一种携带IL-15/sIL-15Ra融合基因的微环DNA表达载体的构建方法

    公开(公告)号:CN104830884A

    公开(公告)日:2015-08-12

    申请号:CN201510033162.X

    申请日:2015-01-22

    Applicant: 苏州大学

    Inventor: 吴艳 刘海燕 郁晓

    Abstract: 本发明公开了一种携带IL-15/sIL-15Ra融合基因的微环DNA表达载体的构建方法。该方法包括:1)IL-15/sIL-15Ra融合基因的获取;2)融合基因重组亲本质粒的构建;以及3)融合基因微环DNA的诱导和纯化。具体而言,通过分别克隆IL-15和sIL-15Ra基因,利用重组PCR技术将两个基因融合,构建重组亲本质粒后转化大肠杆菌,通过甩环和纯化,获得携带IL-15/sIL-15Ra融合基因的微环DNA表达载体。本发明首次将IL-15/sIL-15Ra融合基因重组于微环DNA,与传统方法相比,获得更加方便,功能也更加稳定,增加了生物安全性。

    以减毒沙门氏菌为载体的口服肿瘤疫苗的制备及其应用

    公开(公告)号:CN103550789A

    公开(公告)日:2014-02-05

    申请号:CN201310600070.6

    申请日:2013-11-25

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种以减毒沙门氏菌为载体的口服肿瘤疫苗的制备及其应用,该疫苗的制备包括以下步骤:(1)首先通过分子生物学方法构建整合了微基因与自转运系统的重组疫苗载体;(2)将步骤(1)所述的重组疫苗载体电转化入减毒沙门氏菌SL7207中,构建出重组口服肿瘤疫苗。本发明首次将微基因与自转运系统整合到同一个载体上,通过电转化沙门氏菌获得了口服肿瘤疫苗,通过小鼠肿瘤模型,验证了该疫苗对肿瘤的免疫预防效果;从而可以将其应用在制备肿瘤的免疫预防药物领域中。

    一种重组新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗的制备及其应用

    公开(公告)号:CN102247593B

    公开(公告)日:2013-07-10

    申请号:CN201110188380.2

    申请日:2011-07-06

    Abstract: 本发明公开了一种重组新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗的制备方法,包括以下步骤:(1)首先构建携带IL-7基因的重组新城疫病毒;(2)扩增步骤(1)所述携带IL-7基因的重组新城疫病毒,然后感染肿瘤细胞,制备得到一种携带小鼠IL-7的重组新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗。本发明首次利用携带小鼠IL-7的重组新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗,通过小鼠肿瘤模型,验证了该疫苗对肿瘤的免疫预防和治疗效果;从而可以将其应用在制备肿瘤的免疫预防和治疗药物领域中。

    抗人IL-1α单克隆抗体及其应用

    公开(公告)号:CN102296050A

    公开(公告)日:2011-12-28

    申请号:CN201110142535.9

    申请日:2011-05-30

    Abstract: 本发明属于微生物工程领域,具体涉及一种抗人IL-1α单克隆抗体及其制备方法和应用,所述单克隆抗体由杂交瘤细胞株L 产生,所述杂交瘤细胞株的保藏信息为:保藏单位:中国典型培养物保藏中心;地址:中国武汉大学;保藏日期:2011年1月7日;保藏编号:CCTCC NO:C201102;分类命名:杂交瘤细胞株L-1F12。所述高特异性、高效价的鼠抗人IL-1α单克隆抗体,能够采用间接免疫酶联吸附实验(ELISA),免疫细胞荧光,免疫荧光流式细胞分析等多种手段实现对IL-1α表达的快速通量检测。

    人抗粘病毒蛋白A-hMxA的单克隆抗体及其制备和应用

    公开(公告)号:CN101570742A

    公开(公告)日:2009-11-04

    申请号:CN200910029412.7

    申请日:2009-04-13

    Inventor: 吴康 刘海燕 刘鹏

    Abstract: 本发明公开了一种抗人MxA单克隆抗体,所述抗人MxA单克隆抗体由杂交瘤细胞系CCTCC NO:C200916产生,所述单克隆抗体为IgG1亚类,kappa型;该单克隆抗体具有良好特异性和很高亲和力,能够识别人MxA的原核表达产物,人MxA的真核表达产物,干扰素或其他因素诱导的人MxA基因表达产物,同时可以分别识别MxA表达蛋白的变性蛋白和非变性蛋白,良好地反映该蛋白的聚合体的存在形式,因此,利用该单克隆抗体可以简便快速准确地检测出人MxA蛋白的表达水平。

    以减毒沙门氏菌为载体的口服肿瘤疫苗的制备及其应用

    公开(公告)号:CN103550789B

    公开(公告)日:2015-04-22

    申请号:CN201310600070.6

    申请日:2013-11-25

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种以减毒沙门氏菌为载体的口服肿瘤疫苗的制备及其应用,该疫苗的制备包括以下步骤:(1)首先通过分子生物学方法构建整合了微基因与自转运系统的重组疫苗载体;(2)将步骤(1)所述的重组疫苗载体电转化入减毒沙门氏菌SL7207中,构建出重组口服肿瘤疫苗。本发明首次将微基因与自转运系统整合到同一个载体上,通过电转化沙门氏菌获得了口服肿瘤疫苗,通过小鼠肿瘤模型,验证了该疫苗对肿瘤的免疫预防效果;从而可以将其应用在制备肿瘤的免疫预防药物领域中。

    一种重组新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗的制备及其应用

    公开(公告)号:CN102247593A

    公开(公告)日:2011-11-23

    申请号:CN201110188380.2

    申请日:2011-07-06

    Abstract: 本发明公开了一种重组新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗的制备方法,包括以下步骤:(1)首先构建携带IL-7基因的重组新城疫病毒;(2)扩增步骤(1)所述携带IL-7基因的重组新城疫病毒,然后感染肿瘤细胞,制备得到一种携带小鼠IL-7的重组新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗。本发明首次利用携带小鼠IL-7的重组新城疫病毒修饰的自体肿瘤疫苗,通过小鼠肿瘤模型,验证了该疫苗对肿瘤的免疫预防和治疗效果;从而可以将其应用在制备肿瘤的免疫预防和治疗药物领域中。

    一种携带TGF-βRⅡ和NKG2D基因的NK92细胞株、制备方法及用途

    公开(公告)号:CN103396996B

    公开(公告)日:2014-12-31

    申请号:CN201310036081.6

    申请日:2013-01-30

    Abstract: 本发明属于肿瘤过继治疗领域,具体涉及一种携带TGF-βRⅡ和NKG2D基因的NK92细胞株、制备方法及用途,所述的NK92细胞株转染有TGF-βRⅡ胞外段跨膜区和NKG2D胞内段构成的融合基因TN。本发明公开了一种携带TGF-βRⅡ胞外段跨膜区及NKG2D胞内段的自然杀伤细胞株(NK92-TN)及其制备方法、用途,制备时首先将TGF-βRⅡ胞外段跨膜区和NKG2D胞内段两段基因融合,将融合基因TN插入慢病毒制备的穿梭质粒中,与其他包装质粒通过磷酸钙方法转染293T细胞,获得慢病毒颗粒,进而转导NK92细胞,通过流式细胞分选仪分选YFP阳性的细胞,适用于临床过继免疫治疗肿瘤,这一细胞株的抗肿瘤能力优于其他靶向肿瘤抗原的细胞株,在TGF-β环境下能被有效激活,并有效抑制肿瘤的转移。

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