公开(公告)号：CN109706257B

公开(公告)日：2022-05-27

申请号：CN201910186379.2

申请日：2019-03-12

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 李勤凡 ,  王宁宁 ,  王晶 ,  范玉堂 ,  许信刚

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/14 ,  C12Q1/10 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/19 ,  C12R1/445 ,  C12R1/465 ,  C12R1/385 ,  C12R1/37 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种快速检测奶牛子宫内膜炎中病原菌的方法，包括下列步骤：1)采用试剂盒方法提取培养过夜的子宫分泌物中6种常见病原菌的DNA；2)在含有上述细菌DNA的反应体系中，加入一种可以同时检测6种细菌特异性序列的PCR引物系统进行扩增；3)配制2％琼脂糖凝胶进行凝胶电泳，电压：120V，时间：45min，随后进行电泳紫外成像。该方法基于多重聚合酶链式反应技术，可实现同时检测大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、化脓隐秘杆菌、乳房链球菌、奇异变形杆菌和绿脓杆菌6种细菌，较测序、单重PCR等技术操作更简便、成本更低、且有较高的灵敏度和特异性，极大的缩短了临床细菌检测鉴定周期。

公开(公告)号：CN109706257A

公开(公告)日：2019-05-03

申请号：CN201910186379.2

申请日：2019-03-12

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 李勤凡 ,  王宁宁 ,  王晶 ,  范玉堂 ,  许信刚

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/14 ,  C12Q1/10 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/19 ,  C12R1/445 ,  C12R1/465 ,  C12R1/385 ,  C12R1/37 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种快速检测奶牛子宫内膜炎中病原菌的方法，包括下列步骤：1)采用试剂盒方法提取培养过夜的子宫分泌物中6种常见病原菌的DNA；2)在含有上述细菌DNA的反应体系中，加入一种可以同时检测6种细菌特异性序列的PCR引物系统进行扩增；3)配制2％琼脂糖凝胶进行凝胶电泳，电压：120V，时间：45min，随后进行电泳紫外成像。该方法基于多重聚合酶链式反应技术，可实现同时检测大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、化脓隐秘杆菌、乳房链球菌、奇异变形杆菌和绿脓杆菌6种细菌，较测序、单重PCR等技术操作更简便、成本更低、且有较高的灵敏度和特异性，极大的缩短了临床细菌检测鉴定周期。