一种高均一度大分子量Levan型果聚糖的制备方法

    公开(公告)号:CN105907815A

    公开(公告)日:2016-08-31

    申请号:CN201610357450.5

    申请日:2016-05-25

    Applicant: 四川大学

    CPC classification number: C12P19/18 C12N9/1055 C12P19/04 C12Y204/0101

    Abstract: 本发明公开了一种高均一度大分子量Levan型果聚糖的制备方法,利用现代分子酶工程技术对果糖基蔗糖转移酶进行分子改造,获得果糖基蔗糖转移酶突变体H280R,成功在大肠杆菌中进行原核表达,通过对表达的蛋白纯化,将纯化的酶与底物蔗糖反应,经乙醇沉淀得到Levan型果聚糖样品。本发明采用的果糖基蔗糖转移酶突变体H280R制备Levan型果聚糖时,底物蔗糖的浓度可以达到40%,通过凝胶色谱法确定了其分子量的大小为2×106Da,属于大分子多糖,且Levan型果聚糖均一性好,分散度为2.06,优于目前生物法制备Levan型果聚糖。

    一种左聚糖蔗糖酶融合蛋白及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN104017785A

    公开(公告)日:2014-09-03

    申请号:CN201410300091.0

    申请日:2014-06-27

    Applicant: 广西大学

    Inventor: 杨辉 黄日波

    CPC classification number: C12N9/1055 C12P19/04 C12P19/18 C12Y204/0101

    Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,涉及一种左聚糖蔗糖酶融合蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的左聚糖蔗糖酶融合蛋白,是具有序列表中SEQ ID NO:1氨基酸序列的蛋白质,或者是将SEQ ID NO:1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代且具有与SEQ ID NO:1的氨基酸序列相同活性的由SEQ ID NO:1衍生的蛋白质。本发明所提供的左聚糖蔗糖酶融合蛋白在以蔗糖为底物转糖苷聚合形成左聚糖反应中的最适反应温度从16℃提高到40℃,使得该酶在较高温度下还能保持良好活性对蔗糖进行转糖苷聚合反应,另外,提高反应温度有利于提高反应速度,节约反应时间,在我国南方气候较炎热地区生产时还能减少降温所需能耗,从而降低生产成本,更有利于产业化生产应用。

    一种重组表达果聚糖蔗糖酶的基因工程菌株及其应用

    公开(公告)号:CN106434504A

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201610841441.3

    申请日:2016-09-22

    Applicant: 江南大学

    Inventor: 吴敬 陈晟 唐煜

    CPC classification number: C12N9/1055 C12P19/04 C12Y204/0101

    Abstract: 本发明公开了一种重组表达果聚糖蔗糖酶的基因工程菌株及其应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明构建重组质粒pNCMO2-Lsc,转化短小芽孢杆菌得到重组短小芽孢杆菌。并以此短小芽孢杆菌为菌种发酵生产果聚糖蔗糖酶,所生产的果聚糖蔗糖酶应用于制备低聚乳果糖,具有比较好的效果。本发明的优点在于以食品安全的短小芽孢杆菌为表达宿主,重组生产果聚糖蔗糖酶,该重组菌株产酶水平高、发酵原料来源广泛,生产成本较低。

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