一种检测许氏平鲉SOCS1对ISRE活性影响的方法

    公开(公告)号:CN113637725A

    公开(公告)日:2021-11-12

    申请号:CN202110998878.9

    申请日:2021-08-28

    Inventor: 王光花 张敏

    Abstract: 本发明公开了一种检测许氏平鲉SOCS1对ISRE活性影响的方法,包括以下步骤:提取带有许氏平鲉SOCS1基因的重组质粒;培养HEK293T细胞,待培养细胞密度达到45‑55%时进行铺板;将带有SOCS1基因的重组质粒以及荧光素酶报告基因质粒转染细胞;转染12‑14h后,加入细胞因子刺激细胞,继续培养12‑16h后,进行荧光倒置显微镜或测定荧光强度。本申请通过双荧光素酶基因报告系统检测了许氏鲆鮋SOCS1对于ISRE活性的影响,为后续的许氏鲆鮋SOCS1功能研究提供了基础资料,也为许氏平鲉的人工育苗或成鱼养殖奠定了理论和实验基础。

    一种许氏平鮋钙网蛋白基因及应用

    公开(公告)号:CN109182339A

    公开(公告)日:2019-01-11

    申请号:CN201811034939.4

    申请日:2018-09-06

    Inventor: 王光花 张敏

    Abstract: 本发明公开了一种许氏平鮋钙网蛋白基因及应用,该许氏平鮋钙网蛋白基因为如下(a1)-(a4)中任一所述的DNA分子:(a1)编码区如SEQ ID NO.1所示的DNA分子;(a2)SEQ ID NO.3所示的DNA分子;(a3)在严格条件下与(a1)或(a2)限定的DNA序列杂交且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子;(a4)来源于蒺藜苜蓿并且与(a1)或(a2)或(a3)限定的DNA序列具有90%以上同源性的DNA分子。本发明具有周期短、操作简单、经济廉价、特异性强等优势,为其他物种CRT基因的扩增提供了技术支持。

    一种牙鲆SOCS3基因及其真核表达载体、表达系统和异源表达方法

    公开(公告)号:CN113584044A

    公开(公告)日:2021-11-02

    申请号:CN202110998877.4

    申请日:2021-08-28

    Inventor: 王光花 张敏

    Abstract: 本发明公开了一种牙鲆SOCS3基因及其真核表达载体、表达系统和异源表达方法。所述牙鲆SOCS3基因的核酸序列如SEQIDNO.1所示。扩增所述牙鲆SOCS3基因的上游引物如SEQIDNO.2所示,下游引物如SEQIDNO.3所示。本申请在成功克隆牙鲆SOCS3基因的基础上,进一步构建了牙鲆SOCS3基因的真核表达载体pEGFP‑C1‑PoSOCS3,并将其成功转染HEK293T细胞中,荧光倒置显微镜观察牙鲆SOCS3基因在细胞中的亚细胞定位,为后续的牙鲆SOCS3功能研究提供了基础资料。

    一种大菱鲆弧菌和鱼肠道弧菌的双重LAMP检测方法

    公开(公告)号:CN105154532B

    公开(公告)日:2018-10-30

    申请号:CN201510452542.7

    申请日:2015-07-28

    Inventor: 周顺 高志鑫 张敏

    Abstract: 本发明公开了一种双重LAMP检测方法,该方法可同时检测大菱鲆弧菌和鱼肠道弧菌。属于分子生物学技术领域。所述LAMP检测体系中含有检测大菱鲆弧菌luxR和鱼肠道弧菌ToxR基因的引物组,该引物组分别包含luxR基因和ToxR基因的一对外引物F3、B3和一对内引物FIP、BIP;内引物BIP上分别含有EcoR Ⅰ和EcoR Ⅴ酶切位点。该发明方法灵敏度高,特异型好,检测成本低廉,检测速度快。

    一种鱼肠道弧菌的LAMP检测方法

    公开(公告)号:CN105755115A

    公开(公告)日:2016-07-13

    申请号:CN201610045022.9

    申请日:2016-01-22

    Inventor: 周顺 高志鑫 张敏

    CPC classification number: C12Q1/6844 C12Q2531/119

    Abstract: 本发明公开了一种鱼肠道弧菌的LAMP检测方法。针对鱼肠道弧菌的ToxR基因设计两对引物FIP,BIP,F3,B3,配制含两对引物的LAMP反应体系,对LAMP扩增产物加入SYBR Green I进行检测。本发明比现有PCR技术检测鱼肠道弧菌的方法有更高的特异性、灵敏度、快速、便捷,并且可以用于现场的快速检测,有利于及时发现鱼类中鱼肠道弧菌的传染和爆发。

Patent Agency Ranking