一种筛选LacZ基因标记山羊痘病毒的宿主细胞的方法

    公开(公告)号:CN112779293A

    公开(公告)日:2021-05-11

    申请号:CN202110113418.3

    申请日:2021-01-27

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种筛选LacZ基因标记山羊痘病毒的宿主细胞的方法,包括检测细胞的培养;将检测细胞置于底层胶为LMA,顶层胶为X‑gal、LMA混合液的培养介质中进行培养,观察培养介质中胶色变化,选择胶色不变化的检测细胞作为所述LacZ标记基于山羊痘病毒的宿主细胞;提取检测细胞RNA进行RT‑PCR,对得到的PCR扩增产物测序,并将测序DNA与LacZ基因进行同源性分析鉴定。本发明方法不光适用于乳仓鼠肾细胞、羊肾细胞、羔羊睾丸原代细胞,作为LacZ基因标记重组病毒的宿主细胞都可使用该方法进行筛选,通过简单的变色观察即可筛选出适合LacZ标记重组病毒的宿主细胞,为后续便于挑蓝色病毒蚀斑纯化,排除细胞本身产生蓝斑对LacZ基因标记重组病毒蓝斑造成干扰。

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