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公开(公告)号：CN107151677B
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN201710153605.8
申请日：2017-03-15
申请人： 陕西师范大学
IPC分类号： C12N15/867
摘要： 本发明公开了一种基于慢病毒表达CRISPR/Cas9高效敲除低转染率细胞的方法。该方法涉及两种慢病毒，一种是表达sgRNA及Cas9的慢病毒，另一种是表达Cre蛋白的慢病毒。将多基因的sgRNA及Cas9同时克隆至慢病毒载体的两个同向loxp之间，在低转染效率的细胞内实现多基因同时敲除，再利用表达Cre的慢病毒，对基因组中整合的Cas9及sgRNA进行有效去除，防止过度表达Cas9及sgRNA造成脱靶效应。本发明结合了慢病毒具备的能够高效感染分裂与非分裂细胞以及loxp‑Cre系统高效去除反应的特点，该系统具有毒性小、基因敲除效率高、准确性高，周期短等特点，对于在低转染效率的细胞系中实现多基因敲除意义重大。
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公开(公告)号：CN102637532B
公开(公告)日：2014-07-09
申请号：CN201210118099.6
申请日：2012-04-19
申请人： 陕西师范大学
CPC分类号： Y02E10/542 , Y02P70/521
摘要： 本发明属于太阳电池技术领域，具体涉及一种将金属引入TiO2纳米棒阵列的染料敏化太阳电池光阳极及其制备方法。其中含有纳米电缆的染料敏化太阳电池光阳极，包括掺氟氧化锡玻璃以及附着在掺氟氧化锡玻璃表面的纳米TiO2颗粒层，纳米TiO2颗粒层中包含有Ag/TiO2纳米电缆。本发明的电子传输速率高，能够更有效地将电子传递到外电路的同时，不减少染料的吸附量，大大提高了光电转换效率，本发明的制备方法操作简单，成本低廉，副产物少。
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公开(公告)号：CN102637532A
公开(公告)日：2012-08-15
申请号：CN201210118099.6
申请日：2012-04-19
申请人： 陕西师范大学
CPC分类号： Y02E10/542 , Y02P70/521
摘要： 本发明属于太阳电池技术领域，具体涉及一种将金属引入TiO2纳米棒阵列的染料敏化太阳电池光阳极及其制备方法。其中含有纳米电缆的染料敏化太阳电池光阳极，包括掺氟氧化锡玻璃以及附着在掺氟氧化锡玻璃表面的纳米TiO2颗粒层，纳米TiO2颗粒层中包含有Ag/TiO2纳米电缆。本发明的电子传输速率高，能够更有效地将电子传递到外电路的同时，不减少染料的吸附量，大大提高了光电转换效率，本发明的制备方法操作简单，成本低廉，副产物少。
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公开(公告)号：CN107245493B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201710184537.1
申请日：2017-03-24
申请人： 陕西师范大学
IPC分类号： C12N15/63 , C12N15/113 , C12N9/22
摘要： 本发明公开了一种表达受茶碱调控的适体核酶修饰型sgRNA的载体，在表达的sgRNA‑AZ 2.0骨架的四碱基环(tetraloop)以及茎环2(stem loop 2)位置插入适体核酶P1‑F5；通过Kpn Ⅰ与EcoR Ⅰ位点和EcoR Ⅰ与Spe Ⅰ位点分别将U6启动子、sgRNA‑AZ 2.0骨架依次连入载体pUC19/EKSHL中，获得载体pU6‑sgRNA‑AZ 2.0；使用BsaⅠ酶切载体pU6‑sgRNA‑AZ 2.0，并利用粘性末端设计并连入针对目标基因的sgRNA序列，获得pU6‑sgRNA‑AZ 2.0‑target site。能有效介导Cas9蛋白的基因组编辑作用，并使其编辑活性受到茶碱调控；且能介导dCas9‑KRAB蛋白对目的基因的转录抑制，并使其抑制活性受到茶碱调控。
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公开(公告)号：CN107254014A
公开(公告)日：2017-10-17
申请号：CN201710532199.6
申请日：2017-07-03
申请人： 陕西师范大学
IPC分类号： C08F120/18 , C08F8/32 , C12N11/08 , C12N9/88
CPC分类号： C08F8/32 , C12N9/88 , C12N11/08 , C12Y402/0201 , C08F120/18
摘要： 本发明公开了一种复合固定化酶载体材料及其制备方法和应用，该载体材料是将UiO‑66‑NH2与3‑溴丙炔反应引入炔基后，再与端基为叠氮的聚甲基丙烯酸叔丁酯发生点击化学反应，然后水解，得到的粒径为280～320nm的纳米颗粒。本发明通过羧基与氨基间的静电吸附作用将果胶酶固定在该载体材料上，提高了果胶酶稳定性的同时又大大增加了可与果胶酶结合的活性位点，果胶酶的吸附量高，最高达到了89.7％，该固定化果胶酶有着较好的pH、温度和储存稳定性以及较好的重复使用性，重复使用8次后的相对酶活力仍为81％，在固定化酶领域有着巨大的应用前景。
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公开(公告)号：CN107151677A
公开(公告)日：2017-09-12
申请号：CN201710153605.8
申请日：2017-03-15
申请人： 陕西师范大学
IPC分类号： C12N15/867
摘要： 本发明公开了一种基于慢病毒表达CRISPR/Cas9高效敲除低转染率细胞的新方法。该方法涉及两种慢病毒，一种是表达sgRNA及Cas9的慢病毒，另一种是表达Cre蛋白的慢病毒。将多基因的sgRNA及Cas9同时克隆至慢病毒载体的两个同向loxp之间，在低转染效率的细胞内实现多基因同时敲除，再利用表达Cre的慢病毒，对基因组中整合的Cas9及sgRNA进行有效去除，防止过度表达Cas9及sgRNA造成脱靶效应。本发明结合了慢病毒具备的能够高效感染分裂与非分裂细胞以及loxp‑Cre系统高效去除反应的特点，该系统具有毒性小、基因敲除效率高、准确性高，周期短等特点，对于在低转染效率的细胞系中实现多基因敲除意义重大。
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公开(公告)号：CN107254014B
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201710532199.6
申请日：2017-07-03
申请人： 陕西师范大学
IPC分类号： C08F120/18 , C08F8/32 , C12N11/08 , C12N9/88
摘要： 本发明公开了一种复合固定化酶载体材料及其制备方法和应用，该载体材料是将UiO‑66‑NH2与3‑溴丙炔反应引入炔基后，再与端基为叠氮的聚甲基丙烯酸叔丁酯发生点击化学反应，然后水解，得到的粒径为280～320nm的纳米颗粒。本发明通过羧基与氨基间的静电吸附作用将果胶酶固定在该载体材料上，提高了果胶酶稳定性的同时又大大增加了可与果胶酶结合的活性位点，果胶酶的吸附量高，最高达到了89.7％，该固定化果胶酶有着较好的pH、温度和储存稳定性以及较好的重复使用性，重复使用8次后的相对酶活力仍为81％，在固定化酶领域有着巨大的应用前景。
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公开(公告)号：CN107245493A
公开(公告)日：2017-10-13
申请号：CN201710184537.1
申请日：2017-03-24
申请人： 陕西师范大学
IPC分类号： C12N15/63 , C12N15/113 , C12N9/22
摘要： 本发明公开了一种表达受茶碱调控的适体核酶修饰型sgRNA的载体，在表达的sgRNA‑AZ 2.0骨架的四碱基环(tetraloop)以及茎环2(stem loop 2)位置插入适体核酶P1‑F5；通过Kpn Ⅰ与EcoR Ⅰ位点和EcoR Ⅰ与Spe Ⅰ位点分别将U6启动子、sgRNA‑AZ 2.0骨架依次连入载体pUC19/EKSHL中，获得载体pU6‑sgRNA‑AZ 2.0；使用BsaⅠ酶切载体pU6‑sgRNA‑AZ 2.0，并利用粘性末端设计并连入针对目标基因的sgRNA序列，获得pU6‑sgRNA‑AZ 2.0‑target site。能有效介导Cas9蛋白的基因组编辑作用，并使其编辑活性受到茶碱调控；且能介导dCas9‑KRAB蛋白对目的基因的转录抑制，并使其抑制活性受到茶碱调控。
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