公开(公告)号：CN102399278B

公开(公告)日：2014-03-05

申请号：CN201110195298.2

申请日：2011-07-04

申请人： 辽宁师范大学

发明人： 吴芬芳 ,  冯波 ,  李庆伟

IPC分类号： C07K14/435 ,  C07K1/22

摘要： 本发明涉及Protein G亲和层析法纯化无颌类脊椎动物血清中的天然蛋白-intelectin。包括：提取新鲜的日本七鳃鳗血清，将其与Protein GAgarose进行免疫沉淀反应，电泳检测得到两条特异性条带，分子量分别为66kD和40kD。沉淀得到的蛋白进行双向电泳后经质谱分析表明均为intelectin。序列比对显示intelectin与高等动物免疫球蛋白Fc段具有同源性，这为其能与Protein G Agarose共沉淀提供了证据。Intelectin是一种重要的免疫抗菌分子，本发明为实验室科学研究及生物制药提供了一种操作快速简便且经济有效的无颌类脊椎动物天然蛋白intelectin的纯化方法。

公开(公告)号：CN101906416A

公开(公告)日：2010-12-08

申请号：CN200910011854.9

申请日：2009-06-04

申请人： 辽宁师范大学

发明人： 李庆伟 ,  吴芬芳 ,  张宁 ,  王华颖

IPC分类号： C12N15/11 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K14/435 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及人补体片段C5a在大肠杆菌表达系统中的克隆和表达，以及表达产物的纯化和生物活性。包括：根据大肠杆菌偏爱密码子设计并合成一组引物，通过重叠PCR的方法获得C5a的DNA片段，将其克隆于硫氧还蛋白融合表达载体pET32a中，表达的融合蛋白以胞浆可溶性蛋白的形式存在。通过Ni2+亲和层析、肠激酶酶切和进一步纯化，得到高纯度的C5a蛋白。该蛋白对人中性粒细胞具有明显的趋化活性，能刺激人中性粒细胞呼吸爆发和分泌乳铁蛋白，并能诱导人单核细胞分泌IL-8。

公开(公告)号：CN101721680A

公开(公告)日：2010-06-09

申请号：CN200910219869.4

申请日：2009-11-13

申请人： 辽宁师范大学

发明人： 李庆伟 ,  吴芬芳

IPC分类号： A61K38/17 ,  A61P31/00 ,  A61P35/00 ,  G01N33/569 ,  G01N33/574

CPC分类号： A61K38/17

摘要： 本发明涉及一种物质的用途，即无颌类脊椎动物可变淋巴细胞受体(VLR)在制药中的用途，尤其是在制造抗致病性微生物、抗肿瘤治疗性药物及诊断中的用途。可变淋巴细胞受体(VLR)是在无颌类脊椎动物中发现的一种新型可变受体。它能够特异性识别不同的抗原，对特异性抗原的亲和力比lgG类抗体高十几倍。其独有的特性可望像抗体类药物、甚至优于抗体类药物在抗微生物感染及抗肿瘤诊断及治疗中得到应用。迄今为止，未见可变淋巴细胞受体(VLR)在制药领域中应用。

公开(公告)号：CN102399278A

公开(公告)日：2012-04-04

申请号：CN201110195298.2

申请日：2011-07-04

申请人： 辽宁师范大学

发明人： 吴芬芳 ,  冯波 ,  李庆伟

IPC分类号： C07K14/435 ,  C07K1/22

摘要： 本发明涉及Protein G亲和层析法纯化无颌类脊椎动物血清中的天然蛋白-intelectin。包括：提取新鲜的日本七鳃鳗血清，将其与Protein GAgarose进行免疫沉淀反应，电泳检测得到两条特异性条带，分子量分别为66kD和40kD。沉淀得到的蛋白进行双向电泳后经质谱分析表明均为intelectin。序列比对显示intelectin与高等动物免疫球蛋白Fc段具有同源性，这为其能与Protein G Agarose共沉淀提供了证据。Intelectin是一种重要的免疫抗菌分子，本发明为实验室科学研究及生物制药提供了一种操作快速简便且经济有效的无颌类脊椎动物天然蛋白intelectin的纯化方法。