一种碱基编辑器及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110117621B

    公开(公告)日:2021-07-16

    申请号:CN201910441516.2

    申请日:2019-05-24

    Abstract: 本发明提供了一种碱基编辑器及其制备方法和应用,属于基因编辑技术领域,所述碱基编辑器包括pCMV‑dCpf1‑RR‑eBE重组质粒和pLbCpf1‑sgRNA重组质粒;所述应用包括以下步骤:确定靶标序列,设计单链寡核苷酸对;退火获得双链DNA片段;连接到pLbCpf1‑sgRNA重组质粒中获得靶位点sgRNA表达载体;靶位点sgRNA表达载体与pCMV‑dCpf1‑RR‑eBE重组质粒共转染细胞后培养;本发明所述碱基编辑器能够特异性的将靶位点的胞嘧啶C突变为胸腺嘧啶T,而对非靶位点的碱基没有任何影响,基因编辑效率在20%~30%之间。

    一种CRISPR/Cas基因编辑系统及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110117622B

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN201910441537.4

    申请日:2019-05-24

    Abstract: 本发明提供了一种CRISPR/Cas基因编辑系统及其制备方法和应用,属于基因编辑技术领域,所述CRISPR/Cas基因编辑系统包括pcDNA3.1‑LjCas9质粒和pLjCas9‑sgRNA质粒。所述应用包括以下步骤:确定靶标序列,设计单链寡核苷酸对;退火获得双链DNA片段;连接到pLjCas9‑sgRNA质粒中获得靶标序列sgRNA表达载体;靶标序列sgRNA表达载体与pcDNA3.1‑LjCas9质粒共转染细胞后培养。所述基因编辑系统能够对靶标DNA进行特异性切割,编辑效率高。

    一种载体组合及其应用
    4.
    发明授权

    公开(公告)号:CN110129366B

    公开(公告)日:2020-09-01

    申请号:CN201910441545.9

    申请日:2019-05-24

    Abstract: 本发明提供了一种载体组合及其应用,属于基因工程技术领域。所述载体组合包括pCpf1‑sgRNA和pY010‑RR;所述pCpf1‑sgRNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示;所述pY010‑RR的构建方法包括:将CPF4077基因片段插入到pY010载体中,得到pY010‑RR;所述CPF4077基因片段的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。采用本发明提供的载体组合,可以识别48bp的靶标DNA序列并开展特异性切割,从而使得基因编辑的特异性大大提高。

    一种碱基编辑器及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN110117621A

    公开(公告)日:2019-08-13

    申请号:CN201910441516.2

    申请日:2019-05-24

    Abstract: 本发明提供了一种碱基编辑器及其制备方法和应用,属于基因编辑技术领域,所述碱基编辑器包括pCMV-dCpf1-RR-eBE重组质粒和pLbCpf1-sgRNA重组质粒;所述应用包括以下步骤:确定靶标序列,设计单链寡核苷酸对;退火获得双链DNA片段;连接到pLbCpf1-sgRNA重组质粒中获得靶位点sgRNA表达载体;靶位点sgRNA表达载体与pCMV-dCpf1-RR-eBE重组质粒共转染细胞后培养;本发明所述碱基编辑器能够特异性的将靶位点的胞嘧啶C突变为胸腺嘧啶T,而对非靶位点的碱基没有任何影响,基因编辑效率在20%~30%之间。

    一种牵引式小籽粒联合式播种机

    公开(公告)号:CN109874421A

    公开(公告)日:2019-06-14

    申请号:CN201910149268.4

    申请日:2019-02-28

    Abstract: 本发明公开了一种牵引式小籽粒联合式播种机,涉及农业机械设计技术领域,包括机架;数个播种装置;限深装置;开沟装置;以及旋耕灭茬装置,旋耕灭茬装置包括旋耕轴、数个旋耕灭茬刀、刀座和刮土板;旋耕轴旋转设置于机架上,旋耕灭茬刀通过刀座并排设置于旋耕轴上,刮土板固定设置于机架上,旋耕灭茬刀包括至少两组刀柄,刀柄包括伸长板和弯曲板,伸长板由连接端向伸长端逐渐变薄,弯曲板与伸长板固定连接,弯曲板的板面向一侧扭弯,弯曲板和伸长板一体成型。本发明的有益效果是,小籽粒在机械化播种之前,将杂草等作物搅碎,然后用刮土板将其与土壤刮平,降低了杂草等作物对播种的影响,提高播种质量。

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