一种香鱼格留虫RPA-LFD快速检测的引物探针组合、方法及其应用

    公开(公告)号:CN118667992B

    公开(公告)日:2025-03-21

    申请号:CN202410791404.0

    申请日:2024-06-19

    Abstract: 本发明公开了一种香鱼格留虫RPA‑LFD快速检测的引物探针组合、方法及其应用,属于生物技术领域。所述引物探针组合由序列如SEQ ID NO.3所示的上游引物、序列如SEQ ID NO.4所示的下游引物和序列如SEQ ID NO.7所示的探针组成。基于所述引物探针组合建立的香鱼格留虫的RPA‑LFD检测方法具有灵敏高、特异性好、操作简便、结果可视化等优势,可以准确检测香鱼格留虫,有效降低香鱼格留虫病带来的经济损失。本发明提供的香鱼格留虫RPA‑LFD快速检测方法不需要专用仪器,样品处理简单、扩增快速、结果直观,样品的最低检测限可达9.38×10‑6ng/μL,比传统PCR方法提高1000倍。

    一种牙鲆肠道上皮细胞系及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN116144582A

    公开(公告)日:2023-05-23

    申请号:CN202310031053.9

    申请日:2023-01-10

    Abstract: 本发明公开了一种牙鲆肠道上皮细胞系及其构建方法和应用,涉及海洋生物细胞培养领域。该构建方法包括以下步骤:(1)取牙鲆的肠道,去除所述肠道上的脂肪和腹膜后,得到肠壁组织,之后置于装有完全培养液的培养容器中进行贴壁培养;(2)步骤(1)贴壁培养获得的细胞,消化后进行传代培养,传代培养50代,得到所述牙鲆肠道上皮细胞系。利用本发明的构建方法可以成功构建得到牙鲆肠道上皮细胞系,该细胞系的主要特点是:细胞系可以连续传代50代或以上,生长速度快,传代频率高,能提供大量的牙鲆肠道上皮细胞;细胞的生长状态良好,能稳定增殖,细胞系的主要细胞类型为铺路石样细胞。

    大菱鲆养殖用益生菌、饲料及无抗化养殖方法

    公开(公告)号:CN112021218B

    公开(公告)日:2022-02-01

    申请号:CN202010771927.0

    申请日:2020-08-04

    Abstract: 本发明提出了大菱鲆养殖用益生菌、饲料及无抗化养殖方法,该益生菌菌株命名为纳豆芽孢杆菌ND2,经鉴定为枯草芽孢杆菌属,该菌株于2020年06月8日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M 2020184。该益生菌可有效抑制大菱鲆养殖的致病病原菌,将该益生菌应用于饲料可替代抗生素起到防治大菱鲆疾病的效果,采用该无抗化养殖方法可在保证大菱鲆健康成长前提下,在养殖全周期过程中减少或避免抗生素的使用,从而解决大菱鲆养殖中抗生素残留以及环境污染的问题。

    一种杀鲑气单胞菌LAMP-HNB快速检测方法

    公开(公告)号:CN112779345A

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN202110078904.6

    申请日:2021-01-23

    Abstract: 本发明公开了一种杀鲑气单胞菌LAMP‑HNB快速检测方法,涉及杀鲑气单胞菌LAMP‑HNB快速检测方法技术领域,所述方法包括以下步骤:S1、引物的设计与合成:根据GenBank中已知杀鲑气单胞菌毒力列阵蛋白基因(vapA)序列,通过引物设计软件Primer Explore V4设计六条特异性引物。该杀鲑气单胞菌LAMP‑HNB快速检测方法,通过设置的LAMP方法对杀鲑气单胞菌的最低检测浓度为2x101 CFU/mL,比普通PCR的检测灵敏度高102倍,有效的提高了检测灵敏度,该杀鲑气单胞菌LAMP‑HNB快速检测方法,通过设计的具有六条特异性引物,该体系可以特异性的检测到杀鲑气单胞菌,对其他菌株无扩增,且琼脂糖凝胶电泳结果显示,只有杀鲑气单胞菌发生了扩增,对杀鲑气单胞菌检测的特异性较强。

    大菱鲆养殖用益生菌、饲料及无抗化养殖方法

    公开(公告)号:CN112021218A

    公开(公告)日:2020-12-04

    申请号:CN202010771927.0

    申请日:2020-08-04

    Abstract: 本发明提出了大菱鲆养殖用益生菌、饲料及无抗化养殖方法,该益生菌菌株命名为纳豆芽孢杆菌ND2,经鉴定为枯草芽孢杆菌属,该菌株于2020年06月8日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M 2020184。该益生菌可有效抑制大菱鲆养殖的致病病原菌,将该益生菌应用于饲料可替代抗生素起到防治大菱鲆疾病的效果,采用该无抗化养殖方法可在保证大菱鲆健康成长前提下,在养殖全周期过程中减少或避免抗生素的使用,从而解决大菱鲆养殖中抗生素残留以及环境污染的问题。

    一种约氏不动杆菌噬菌体分离方法

    公开(公告)号:CN110592028A

    公开(公告)日:2019-12-20

    申请号:CN201910904602.2

    申请日:2019-09-24

    Abstract: 本发明一种约氏不动杆菌噬菌体分离方法包括培养基及试剂,水样的处理,噬菌体的富集及噬菌体的分离,观察现象,发现双层平板上出现大块透明斑点,证明成功分离出约氏不动杆菌噬菌体。本发明的有益效果在于噬菌体分离更加快捷准确,实验周期短,实验操作要求不高,并且极大地提高了噬菌体分离的成功率,具有相当高的实际应用性和应用前景。

    可同时检测副溶血弧菌和创伤弧菌的双重LAMP方法

    公开(公告)号:CN105219845B

    公开(公告)日:2018-10-30

    申请号:CN201510452614.8

    申请日:2015-07-28

    Inventor: 周顺 高志鑫 张敏

    Abstract: 本发明公开了一种双重LAMP检测方法,该方法可同时检测副溶血弧菌和创伤弧菌。属于分子生物学技术领域。所述LAMP检测体系中含有检测副溶血弧菌基因OmpA和创伤弧菌metalloprotease基因的引物组,该引物组分别包含OmpA基因和etalloprotease基因的一对外引物F3、B3和一对内引物FIP、BIP;内引物BIP上分别含有PstI和BamHI酶切位点。该发明方法灵敏度高,特异型好,操作简单,结果观察直观明了,检测速度快。

    一种加利福尼亚红参人工催产的方法

    公开(公告)号:CN104396806A

    公开(公告)日:2015-03-11

    申请号:CN201410549293.9

    申请日:2014-10-17

    CPC classification number: Y02A40/81 A01K61/00

    Abstract: 本发明公开了一种加利福尼亚红参人工催产的方法,具体操作为:海参性腺指数超过15%时,向养殖海参的养殖槽中加入1%的螺旋藻液搅匀进行培养,10-15min后将雄性海参取出置于排精槽中进行排精,20-30min后将雌性海参取出至于排卵槽中进行排卵,收集精卵进行人工授精,排精槽和排卵槽中为干净的海水。采用上述方案对加利福尼亚红参进行人工催熟,其可有效刺激雄性和雌性海参排精、排卵,实现排精、排卵的同步性,可应用于不同尺度范围的育苗生产;另外使用的螺旋藻液配制方便,较阴干、流水、升温刺激更容易操作实施。

    海紫杂交扇贝恢复系的构建方法与应用

    公开(公告)号:CN104186387A

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201410428985.8

    申请日:2014-08-27

    CPC classification number: Y02A40/81

    Abstract: 本发明涉及一种海紫杂交扇贝恢复系的构建方法及应用。该恢复系是能使雄性不育系后代恢复雄性可育特性的紫扇贝品系,其中海紫杂交扇贝是海湾扇贝卵子与紫扇贝精子的杂交后代。其构建方法是选择雄性不育系中的优良个体,用不同的紫扇贝精子连续回交,直到后代全部为雌雄同体时,即获得该雄性不育系的恢复系。最后用恢复系与相应的海紫杂交扇贝雄性不育系杂交生产海紫杂交扇贝商品苗种。本发明首次在动物中建立了雄性不育系恢复系,有效克服了雌雄同体扇贝杂交中自体受精的障碍,且生产的海紫杂交扇贝当年产量比海湾扇贝提高50%以上。

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