如SEQ ID NO.8所示;所述突变体V4的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示;所述突变体V5的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示。本发明提供的突变体在还原胺化反应中转化率高达99%,立体选择性高达99%,具有很好的工业化应用前景。

    一种无载体共固定化苯丙氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的制备与应用

    公开(公告)号:CN118813600A

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202310432052.5

    申请日:2023-04-20

    发明人: 刘夫锋 陈锐派

    摘要: 本发明公开了一种无载体共固定苯丙氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的制备方法和应用,属于生物工程技术领域。本发明的具体方法包括以下内容:以聚乙二醇为沉淀剂、戊二醛为交联剂,通过无载体固定化‑交联酶聚集体法,实现苯丙氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的固定化,之后利用固定化的苯丙氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶生产L‑苯丙氨酸、沙格列汀中间体、苯丙酮酸。此法制备得到的交联苯丙氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶聚集体的温度稳定性、pH耐受性和贮藏稳定性均有提高。本发明提高了酶法制备沙格列汀中间体的效率,降低了生产成本和分离纯化难度,适合大规模的连续化生产,对提高我国生产L‑苯丙氨酸、沙格列汀中间体、苯丙酮酸的技术水平具有重大意义。