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公开(公告)号:CN115843685A
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202211504173.8
申请日:2022-11-28
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明涉及本发明涉及一种辣椒材料P136的遗传转化方法,具体包括以下步骤:1)获得无菌苗;2)切外植体放预培养基黑暗两天;3)带有目的基因的农杆菌侵染外植体并置黑暗共培养两天,转化过程中分别加入0、100、200浓度的AS,探究对外植体芽分化的影响;4)转分化培养基:本配方培养基将外植体放入10天,芽分化率达21%,放入30天后,芽分化率达60%;5)隔12~14天继代;6)有芽点产生过后放芽伸长培养基;7)芽长到2~3cm后放入生根培养基、生根后移栽到土里;8)收种,种植多代至种子基因纯合。本发明优点在于:能提高辣椒材料P136转化过程中外植体发芽率,芽伸长率,并得到转基因辣椒植株。
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公开(公告)号:CN101487048A
公开(公告)日:2009-07-22
申请号:CN200910020964.1
申请日:2009-01-19
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种鉴别辣椒抗疫病性状的分子标记方法,包括辣椒基因组DNA的提取、PCR扩增及特异酶切产物多态性分析,其特征在于根据植物抗病基因序列人工合成一对由一定数量的碱基组成特定序列的核苷酸分子,以此对核苷酸分子为引物,通过PCR反应得到分子标记,利用此标记中的特异酶切产物的大小能鉴别出辣椒抗疫病材料和感疫病材料。这一方法用于辣椒苗期或成株期抗疫病性筛选,能极大地加速辣椒抗疫病育种进程。
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公开(公告)号:CN101487048B
公开(公告)日:2012-05-23
申请号:CN200910020964.1
申请日:2009-01-19
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种鉴别辣椒抗疫病性状的分子标记方法,包括辣椒基因组DNA的提取、PCR扩增及特异酶切产物多态性分析,其特征在于根据植物抗病基因序列人工合成一对由一定数量的碱基组成特定序列的核苷酸分子,以此对核苷酸分子为引物,通过PCR反应得到分子标记,利用此标记中的特异酶切产物的大小能鉴别出辣椒抗疫病材料和感疫病材料。这一方法用于辣椒苗期或成株期抗疫病性筛选,能极大地加速辣椒抗疫病育种进程。
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公开(公告)号:CN102140517A
公开(公告)日:2011-08-03
申请号:CN201110007410.5
申请日:2011-01-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种苗期鉴别辣椒细胞质育性的分子标记方法,该方法首先人工设计合成一对特异核苷酸序列作为引物,以引物对辣椒线粒体DNA进行PCR扩增,并对扩增产物以0.8%的琼脂糖凝胶进行电泳,若电泳结果中出现特异条带,则表示该泳道中的扩增产物是不育型细胞质植株;若电泳结果中没有出现特异条带,则表示该泳道中的扩增产物是可育型细胞质植株。其步骤简单快捷、稳定可靠,鉴别结果与田间花器官育性鉴定结果准确一致、重复性好,特别适用于辣椒CMS雄性不育分子标记辅助育种,能够很好地提高选择效率,加速育种进程。
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公开(公告)号:CN102140517B
公开(公告)日:2012-09-26
申请号:CN201110007410.5
申请日:2011-01-14
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种苗期鉴别辣椒细胞质育性的分子标记方法,该方法首先人工设计合成一对特异核苷酸序列作为引物,以引物对辣椒线粒体DNA进行PCR扩增,并对扩增产物以0.8%的琼脂糖凝胶进行电泳,若电泳结果中出现特异条带,则表示该泳道中的扩增产物是不育型细胞质植株;若电泳结果中没有出现特异条带,则表示该泳道中的扩增产物是可育型细胞质植株。其步骤简单快捷、稳定可靠,鉴别结果与田间花器官育性鉴定结果准确一致、重复性好,特别适用于辣椒CMS雄性不育分子标记辅助育种,能够很好地提高选择效率,加速育种进程。
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公开(公告)号:CN101487049B
公开(公告)日:2011-04-06
申请号:CN200910021240.9
申请日:2009-02-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种利用分子标记淘汰辣椒感疫病育种材料的方法,将抗疫病性未知的辣椒育种材料播种于育苗盘进行常规管理,等幼苗长至3~4片真叶时,用改良SDS法分别提取不同育种材料嫩叶的基因组DNA,利用分子标记的正反向引物进行PCR扩增。PCR扩增产物在1.2%琼脂糖凝胶上进行电泳分离,溴化乙锭染色,利用凝胶成像系统观察、记录电泳结果。若电泳结果显示能扩增出一条长度为990bp的特征条带,则该材料为感疫病辣椒育种材料,将其淘汰;若电泳结果显示不能扩增出上述特征条带,则该材料为抗疫病辣椒育种材料。该方法具有淘汰周期短、成本低、结果可靠等优点,且不影响对其他性状的观察。
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公开(公告)号:CN101487049A
公开(公告)日:2009-07-22
申请号:CN200910021240.9
申请日:2009-02-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种利用分子标记淘汰辣椒感疫病育种材料的方法,将抗疫病性未知的辣椒育种材料播种于育苗盘进行常规管理,等幼苗长至3~4片真叶时,用改良SDS法分别提取不同育种材料嫩叶的基因组DNA,利用分子标记的正反向引物进行PCR扩增。PCR扩增产物在1.2%琼脂糖凝胶上进行电泳分离,溴化乙锭染色,利用凝胶成像系统观察、记录电泳结果。若电泳结果显示能扩增出一条长度为990bp的特征条带,则该材料为感疫病辣椒育种材料,将其淘汰;若电泳结果显示不能扩增出一条长度为990bp的特征条带,则该材料为抗疫病辣椒育种材料。该方法可将辣椒感疫病育种材料在其生长的早期阶段予以淘汰,具有淘汰周期短、成本低、结果可靠等优点,且不影响对其他性状的观察。
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