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公开(公告)号：CN103113454A
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN201310029025.X
申请日：2013-01-25
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C07K1/14
摘要： 本发明公开了一种从牛冷冻精子中提取蛋白的方法，包括以下步骤：将冷冻精液解冻后转移到离心管中，在4℃、1000×g条件下离心5min，弃上清液；2）加入1ml预冷到4℃的PBS洗涤，在4℃、1000×g条件下离心5min，重复3次；3）向上述沉淀中加200µl蛋白裂解液，涡旋，使样品充分溶解；4）静置5min后，在4℃、12000×g条件下离心30min，上清即为精子蛋白溶液。本发明从牛冷冻精子中提取蛋白的方法操作简单，为将来从分子手段研究精子冷冻保护机理奠定了基础，可以进一步提升精子冷冻后的活力。
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公开(公告)号：CN101220346A
公开(公告)日：2008-07-16
申请号：CN200810017492.X
申请日：2008-02-03
申请人： 西北农林科技大学
摘要： 本发明公开了一种生物细胞冷冻抗冻剂，该100ml细胞冷冻抗冻剂由下列原料组成：海带多糖0.025～0.3g、葡萄糖2.0～3.5g、柠檬酸钠0.5～1.5g、蒸馏水60～80ml、白蛋白10～20ml、甘油5～18ml、青霉素5～15万单位。其制备方法是：将葡萄糖、柠檬酸钠溶于蒸馏水中配制成基础液；在加入白蛋白混合均匀后添加青霉素配制成I液；在I液里添加甘油配制成II液；在II液中加入海带多糖混合均匀；再调pH值为6～7.5，然后进行过滤灭菌，冷却至室温，放入2～5℃冰箱中备用。该细胞冷冻保护液适用于哺乳动精液、体细胞、卵母细胞、早期胚胎及器官组织冷冻保存，特别适用于各种哺乳精液冷冻保存。
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公开(公告)号：CN101220345A
公开(公告)日：2008-07-16
申请号：CN200810017382.3
申请日：2008-01-23
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12N5/06
摘要： 本发明公开了一种牛冷冻精液稀释液，该100ml稀释液中各原料的用量为：果糖0.8～1.2g、柠檬酸钠1.4～1.6g、TRIS 2.3～2.6g、低密度脂蛋白7.5～9.5g、甘油5～8ml、青霉素8.5～12万IU、余量为蒸馏水。其制备方法是：将果糖、柠檬酸钠和TRIS溶于蒸馏水中配制成基础液；在基础液中加入青霉素G钠和低密度脂蛋白配制成I液；在I液中添加甘油即配制成II液；再调pH值为6～7.5，然后进行过滤灭菌，冷却至室温，放入2～5℃冰箱中备用。本发明的牛冷冻精液稀释液效果良好且可靠，能够为牛人工受精提供高质量的优质细管冷冻精液，具有十分广阔的市场应用前景。
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公开(公告)号：CN102643779A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210120136.7
申请日：2012-04-23
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12N5/076
摘要： 本发明公开了一种用于提高动物精原干细胞增殖率的培养体系，该培养体系由基础培养液和睾丸组织液组成，其中，基础培养液占总培养体系体积的70％，睾丸组织液占总培养体系体积的30％；所述基础培养液是以含4mM L-谷氨酰胺的高糖DMEM/F12细胞培养基为基础，在其中加入10％体积的胎牛血清和5％体积的双抗。采用本发明的培养体系，可使动物精原干细胞在短期内大量增殖，可以为珍稀濒危动物和优良家畜遗传资源的保护提供新的途径。
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公开(公告)号：CN101965830A
公开(公告)日：2011-02-09
申请号：CN201010508619.5
申请日：2010-10-18
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： A01N1/02
摘要： 本发明公开了一种用于家畜精液冷冻保存的抗冻剂和抗冻稀释液及其制备方法，本发明提供的用于牛、猪精液冷冻保存的抗冻剂，为褐藻胶，具体包括如下体积份数的组分：在常规稀释液(葡萄糖1.1g、柠檬酸1.48g、Tris 2.42g、新鲜鸡蛋黄10％、青霉素钠0.06g、硫酸链霉素0.1g溶于100ml蒸馏水)中添加量为60～110mg。100～110mg(牛用)、60～80mg(猪用)。其制备方法是：在常规稀释液中添加100～110mg褐藻胶与4％甘油(牛用)、60～80mg褐藻胶与1％甘油(猪用)配制成冷冻稀释液；调节溶液pH值至6.5～7.5，渗透压286mOsm.L-1，过滤灭菌后放入4℃冰箱中备用。本发明首次将褐藻胶用于牛、猪精液的冷冻保存中，解冻后精子活率、顶体完整率、质膜完整率分别为65％、69％、72％(牛)，58％、62％、63％(猪)。
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公开(公告)号：CN101519664A
公开(公告)日：2009-09-02
申请号：CN200910021856.6
申请日：2009-04-03
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12N15/861 , A01K67/027 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及一种重组腺病毒载体制备转基因动物的方法。其技术方案为：利用复制缺陷型腺病毒骨架质粒载体携带外源目标基因序列，在含有Ela区序列的包装细胞(293，911细胞等)中获得重组腺病毒载体，与供体卵或受精卵细胞结合处理，经体外培养发育，移植入受体动物体内，正常产仔，获得稳定遗传的具有不同目标基因功能的转基因动物。本发明所涉及的转基因动物方法具有很高的成功率，所制备的转基因动物可直接应用于功能基因的确证、药用蛋白的表达(包括器官、血液和乳腺)、不同目标功能基因转基因动物以及动物遗传疾病模型。
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公开(公告)号：CN1962852A
公开(公告)日：2007-05-16
申请号：CN200610104978.8
申请日：2006-11-27
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C12N5/00
摘要： 本发明公开了红景天多糖在制备生物细胞冷冻抗冻剂、制备保护哺乳动物精液冷冻抗冻剂、制备保护卵母细胞冷冻抗冻剂、制备保护体细胞冷冻抗冻剂、制备保护早期胚胎冷冻抗冻剂、制备保护器官组织冷冻抗冻剂中的新用途，其产品的制备方法是：先将所述重量的葡萄糖、Tris、柠檬酸钠等用无离子水配置成基础液；再将基础液和卵黄按照5～9∶1～5配制，然后加入所述重量青霉素和所述重量链霉素配制成I液，在I液中加入所述重量的甘油配制成II液；在II液中加入所述重量红景天多糖，即得到本发明的生物细胞冷冻抗冻剂。本发明红景天多糖的新用途对于哺乳动物精液、体细胞、卵母细胞、早期胚胎及器官组织冷冻保存具有十分广阔的市场应用前景。
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公开(公告)号：CN111995669A
公开(公告)日：2020-11-27
申请号：CN202010756696.6
申请日：2020-07-31
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： C07K14/59 , C12N15/861 , A61K38/24 , A61P15/08
摘要： 本发明公开了一种人促卵泡激素及其体外重组装方法，属于生物医药与基因工程技术领域。本发明提供的人促卵泡激素是将FSHα和FSHβ亚基基因分别在动物乳汁中表达后，在体外重组装获得，具有与Gonal-F等同的生物学功能。制备方法包括构建人FSHα和FSHβ基因表达载体，将人FSHα和FSHβ亚基的表达在动物乳汁中，进行体外重组装获得具备生物学活性的人促卵泡激素，本发明可以避免有生物活性的内源FSH在动物体内的积聚，从而降低由于大量生物活性FSH的积累导致的动物患肿瘤的风险。
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公开(公告)号：CN106538510B
公开(公告)日：2019-07-19
申请号：CN201610841222.5
申请日：2016-09-22
申请人： 西北农林科技大学
IPC分类号： A01N1/02
摘要： 本发明公开了番茄红素和芝麻酚配伍在家畜精液冷冻保存剂中的应用，本发明提供了一种家畜精液冷冻保存剂，能显著提高家畜精子的存活率，包括冷冻基础液、鸡蛋黄、番茄红素和芝麻酚，本发明还提供另一种家畜精液冷冻保存剂，包括冷冻基础液、鸡蛋黄、番茄红素、芝麻酚和甘油，本发明首次将番茄红素和芝麻酚配伍作为抗冻剂用于猪、羊和牛精液冷冻保存，适用于猪、羊和牛细管冷冻精液人工授精及精液超低温冷冻后的长期保存和长途运输后输精，可显著提高冷冻‑解冻后猪、羊和牛精子活率、顶体完整率、质膜完整率。
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