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    一种快速评价植物CRISPR/Cas9靶点编辑效率的方法
    2.
    发明公开
    一种快速评价植物CRISPR/Cas9靶点编辑效率的方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN117737215A

    公开(公告)日：2024-03-22

    申请号：CN202311761727.7

    申请日：2023-12-20

    申请人： 北京林业大学

    发明人： 张德强 ,  黄伟雄 ,  齐薇娜 ,  权明洋

    IPC分类号： C12Q1/6869 ,  C12Q1/6895 ,  C12N15/82 ,  A01H6/26 ,  A01H5/00 ,  G16B20/20

    摘要： 本发明公开了一种快速评价植物CRISPR/Cas9靶点编辑效率的方法，属于基因编辑技术领域。本发明提供了一种计算植物全基因组CRISPR/Cas9靶点编辑效率的方法，包括：1)选择参考基因组；在目标基因的CDS范围内筛选出最佳基因编辑靶点，并全基因组扫描每个靶点的潜在靶向位点；2)制备原生质体样品，开展基因编辑原生质体瞬时转染，对其DNA文库进行高通量测序；3)将测序数据比对到参考基因组上，提取出靶点区域及潜在脱靶位点区域；4)对每条reads进行分型，并进行统计；5)计算靶点编辑效率。本发明方法可以快速高效地在全基因组水平检测每个靶点的基因编辑效率，具有实用价值和广泛的应用前景。

    基于VIGS技术的党参基因瞬时沉默体系的建立方法
    3.
    发明授权
    基于VIGS技术的党参基因瞬时沉默体系的建立方法 有权

    公开(公告)号：CN114606261B

    公开(公告)日：2023-06-30

    申请号：CN202210308845.1

    申请日：2022-03-28

    申请人： 山西医科大学

    发明人： 吉姣姣 ,  田星锐 ,  刘喆宇 ,  冯琪 ,  李建宽 ,  高建平

    IPC分类号： C12N15/84 ,  C12N15/53 ,  A01H5/12 ,  A01H6/26

    摘要： 本发明属于植物基因工程技术领域，公开了基于VIGS技术的党参基因瞬时沉默体系构建方法，包括如下步骤：（1）、基因克隆得到CpPDS基因；（2）、构建含有CpPDS基因特异性片段的pTRV2病毒沉默表达载体；（3）、重组载体冻融法转化农杆菌；（4）农杆菌侵染液灌根法侵染党参根系；（5）、将侵染后的党参于一定条件下培养；（6）、光漂白法观察党参叶片变化。本发明方法建立了基于VIGS技术的党参基因瞬时沉默体系，可快速进行基因功能鉴定。

    基于VIGS技术的党参基因瞬时沉默体系的建立方法
    4.
    发明公开
    基于VIGS技术的党参基因瞬时沉默体系的建立方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN114606261A

    公开(公告)日：2022-06-10

    申请号：CN202210308845.1

    申请日：2022-03-28

    申请人： 山西医科大学

    发明人： 吉姣姣 ,  田星锐 ,  刘喆宇 ,  冯琪 ,  李建宽 ,  高建平

    IPC分类号： C12N15/84 ,  C12N15/53 ,  A01H5/12 ,  A01H6/26

    摘要： 本发明属于植物基因工程技术领域，公开了基于VIGS技术的党参基因瞬时沉默体系构建方法，包括如下步骤：（1）、基因克隆得到CpPDS基因；（2）、构建含有CpPDS基因特异性片段的pTRV2病毒沉默表达载体；（3）、重组载体冻融法转化农杆菌；（4）农杆菌侵染液灌根法侵染党参根系；（5）、将侵染后的党参于一定条件下培养；（6）、光漂白法观察党参叶片变化。本发明方法建立了基于VIGS技术的党参基因瞬时沉默体系，可快速进行基因功能鉴定。

    一种党参愈伤组织高效遗传转化方法
    6.
    发明公开
    一种党参愈伤组织高效遗传转化方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN112175992A

    公开(公告)日：2021-01-05

    申请号：CN202011274727.0

    申请日：2020-11-16

    申请人： 山西医科大学

    发明人： 吉姣姣 ,  刘喆宇 ,  高建平 ,  姜峰 ,  王亚榕 ,  田星锐

    IPC分类号： C12N15/82 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00 ,  A01H6/26

    摘要： 本发明公开了一种党参愈伤组织高效遗传转化方法，包括如下步骤：（1）、预培养党参茎段外植体；（2）、将含有GUS基因的重组质粒导入农杆菌；（3）、农杆菌侵染液侵染党参外植体；（4）、外植体与农杆菌共培养；（5）、将经过共培养的外植体转移至延迟培养基进行延迟培养；（6）、以潮霉素（Hyg）为筛选压力，于筛选培养基上进行筛选培养，诱导抗性愈伤组织；（7）、利用GUS染色技术进行检测。本发明所提供的党参愈伤组织遗传转化方法，操作简单易行，阳性愈伤组织诱导率高。

    一种利用红果参叶片进行离体繁殖的方法
    7.
    发明公开
    一种利用红果参叶片进行离体繁殖的方法 审中-实审

    公开(公告)号：CN118216427A

    公开(公告)日：2024-06-21

    申请号：CN202410455859.5

    申请日：2024-04-16

    申请人： 云南农业大学 ,  云南九星生物科技有限公司

    发明人： 张国平 ,  邹俊 ,  吕霞 ,  普仕江 ,  李振林 ,  许俊强 ,  王鹏飞

    IPC分类号： A01H4/00 ,  A01H6/26

    摘要： 本发明提供一种利用红果参叶片进行离体繁殖的方法，包括：以红果参顶端2‑3片叶片为外植体，分别采用改良的初代培养基、继代培养基、生根培养基进行培养；经过实验验证后，分别筛选出红果参叶片组培效果最佳的培养基，其中，初代培养基为MS+0.2mg/L KT+0.8mg/L 6‑BA+0.5mg/LNAA，继代培养基为MS+0.5mg/L 6‑BA+0.5mg/L NAA，生根培养基为MS+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L。本发明提供的红果参叶片离体组织培养方法诱导效果好，愈伤组织少，成活率高，根系发达，培养的红果参植株生长健壮，叶片浓密，是一种快速、高效扩繁红果参的有效方式。